Box-Behnken响应面法结合多指标综合评分法对青钱柳提取工艺的优化研究

目的以总黄酮、总三萜及总多糖的提取率为指标,采用Box-Behnken响应面法优化青钱柳的提取工艺。方法在单因素实验基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间、温度为影响因素,以总黄酮、总三萜及总多糖的提取率总量所得的综合评分为评价指标,采用Box-Behnken响应面法优化提取工艺。结果单因素试验结合Box-Behnken响应面法得到青钱柳最佳的提取工艺参数:乙醇体积分数45%,料液比1∶30,提取时间100min,温度60℃,提取次数3次;验证实验表明该工艺参数准确、可靠。结论Box-Behnken响应面法结合多指标综合评分法可用于青钱柳的提取工艺优化,且所得最优提取工艺稳定、可行,可以为青钱柳的合理利用和资源开发奠定基础。

茯苓酸性多糖分级提取及其抗肿瘤活性比较

目的：以不同碱度分级提取茯苓酸性多糖，进行抗肿瘤活性比较研究，以期探讨茯苓酸性多糖的构效关系。方法：将茯苓饮片分别用70％乙醇和水提取后的药渣，依次用0．1—1．0mol·L^-1 10个梯度氢氧化钠（NaOH）溶液分级提取，得到10种茯苓酸性多糖组分提取物；采用MTT法测定对HepG2肿瘤细胞抑制率，比较10种分级酸性多糖体外抗肿瘤活性大小。结果：0．9和1．0mol·L^-1 NaOH提取的茯苓酸性多糖对肿瘤细胞抑制率最高。结论：茯苓酸性多糖抗肿瘤活性与其酸性强弱相关。

高效液相色谱法同谱测定化瘀镇痛胶囊中4种皂苷类成分含量

化瘀镇痛胶囊源于武汉科德中医医院张德忠院长祖传秘方,由人参、三七、当归、赤芍等10余味中药组成,具有益气活血、软坚散结、解毒止痛之功效。在该祖传秘方临床疗效的基础上,武汉科德中医医院与湖北中医药大学中药资源与中药化学省级重点实验室合作将其研制成化瘀镇痛胶囊医院制剂。为了制定化瘀镇痛胶囊的质量控制标准,本研究采用高效液相色谱法（HPLC）同谱测定了该制剂中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1皂苷类成分的含量。

茯苓酸性多糖调节免疫功能活性研究

目的:探讨茯苓酸性多糖提取物调节免疫功能作用。方法:采用氢化可的松皮下注射液注射复制小鼠免疫功能低下模型,灌胃茯苓酸性多糖提取物,检测小鼠腹腔内吞噬细胞功能,测定小鼠血清中IL-2、TNF-α、INF-γ含量以及免疫器官脾脏和胸腺指数。结果:茯苓酸性多糖能增强氢化可的松致免疫低下小鼠巨噬细胞吞噬功能,显著提高小鼠细胞免疫因子IL-2、TNF-α、INF-γ的含量,显著增加脾脏和胸腺指数。结论:茯苓酸性多糖对氢化可的松致免疫低下小鼠具有调节免疫功能的作用。

黄芪总皂苷对气虚模型大鼠的补气作用及机制研究

目的:研究黄芪总皂苷对气虚模型大鼠的补气作用及可能机制,为阐明黄芪补气的药效物质基础提供参考。方法:将40只雄性Wistar大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、阳性对照组[补中益气丸,4.5 g/(kg·d),以生药量计]和黄芪总皂苷高、低剂量组[252、28 g/(kg·d),以总皂苷量计],每组8只。除正常组外,其余各组大鼠均采用"饮食不节+疲劳"法复制气虚模型。于造模同时,各给药组大鼠灌胃相应药物,正常组和模型组大鼠灌胃等体积水,每天1次,连续给药21 d。末次给药后,观察大鼠的一般情况;检测大鼠的体质量、胸腺指数、脾指数;记录其负重力竭游泳时间;测定其脾T淋巴细胞亚群CD3、CD4,肝组织中三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP),血清中白蛋白(ALB),全血中红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HBG)以及血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、白细胞介素2(IL-2)、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、胸腺指数、脾指数、负重力竭游泳时间以及脾T淋巴细胞亚群CD3、ATP、ADP、ALB和IL-12水平均显著降低或缩短(P<0.05或P<0.01),MDA、乳酸、CK和TNF-α水平均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,黄芪总皂苷高剂量组大鼠的体质量、脾指数、负重力竭游泳时间以及T淋巴细胞亚群CD3、ATP、ADP、ALB、RBC水平均显著升高或延长(P<0.05),MDA、乳酸、CK、TNF-α水平显著降低(P<0.05或P<0.01);黄芪低剂量组大鼠的负重力竭游泳时间、ATP、ADP、IL-2水平均显著升高或延长(P<0.05或P<0.01),MDA、乳酸、CK、TNF-α水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。与阳性对照组比较,黄芪总皂苷高剂量组大鼠脾指数、脾T淋巴细胞亚群CD3水平、负重力竭游泳时间、ATP水平显著升高或延长(P<0.05或P<0.01),黄芪总皂苷高、低剂量组大鼠MDA水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:黄芪总皂苷可通过减少机体乳酸的积累,降低CK活性、体内脂质过氧化物水平以及调节免疫,从而起到补气、延缓疲劳发生、增强运动能力的作用。

