湖北麦冬及其近缘种的ISSR多样性研究

目的:对形态上难以区分的湖北麦冬及其近缘植物,利用ISSR分子标记技术进行多样性研究,并探索其亲缘关系。方法:设计5因素4水平正交实验,进行PCR反应体系的优化;从ISSR引物序列表中随机选取80个引物,对所有样品进行PCR扩增,筛选实验有效引物;用优选的条件对样品进行ISSR分子标记,计算样品间的相似系数,构建聚类分析树系图。结果:建立了麦冬类植物优化的PCR扩增程序,筛选出了9个有效引物,得到了各样品的ISSR电泳谱和系统发育树系图,谱和图清楚反映出了各品种之间的区别及其亲缘关系。结论:本文建立的IS-SR分子标记技术可用于湖北麦冬及其近缘种的多样性及亲缘关系研究。

利胆排毒口服液抗致命性内毒素血症的理论探索和实验研究

目的:探索中医药治疗致命性内毒素血症新的思路和方法。方法:根据内毒素在体内代谢的途径,用利胆、排毒和增强免疫功能的中药清除血液和肠道内毒素,用清热活血药抗炎治疗微循环障碍,据此组方制备利胆排毒口服液,从整体上治疗内毒素血症。结果:初步实验结果表明,利胆排毒口服液对醋酸铅致敏的致命性内毒素血症模型小鼠的保护率为100%,对氨基半乳糖致敏的致命性内毒素血症模型小鼠的保护率为50%～80%,而病理对照组模型小鼠的死亡率均为100%。结论:利胆排毒口服液能有效地预防性治疗内毒素血症,该组方的思路对致命性内毒素血症具有有效性,但该组方尚待深入进行基础研究。

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究

为探讨白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.)种子生活力的适宜测定方法,采用四唑(2,3,5-氯化三苯基四氮唑;2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法,设置不同浸种时间、不同染色浓度、不同染色时间的正交试验设计,来研究白花前胡种子的生活力测定条件。结果TTC法测定白花前胡种子生活力的最佳条件为在30℃环境下,浸种10 h,采用浓度1 g/L的TTC溶液在35℃环境里染色16 h。此法可作为白花前胡种子生活力测定的标准方法。

艾叶黄酮类化合物的研究进展

艾叶为中国传统中药材,是药食两用植物资源。艾叶中除含有挥发油、三萜类、多糖等多种化学成分外,还含有丰富的黄酮类化合物。现代药理研究表明艾叶黄酮类化合物具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎、抑菌等多种药理活性。本文以艾叶黄酮类化合物的提取方法、纯化方法、结构和分类以及药理活性为主要内容开展综述,为艾叶黄酮类化合物的进一步研究和临床应用提供参考。

柴胡挥发油的研究进展

柴胡属于传统解表类中药,挥发油为其主要药效成分之一。柴胡挥发油具有解热、镇痛、抗炎、抗惊厥等药理作用,已被开发研制成多种制剂产品,并运用于临床。本文以柴胡挥发油的提取方法、定性定量分析、药理药效作用及相关制剂产品研制等为主要内容开展综述,为柴胡挥发油的进一步研究和开发提供参考。

艾叶总黄酮提取物体内外抗氧化活性研究

本文探究了艾叶总黄酮提取物(total flavonoids extract from folium of Artemisia argyi,TFEFAA)主要成分含量及其体内外抗氧化活性。本文采用高效液相色谱(HPLC)法同时检测TFEFAA中异泽兰黄素和棕矢车菊素的含量;以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和羟自由基三种自由基的清除率和总还原力为指标,考察TFEFAA的体外抗氧化活性;将秀丽隐杆线虫(线虫)同期化后分别培养在含有0、50、100μg/mL的TFEFAA的线虫生长培养基中,研究TFEFAA对线虫热应激和H 2O 2氧化应激的影响,同时检测线虫体内相关抗氧化酶活力和丙二醛(MDA)的含量。结果表明,异泽兰黄素和棕矢车菊素的含量分别为0.2%和0.06%;TFEFAA对DPPH自由基、ABTS+自由基和羟自由基均具有显著的清除作用(P<0.05),其半数清除浓度(IC 50)分别为96.51、67.73和279.38μg/mL,清除能力与TFEFAA均呈剂量-效应关系,同时还具有较强的总还原力;100μg/mL TFEFAA能极显著延长线虫在热应激和H 2O 2氧化应激条件下的存活时间(P<0.01),同时极显著提高线虫体内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力(P<0.01),并且显著降低线虫体内MDA含量(P<0.05)。TFEFAA在体内外均具有较好的抗氧化活性,其机制可能与提高体内抗氧化酶活性有关。因此,TFEFAA有望被开发成新型天然绿色食品抗氧化剂。

3种常用防腐剂对秀丽隐杆线虫毒性作用的研究

目的研究苯甲酸钠、山梨酸钾、尼泊金甲酯3种常用防腐剂在食品常规剂量下对秀丽线虫的毒性作用。方法分别用1 g/L山梨酸钾、1 g/L苯甲酸钠、0.25 g/L尼泊金甲酯处理秀丽线虫24、48、72 h,观察秀丽线虫身体弯曲频率、头部摆动频率、触碰反应及体长;同时观察各组线虫的后代数目和寿命。结果 3种防腐剂均能显著降低线虫的生殖能力(P<0.01)及线虫头部摆动频率(山梨酸钾作用24、48 h,P<0.01;尼泊金甲酯和苯甲酸钠作用24、48、72 h,P<0.01)。尼泊金甲酯能够显著降低线虫身体弯曲频率(作用48、72 h,P<0.05)。尼泊金甲酯作用72 h,苯甲酸钠作用48、72 h后,线虫触碰反应迟钝(P<0.05)。山梨酸钾作用24 h时线虫体长增加(P<0.05),作用72 h时线虫体长减少(P<0.05);尼泊金甲酯作用24、48 h时线虫体长增加(P<0.05),但其效果随作用时间的增加而减弱;苯甲酸钠作用72 h时明显抑制线虫的体长发育(P<0.05)。3种防腐剂的长期作用对线虫寿命无显著性影响。结论常规剂量的苯甲酸钠、山梨酸钾、尼泊金甲酯对秀丽线虫有一定的生殖毒性和神经毒性。

