大肠癌患者VEGF和NO血清水平及其与恶变程度的关系

目的:研究血清中血管内皮生长因子(VEGF)和一氧化氮(NO)表达水平及其与大肠癌恶变程度的关系。方法:分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定和分光光度法检测46例大肠癌患者术前和30例健康人血清中VEGF和NO的含量。结果:大肠癌患者血清VEGF和NO表达水平均较健康人明显增高(P<0.01),且随着大肠癌浸润深度增加、有淋巴结转移以及Dukes分期愈晚者而显著增高(P<0.01)。血清VEGF与NO含量呈明显正相关(r=0.8152,P<0.01)。结论:VEGF和NO与大肠癌的发生、发展及转移调控过程有关,术前检测血清VEGF和NO含量对判断大肠癌的浸润转移以及Dukes分期具有重要价值。

引起幼儿腹泻的腺病毒的实验室诊断

目的 研究引起幼儿腹泻的腺病毒的型别。方法 取因腹泻住院的幼儿粪便标本,经PCR检测为腺病毒F组( Ad4 0或Ad4 1)阳性后,用2 93细胞分离病毒并培养,当细胞发生典型病变效应,刮下细胞备用:( 1)固定,送电镜室检测;( 2 )按照湖北中医学院检验系实验室常用的方法提取病毒DNA。用Sma I和Hind III 2种限制性核酸内切酶消化腺病毒DNA并与文献报道的Ad4 0和Ad4 1的酶切图谱比较。结果 5例阳性标本的PCR产物的大小是5 19bp.电镜可见细胞核内腺病毒晶格状排列;并且Sma I和Hind III的酶切图与文献报道的Ad4 1图谱一致。

自制四氧嘧啶针剂制作家兔糖尿病模型观察

目的 :观察用自制四氧嘧啶针剂制作家兔糖尿病模型的效果。方法 :将大兔分为对照组、针剂小剂量组、针剂大剂量组、溶液小剂量组、溶液大剂量组 5组分别注射生理盐水、不同剂量四氧嘧啶针剂和溶液。观察各组注射前和注射后 12h ,1天 ,2天 ,3天 ,5天 ,7天血中血糖、1,5 脱水葡萄糖醇水平动态变化和尿糖变化。结果 :四氧嘧啶针剂制作家兔糖尿病模型与四氧嘧啶溶液效果相同 ,但成模较快 ,成模率高。结论 :四氧嘧啶针剂制作家兔糖尿病模型作用迅速 ,成模率高 ,是静脉给药制作家兔糖尿病模型的安全有效方法。

中药翻白草的鉴别研究

翻白草，又名鸡腿儿、湖鸡腿、鸡脚草，为蔷薇科植物翻白草（Potentilla discolor Bge）的干燥全草，具有止血止痢，解毒之功能，主用于吐血、便血、崩漏、痢疾、疔疮、无名肿毒。近年来，有较多实验和临床研究证实其对糖尿病有良好的疗效。

内皮细胞条件培养液诱导单核细胞分化为内皮细胞的实验研究

目的研究ECV-304条件培养液诱导单核细胞分化为内皮细胞的可能性。方法贴壁法分离培养外周血单核细胞并进行鉴定。用购买的ECV-304细胞株制备条件培养液和M-CSF诱导单核细胞分化,观察细胞形态变化,收集细胞,用免疫组化与异植物血凝素结合试验鉴定。结果获得的单核细胞具有CD14阳性细胞占84.3%;刺激一周后的单核细胞形态发生改变并且Ⅷ因子、异植物血凝素结合试验阳性。结论ECV-304条件培养液能诱导单核细胞分化为内皮细胞,提示内皮细胞来源的一条途径。

实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测HLA-DRα基因mRNA表达

目的建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HLA-DRα基因mRNA表达。方法应用T-A克隆技术构建含HLA-DRα基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测牛膝多糖(ABPS)诱导人外周血单核细胞的HLA-DRαmRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较。结果实时荧光定量RT-PCR检测ABPS诱导人外周血单核细胞实验组HLA-DRαmRNA表达明显升高,而无ABPS诱导人外周血单核细胞对照组HLA-DRαmRNA表达没有改变,且半定量RT-PCR结果显示HLA-DRα出现类似的变化趋势。结论所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测HLA-DRαmRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确。