黄芪多糖对气虚大鼠的补气作用及其机制探讨

目的探讨黄芪多糖及分级醇沉多糖对气虚大鼠的补气作用及机制。方法将88只Wistar大鼠随机分为11组,分别为正常组,模型组,阳性药组,黄芪多糖(APS)高、低剂量组,10%乙醇沉淀多糖(APSM1)高、低剂量组,40%乙醇沉淀多糖(APSM2)高、低剂量组和80%乙醇沉淀多糖(APSM3)高、低剂量组。除正常组外,其余各组大鼠采用"饮食不节+负重游泳"建立气虚模型,给药组分别灌胃给予黄芪各多糖,正常组和模型组灌胃给予等量蒸馏水。3周后处死大鼠,记录大鼠体质量、游泳时间,计算胸腺指数、脾脏指数,检测大鼠血清白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素12(IL-12)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(ALB)、肝脏三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)等指标,评价黄芪多糖及不同乙醇沉淀多糖对气虚大鼠的补气作用。结果与模型组比较,黄芪多糖及分级醇沉多糖均可以明显降低MDA、TNF-α和乳酸含量(P<0.05,P<0.01),明显提高游泳时间(P<0.01);黄芪多糖、10%乙醇沉淀多糖、80%乙醇沉淀多糖可明显升高ALB、ATP及ADP含量(P<0.05,P<0.01);黄芪多糖、40%乙醇沉淀多糖、80%乙醇沉淀多糖可以明显升高IL-2含量(P<0.01);黄芪多糖、10%乙醇沉淀多糖、40%乙醇沉淀多糖能明显降低大鼠CK活力(P<0.05,P<0.01);40%乙醇沉淀多糖低剂量组还可明显升高IL-12水平(P<0.05)。结论黄芪多糖可通过降低机体血乳酸的积累,降低CK活力,降低大鼠体内脂质过氧化物水平,提升机体免疫力,起到补气、延缓疲劳发生、提高运动能力的作用;分级醇沉多糖作用靶点存在一定差异。

茯苓水提物UPLC指纹图谱的建立及其镇静催眠作用的谱效关系研究

目的:建立茯苓水提物的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并考察其与镇静催眠作用的谱效关系。方法:将10批不同产地茯苓经水提后得水提物。采用UPLC法测定该水提物,色谱柱为Waters HSS-C18,流动相为0.1%磷酸溶液-乙腈-甲醇(梯度洗脱),流速为0.4~0.2 mL/min,检测波长为210、242 nm,柱温为40℃,进样量为2μL。采用《中药指纹图谱相似度评价系统》(2012A版)建立10批茯苓水提物的指纹图谱并进行共有峰指认。以小鼠的入睡率、入睡潜伏期和睡眠持续时间为单一药效指标,考察戊巴比妥钠协同作用下10批不同产地茯苓水提物的镇静催眠作用;将单一药效指标和总药效(由单一指标经层次分析法计算而得)进行数据转化后,采用灰色关联度分析法分析茯苓水提物指纹图谱中各共有峰与单一药效及总药效的关联度。结果:10批茯苓水提物共有24个共有峰,指认出11个成分,分别为16-羟基松苓新酸(6号峰)、16α-hydroxytrametendic acid(7号峰)、茯苓酸B(9号峰)、去氢土莫酸(10号峰)、茯苓酸A(12号峰)、猪苓酸C(15号峰)、3-O-乙酰基-16α-羟基松苓新酸(17号峰)、去氢茯苓酸(20号峰)、茯苓酸(21号峰)、松苓新酸(22号峰)、脱氢齿孔酸(24号峰)。经灰色关联度分析发现,24个峰与睡眠持续时间的关联度均大于0.6(0.6115~0.8118),与入睡潜伏期的关联度除14、24、2号峰外,其余均大于0.6(0.6059~0.7904);与入睡率的关联度除23、19、17、5号峰外,其余均大于0.6(0.6064~0.7216);与总药效的关联度除2、5、19号峰外,其余均大于0.6(0.6190~0.7812);与总药效关联度排名前10位的色谱峰分别为15号峰(猪苓酸C)、16号峰、8号峰、11号峰、12号峰(茯苓酸A)、1号峰、7号峰(16α-hydroxytrametendic acid)、3号峰、9号峰(茯苓酸B)、20号峰(去氢茯苓酸)。结论:本研究建立了茯苓水提物的UPLC指纹图谱,指认了11个共有峰成分;猪苓酸C等10种成分与镇静催眠总药效关联较大,初步揭示了茯苓镇静催眠作用的药效物质基础。