三七醇提物对秀丽隐杆线虫的降脂作用

目的研究三七醇提物降低秀丽隐杆线虫脂肪沉积的作用以及可能的分子机制。方法本研究采用秀丽隐杆线虫为模式生物,三七醇提物以不同剂量给药后,观察对线虫的寿命、生殖和抗逆性的影响;采用油红O染色法,观察了线虫体内脂肪沉积的变化;同时,检测了线虫体内的甘油三酯含量和脂肪代谢相关的基因acs-2、pod-2、fat-5的表达水平。结果与对照组比较:三七醇提物不同给药剂量组均能延长线虫的寿命,增强抗逆性,且高剂量组更为显著(P<0.01);对线虫生殖能力没有影响;油红O染色结果显示,三七醇提物可显著降低线虫肠道脂肪沉积(P<0.01);三七醇提物高剂量组还能显著降低甘油三酯的含量(P<0.05),并影响与脂肪代谢相关基因表达水平,其中acs-2 mRNA被上调,pod-2、fat-5mRNA被下调(P<0.05)。结论三七醇提物在不影响线虫生命特征的前提下,可减少线虫体内脂肪沉积,对甘油三酯水平及脂肪代谢相关的基因表达水平有调控作用。

基于指标成分和药效学优选利胆排毒方醇沉工艺

目的优选利胆排毒方醇沉工艺。方法以绿原酸、栀子苷、丹酚酸B含量和浸膏收率为指标,设计正交试验,对影响醇沉的因素如药液相对密度、表观醇沉浓度、醇沉时间、醇沉温度进行考察,用多指标综合评分法进行数据处理,初步优选醇沉条件;同时,基于体外抗内毒素作用和致死性内毒素血症小鼠模型保护作用,进一步开展工艺优选。结果利胆排毒方的最佳醇沉工艺为药液相对密度1.09,加入95%乙醇至表观醇沉浓度为70%,醇沉36 h,静置温度25℃。基于药效学观察,该醇沉工艺条件处理前后药效学表现一致。结论正交试验设计结合药效评价优化确定的醇沉工艺稳定可行,为利胆排毒方的制剂开发提供可靠依据。

不同粒径朱砂对秀丽隐杆线虫的毒性作用

目的研究不同粒径朱砂对秀丽隐杆线虫的毒性作用。方法采用微米级朱砂和纳米级朱砂,分别以1.0、5.0μg/cm2对L4期线虫进行48 h暴露处理,考察其对线虫运动行为(头部摆动和身体弯曲)、生长发育(体长)、生殖行为(后代数目)、细胞凋亡、活性氧自由基(ROS)水平、乙酰胆碱酶(AChE)活性和感知行为(趋向系数)的影响。结果与对照组比较,线虫暴露于不同剂量的微米级朱砂和纳米级朱砂后,高剂量组的运动行为、生殖能力、ROS水平和AChE活性均有改变(微米级朱砂,P<0.05;纳米级朱砂,P<0.01)。低剂量下仅纳米级朱砂组的运动行为有变化(P<0.01);同时,其生殖能力和ROS水平也有改变(P<0.05)。结论不同粒径朱砂对线虫的神经系统、生殖能力和体内自由基的代谢等产生不良影响,且与粒径和用药剂量有关。此结论可为制订朱砂的炮制工艺和用药剂量提供参考。

不同粒度三七醇提物对秀丽隐杆线虫毒性作用的研究

目的研究不同粒度三七醇提物对秀丽隐杆线虫(简称线虫)的毒性作用。方法粗粉、中粉和细粉3种不同粒度三七醇提物对线虫暴露48 h,显微镜下观察线虫生存率、运动行为、生长发育、生殖能力、细胞凋亡和活性氧自由基水平等指标。结果与对照组相比,3种不同粒度三七醇提物均会降低线虫的生存率(粗粉中剂量和高剂量组、中粉中剂量组,P<0.05;中粉高剂量组和细粉低、中、高剂量组,P<0.01),抑制线虫身体弯曲频率(中粉高剂量组,P<0.05;粗粉和细粉中、高剂量组,P<0.01)和头部摆动频率(中粉中剂量组,P<0.05;中粉高剂量组,P<0.01;粗粉和细粉中、高剂量组,P<0.01)。仅细粉高剂量组能增加线虫体长(P<0.05),其他组差异无统计学意义。各剂量组不同粒度三七醇提物均能降低线虫的生殖能力(中粉、细粉高剂量组,P<0.05),增加线虫细胞凋亡数量(粗粉和细粉中剂量组,P<0.05;粗粉、中粉和细粉高剂量组,P<0.01)。细粉高剂量组能提高ROS水平(P<0.05)。结论 3种不同粒度的三七醇提物均对线虫有一定的神经毒性、生殖毒性和细胞毒性,其中细粉更为明显。因此制剂生产中需控制三七粒度。