G-6-PD测定结果增高临床意义的探讨

葡萄糖6-磷酸脱氢酶（G6-PD）测定是诊断G-6-PD缺乏症的主要方法，当其测定结果低于正常时，常作为G-6-PD缺乏症的诊断依据；但其测定结果增高时，临床一般不予重视。我院从2003年至2005年进行的2407例G-6-PD检测中，检出G-6-PD活性增高者316例（13．1％），我们对其中有明确诊断的226例进行了观察，现报告如下。

现场检测中标本的抗凝和运送

现场检测（POCT）也称床边检测或就地检测，指在患者旁边进行的临床检测。通常不一定由临床检验师来操作，POCT的主要特点是不需要固定的检测场所，试剂和仪器是便携式的，并且可及时操作。由于能快速、简便和及时地检测患者的临床指标，缩短了患者治疗转换周期，有效地消除了一些试验的影响因素，其应用前景越来越广。POCT使用最多的是血液标本，其中一些检测对标本抗凝和运送有着严格的要求。下面就一些常见检测项目的血液标本抗凝和运送加以阐述。

人前列腺特异性抗原mRNA实时荧光PCR定量标准品的构建

目的构建实时荧光定量PCR(FQPCR)的标准品以定量检测人前列腺特异性抗原(PSA)mRNA的表达。方法以Trizol裂解抽提法提取LNCaP细胞的总RNA。以RTPCR法制备PSAcDNA目的片段并进行扩增;以AT载体克隆法制备重组质粒,并转化E.coliDH5α菌提取重组质粒,联合用氨苄青霉素筛选法和α筛选法、EcoRⅠ限制性酶切和序列分析法鉴定特异性重组质粒。用聚乙二醇沉淀法提纯质粒并检测λ260nm吸光度,确定原液的重组质粒的拷贝浓度并以此制备FQPCR梯度标准品。结果PSAcDNA目的片段成功制备并获得稳定的重组质粒,保持了目的片段的特异性和序列的完整性。结论成功构建了实时荧光定量PCR标准品。

重症监护病房下呼吸道医院感染鲍氏不动杆菌的耐药性分析

目的调查重症监护病房(ICU)下呼吸道医院感染鲍氏不动杆菌的耐药情况,指导临床医师合理用药。方法采用K-B法对109株ICU患者下呼吸道标本分离的鲍氏不动杆菌进行抗菌药物敏感性测定,依据美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2007年标准判断结果,同时用标准菌株进行质量控制。结果对鲍氏不动杆菌敏感率最高的是头孢哌酮/舒巴坦(77.1%),其次为亚胺培南(57.8%)和美罗培南(54.9%),其他抗菌药物敏感率<50.0%,耐药菌株存在较严重的交叉耐药现象,且ICU已检测出泛耐药菌株。结论ICU下呼吸道医院感染的鲍氏不动杆菌耐药现象非常严重,应继续加强对该菌的监测与控制,严防耐药菌株在ICU暴发流行。

下呼吸道感染革兰阴性杆菌的耐药现状分析

目的了解医院下呼吸道感染主要病原菌的分布及其耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。方法 617株革兰阴性杆菌采用法国生物梅里埃公司VITEK全自动微生物分析系统和GNI鉴定卡进行菌种鉴定;采用K-B法进行药敏试验,按照美国临床实验室标准化研究所2007年版操作和判读结果。结果分离率居前6位的革兰阴性杆菌依次为:铜绿假单胞菌(43.3%)、鲍氏不动杆菌(15.9%)、肺炎克雷伯菌(15.4%)、大肠埃希菌(8.2%)、嗜麦芽寡养单胞菌(8.2%)、肠杆菌属(4.0%);以上菌株对常用抗菌药物均产生了严重的耐药性,产超广谱β-内酰胺酶细菌总检出率为54.1%;铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌泛耐药菌株检出率分别为3.4%和6.1%。结论下呼吸道感染多为多药耐药菌,应熟悉细菌耐药特点及耐药机制,根据病原学检查结果合理选用抗菌药物。