复方鳄鱼油烧伤膏对浅Ⅱ度烧伤皮肤的修复及抗炎镇痛作用

目的:研究复方鳄鱼油烧伤膏对浅Ⅱ度烧伤皮肤的修复及抗炎镇痛作用。方法:将加热后的砝码紧贴豚鼠右侧脱毛部位皮肤4 s,复制浅Ⅱ度烧伤模型。造模成功后,将豚鼠按体质量随机分为模型组、京万红软膏组(阳性对照)和复方鳄鱼油烧伤膏配方一、配方二、配方三组(鳄鱼油质量分数分别为1.5%、3%、4.5%,下同),每组8只。除模型组外,其余各组豚鼠每天按0.7 g/只涂抹给药2次,连续14 d。每天记录豚鼠创面愈合情况,并计算创面愈合率;采用苏木精-伊红(HE)染色法观察豚鼠创面组织病理学变化;采用酶联免疫吸附试验法测定豚鼠血清中表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)的水平。将80只昆明小鼠分为2组,每组再按体质量随机分为模型组、京万红软膏组(阳性对照)和复方鳄鱼油烧伤膏配方一组、配方三组,每组10只,分别采用二甲苯耳廓肿胀法和醋酸扭体法以考察复方鳄鱼油烧伤膏的抗炎镇痛作用。结果:在烧伤修复实验中,复方鳄鱼油烧伤膏干预后,豚鼠的创面面积逐渐缩小,且第14天时其创面已极大幅度愈合,创面愈合率显著升高(P<0.01);血清中EGF、SOD水平均显著升高(P<0.01),VEGF、MDA、TNF-α、IL-1水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);创面组织可见较厚的新生表皮层,真皮层中结缔组织和新生血管均明显增多。在抗炎镇痛实验中,复方鳄鱼油烧伤膏干预后,小鼠的耳肿胀度与扭体次数均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:复方鳄鱼油烧伤膏可修复豚鼠浅Ⅱ度烧伤皮肤,且对小鼠的抗炎镇痛作用良好;其作用机制可能与升高血清中EGF、SOD水平,降低VEGF、MDA、TNF-α、IL-1水平有关。

不同产地茯苓中总蛋白的含量差异比较

目的:比较不同产地茯苓中总蛋白的含量差异。方法:以牛血清白蛋白为对照,0.4 mol/L氢氧化钠溶液为提取溶剂,考马斯亮蓝G-250为显色剂,采用紫外分光光度法于595 nm波长处测定茯苓中总蛋白含量,并通过聚类分析对34批(S1~S34)不同产地的茯苓进行分类。结果:牛血清白蛋白检测质量浓度的线性范围为1.45~17.40μg/mL(r=0.999 6);精密度、稳定性(20 min)、重复性试验的RSD均小于3%;加样回收率为100.14%~104.26%(RSD=1.43%,n=9);34批不同产地茯苓中总蛋白的含量为0.388 4%~1.129 7%。聚类分析结果显示,34批茯苓中,湖北省英山县产茯苓(S2、S3)的总蛋白含量>1%,归为一类;湖北、云南、安徽和湖南产茯苓(S1、S5~S10、S12、S13、S16、S17、S19~S21、S23~S25、S28、S30、S31)的总蛋白含量为0.653 5%~0.946 1%归为一类;剩余批次含量为0.388 4%~0.601 2%,归为一类。结论:所建方法可用于获苓中总蛋白的含量测定。34批不同产地茯苓总蛋白含量以湖北省英山县产茯苓最高,云南、安徽等地次之。

竹盐对便秘小鼠的影响及其机制研究

研究竹盐对盐酸洛哌丁胺诱导的慢传输型便秘(STC)小鼠模型的缓解作用和机制。对小鼠连续7 d灌胃盐酸洛哌丁胺(10 mg/kg)造便秘模型,第8天开始,灌胃盐酸洛哌丁胺1 h后,再灌胃低中高剂量(0.5,1.0和1.5 g/kg)竹盐,2.5mg/kg枸橼酸莫沙必利和生理盐水。第14天灌胃结束后统计6 h排便粒数,测量小肠计算肠推进率。采用苏木精-伊红染色法观察结肠病理学变化。采用试剂盒测定血清中胃泌素(Gas)、P物质(SP)和一氧化氮(NO)含量。采用蛋白质印迹法测定结肠中c-kit原癌基因(c-kit)、血管活性肠肽(VIP)、蛋白激酶A (PKA)、水通道蛋白3 (AQP3)蛋白的表达,采用实时荧光定量法测定结肠组织中干细胞因子(SCF)和环磷酸腺苷(cAMP)的mRNA的相对表达。结果显示:与模型组相比,竹盐中高剂量组和枸橼酸莫沙必利组中STC小鼠结肠组织肌层逐渐变厚,杯状细胞增多,缓解了便秘导致的黏膜损伤;与模型组相比,中高剂量竹盐和枸橼酸干预后明显增加了STC小鼠肠推进率和血清中Gas和SP含量,减少了NO含量,促进了结肠组织中c-kit、VIP、PKA、AQP3蛋白表达水平和SCF、cAMP的mRNA的相对表达,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。竹盐对盐酸洛哌丁胺诱导的STC小鼠具有通便作用,可能通过调节SCF/c-kit和VIP/cAMP/PKA/AQP3信号通路达到缓解便秘效果,该研究为开发相关功能性食品提供理论基础和科学依据。

基于神经递质和炎症因子探讨茯苓对脂多糖诱导的小鼠急性抑郁样行为的改善作用

目的:探讨茯苓水提物(WCD)及水溶性多糖(WCWP)、三萜(WCT)、水不溶性多糖(WCIP)对脂多糖(LPS)诱导的急性抑郁模型小鼠的影响。方法:ICR小鼠随机分为空白对照组,模型组,氟西汀阳性药组(FXT,20 mg/kg),WCD、WCT、WCWP及WCIP低、高剂量组(100、400 mg/kg)。连续给药14 d后,腹腔注射LPS建立急性抑郁小鼠模型。以自由活动实验、强迫游泳实验和悬尾实验评价抗抑郁作用;以脑源性神经营养因子(BDNF),神经递质5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE),炎症细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及NLRP3通路中凋亡相关微粒蛋白(ASC)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、IL-18、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)mRNA表达水平,探讨可能的作用机制。结果:茯苓水提物及不同部位均能显著提高抑郁小鼠的活动总距离(除WCT-H组)(P<0.01),显著减少悬尾和游泳不动时间(P<0.01),除WCT组外均呈现量效关系;均能不同程度升高海马中5-HT、DA、NE、BDNF水平,降低血清中IL-1β(除WCT-H组)、IL-6、TNF-α水平。WCD低、高剂量组均能显著降低ASC、caspase-1、IL-18、NLRP3 mRNA的表达(P<0.01);WCT低、高剂量组均能显著降低ASC、caspase-1 mRNA的表达(P<0.01);WCWP低、高剂量组均能显著降低ASC、caspase-1、IL-18 mRNA的表达(P<0.01),WCWP高剂量组能显著降低NLRP3 mRNA的表达(P<0.01);WCIP低、高剂量组均能显著降低ASC、caspase-1、NLRP3mRNA的表达(P<0.01,P<0.05),WCIP高剂量组能显著降低IL-18 mRNA的表达(P<0.05)。结论:通过预防给药,茯苓能显著改善LPS诱导的小鼠急性抑郁样行为,其作用机制可能与调控神经递质及炎症水平有关,但茯苓不同部位的预防作用存在差异,以期为茯苓临床用药及相关药材开发利用提供科学依据。

TOPC通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路,抑制miR-210,Atg7诱导H1975细胞凋亡

TOPC [2-(2,5,5,8a-四甲基-3,4,4a,5,6,7,8,8a-八氢萘-1-基)乙基哌嗪-1-碳二硫酸酯]是我们团队合成的一种结肠酸-二硫氨基甲酸酯衍生物。该化合物对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549和H1975的体外增殖抑制作用优于结肠酸。本研究的主要目的是探讨TOPC对H1975细胞可能的分子机制。MTT法检测细胞增殖, Hoechst 33342染色和Western blotting方法检测TOPC诱导的细胞凋亡,Westernblotting检测自噬蛋白表达及相关PI3K/AKT/mTOR信号通路,qRT-PCR检测miR-210mimic、inhibitor、inhibitorNC的转染率以及miR-210和Atg7的表达。结果表明,TOPC显著抑制A549和H1975细胞增殖。Hoechst33342染色和Westernblotting分析显示TOPC诱导H1975细胞凋亡。Westernblotting检测显示,TOPC诱导H1975细胞发生自噬,同时自噬相关蛋白Beclin-1、Atg5、Atg7、Atg12和LC3-II表达上调。此外, qRT-PCR结果显示TOPC显著下调了H1975细胞中miR-210的表达。进一步研究表明,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路和抑制miR-210功能在Atg7介导的topc诱导的自噬中起作用。结果表明TOPC能显著抑制A549和H1975细胞的生长,是一种很有前途的非小细胞肺癌治疗药物,值得进一步开发。

菝葜抗炎有效部位群及其单体成分体外抗氧化活性研究

目的考察菝葜抗炎有效部位群及其单体的抗氧化作用,探讨菝葜抗炎作用的可能机制。方法采用DPPH自由基、羟自由基反应体系、FRAP法分别测定菝葜有效部位群及落新妇苷、花旗松素、槲皮素、芦丁、白藜芦醇、黄杞苷等6个单体成分的自由基清除能力和铁离子还原能力;建立H202诱导大鼠红细胞膜损伤模型,孵育后检测药物对红细胞溶血抑制率和红细胞悬液中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响。结果菝葜有效部位群及其6个单体成分均表现出抗氧化能力。在DPPH实验中,菝葜有效部位群和花旗松素的清除作用明显强于其他药物,IC_(50)分别为13.05 mg/L、11.83 mg/L,略弱于维生素C(Vit C)(IC_(50)为6.93 mg/L);在羟自由基清除率的测定中,菝葜有效部位群及其6个单体均表现出一定的清除作用,但弱于Vit C;在FRAP法中,槲皮素还原Fe^(3+)的能力最强(FRAP值(183.78±8.01)mmol/g),优于Vit C(FRAP值(85.69±4.98)mmol/g),其次为花旗松素(FRAP值(56.73±6.25)mmol/g);在H202诱导大鼠红细胞膜损伤实验中,与模型组比较,菝葜有效部位群、花旗松素、槲皮素及白藜芦醇对红细胞的溶血抑制率明显升高、红细胞悬液中MDA含量显著降低(P<0.01)、SOD及GSH-Px活性显著升高(P<0.01)。结论菝葜抗炎有效部位群及其6个单体均具有体外抗氧化作用,并对红细胞膜具有保护作用,推测菝葜抗炎效应与其抗氧化特性有关。

基于肠道菌群和代谢组学探讨茯苓水提物健脾的作用机制

目的:联合16S rDNA技术与粪便代谢组学探究茯苓水提物健脾的作用机制,并找寻相关肠道菌群、代谢产物及通路的关联性。方法:采用"饮食不节+负重游泳"建立脾虚模型,造模时间为28d,造模成功后,将模型大鼠分为3组:模型(Model)组、阳性药(BZYQP)组以及茯苓水提物(PCD)组,给药14d。给药结束后,应用16S rDNA扩增子测序和非靶向代谢组学技术对各组大鼠肠道菌群和代谢组进行分析,同时采用Spearman系数法构建差异菌群、代谢产物及通路的互作体系。结果:茯苓水提物可改善脾虚模型大鼠菌群多样性的失调,在属水平上主要对不明梭菌(unidentifiedClostridiales)、杜波西菌(Dubosiella)、Silvanigrella、拟杆菌(Bacteroides)有回调作用。鉴定出11个与治疗作用相关的代谢产物,涉及到的关键代谢途径主要富集于烟酸和烟酰胺代谢,精氨酸和脯氨酸代谢;同时发现肠道差异菌属与潜在生物标志物有密切的关联性。结论:茯苓水提物可通过干预相关肠道菌群与调节相关通路来起到健脾作用,16S rDNA技术与代谢组学的联合分析可应用于对此类疾病的病理机制评价。

毛大丁草中一对新的香豆素类对映异构体

采用硅胶柱色谱、MCI柱色谱、半制备高效液相色谱等技术从毛大丁草(Gerbera piloselloides)全草95%乙醇提取物中分离纯化得到10个化合物。根据其理化性质、波谱数据(UV、IR、MS、NMR)、圆二色谱(CD)和单晶X射线衍射等技术鉴定化合物结构,分别为3′R-毛大丁香豆素A(1a)、3′S-毛大丁香豆素A(1b)、gymnastone(2)、大丁苷(3)、divaricataester C(4)、木犀草素(5)、咖啡酸甲酯(6)、绿原酸乙酯(7)、6-(β-D-glucopyranosyloxy)-7-methoxy-5-benzoranpropanoic acid methyl ester(8)和glucozaluzanin C(9)。其中化合物1a和1b为新化合物且为光学对映异构体,通过手性拆分得到,并经量子化学计算ECD确定了其绝对构型。化合物1和1a/1b能显著提高LPS损伤后的大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6的存活率。

白蔹醇提物不同极性部位的体外抗氧化活性研究

目的研究白蔹醇提物不同极性部位的抗氧化活性,并探究其抗氧化能力与总多酚含量之间的关系。方法采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基法和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)法分别测定白蔹醇提物不同极性部位的自由基清除能力和铁离子还原力,并测定了各部位总多酚的含量。结果各部位均有一定的抗氧化活性,其中,乙酸乙酯与正丁醇部位清除DPPH·、ABTS+及还原Fe3+的能力均强于石油醚部位及水部位;乙酸乙酯部位的多酚含量最高。结论白蔹提取物清除自由基的能力与提取物的浓度在一定范围内具有良好的量效关系,其中,多酚含量较高的的乙酸乙酯部位和正丁醇部位的抗氧化活性及还原能力相对较强,提示多酚类成分可能为白蔹抗氧化的主要活性成分。

加味小柴胡汤抗菌抗炎物质部位的体内过程有效成分研究

目的通过加味小柴胡汤抗菌抗炎有效物质部位的体内过程有效成分研究,进一步诠释该中药复方的药效物质基础。方法将前期研究确定的加味小柴胡汤抗菌、抗炎的两个主要有效物质部位,即酚酸物质部位和苷类物质部位,分别灌胃给药大鼠,不同时间段取血,制备含药血清供试品。采用LC-MS现代分析方法,分离和鉴定各有效物质部位的入血成分,获得血清中移行成分的信息。结果从酚酸物质部位给药血清中分离鉴定了8种化合物,其中4种为原型成分,其它4种为代谢产物;从苷类物质部位给药血清中分离鉴定了12种化合物,其中6种为原型成分,其它6种为代谢产物。结论文献报道表明,从酚酸物质部位和苷类物质部位的给药血清中所鉴定的化合物均具有抗菌抗炎作用,从而进一步诠释了加味小柴胡汤的药效物质基础。

黄芪总皂苷的分离纯化工艺研究

目的研究黄芪总皂苷的分离纯化工艺。方法采用D101大孔吸附树脂对黄芪总皂苷进行分离纯化,考察样品质量浓度、上样体积流量、上样量、洗脱剂体积分数、洗脱剂用量等条件,得到最佳工艺。结果黄芪总皂苷纯化最佳工艺:质量浓度为0.1 g/mL的药液,上样体积为3 BV,以1.5 BV/h的体积流量过柱重复两次,吸附完全后,先用5BV蒸馏水冲洗弃去水洗液再用15%的乙醇以2BV/h的体积流量洗脱至无色,弃去洗脱液再用5 BV60%乙醇以相同的体积流量进行洗脱,收集洗脱液,浓缩干燥得总皂苷,该工艺三批验证总皂苷含量均达到50%以上。结论该工艺参数准确、可靠,简单可行,能满足大生产的需求。