转基因水稻纯系对褐飞虱的抗性研究(英文)

利用基因枪法将含潮霉素抗性基因、GUS报告基因和雪花莲凝集素基因的 2个质粒 pWRG15 15和pRSSGNA1共同转化粳稻品种鄂宜 10 5的成熟胚诱导的愈伤组织 .从轰击的 15 2块愈伤组织中共再生出 2 6株独立转基因植株 .PCR/Southern印迹法分析发现 ,73%的转基因植株含有所有 3个外源基因 .遗传分析证实外源基因在转基因植株后代中以孟德尔方式遗传 .从其R1代亲本为孟德尔 3∶1方式遗传的R2代中 ,鉴定出 3个表达所有 3个外源基因的独立转基因植株纯系 .抗虫鉴定结果发现这些纯系对褐飞虱具有明显的抑制作用 .

转石蒜凝集素基因烟草的抗蚜虫性

利用农杆菌介导法将质粒pBILRA转化烟草(NicotianatabacumL．)，该质粒含有由花椰菜花叶病毒35S启动子(CaMV35S)引导的筛选基因新霉素磷酸转移酶基因(nptll)及石蒜凝集素基因(lra)。通过卡那霉素筛选获得了25株独立转基因烟草植株。Westernblot分析表明，石蒜凝集素蛋白在不同转基因植株中表达量不同。对转基因T1代植株的遗传分析表明，lra基因在大多数独立转基因植株后代中以孟德尔3：1的分离比方式遗传。抗虫试验表明，表达较高水平石蒜凝集素蛋白的转基因烟草对桃蚜种群的生长具有明显的抑制作用。首次报道了表达石蒜凝集素基因的烟草对蚜虫具有抗性。石蒜凝集素基因可用于植物抗虫基因工程研究及应用。

通过遗传转化获得含多基因的水稻转基因纯合植株(英文)

利用基因枪法将含有４个不同基因的３个质粒共转化由粳稻品种鄂宜１０５号和鄂晚５号种子胚 诱导的愈伤组织（５～１０ ｄ龄）． 从轰击的９８６块愈伤组织中共再生出１６９株独立的转基因水 稻植株（转化率为１７％）． ＰＣＲ／Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析显示７０％以上的转基因植株含有 所有４个基因． ＧＵＳ组织化学分析、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ和／或ＲＴ－ＰＣＲ分析表明所有４个基因的共表 达率为７０％． 未观察到任何质粒在整合中存在优势，转基因拷贝数也与基因表达量无关． 遗传分析证实外源基因在后代植株中大多以孟德尔方式遗传． 从其Ｒ１代为３∶１孟德尔方式遗传 的后代Ｒ２代植株中，鉴定出含有３个或４个不同基因的转基因纯合植株系． ＰＣＲ／Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏ ｔ分析证实了这些转基因纯合植株系． 这些系的植株具有相似的外源基因表达量． 我们证实 通过基因枪介导的共转化，结合常规育种方法筛选可以获得含多基因的转基因水稻纯合植株 ． 这项技术为利用基因工程同时改良作物多个性状提供了一种途径．

褐飞虱喂养试验显示表达GNA的转基因水稻纯系抗褐飞虱(英文)

利用基因枪法将含有３个不同基因（ｈｐｔ，ｇｕｓ和ｇｎａ）的质粒ｐＷＲＧ１５１５和ｐＲＳＳＧＮＡ１共同转化粳稻品种鄂晚５号成熟胚诱导的愈伤组织．共再生出３５株独立转基因植株．ＰＣＲ／Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法分析发现，８３ ％的转基因植株含有所有３个外源基因．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法分析发现 ７９％的含 ｇｎａ基因的转基因植株以不同水平表达ＧＮＡ。遗传分析证实外源基因在转基因植株后代中以孟德尔方式遗传．从其Ｒ１代亲本为孟德尔３：１方式遗传的Ｒ２代中，鉴定出２个含有所有３个外源基因的独立转基因植株纯系．这些纯系具有相似的外源基因表达量．褐飞虱喂养试验表明，这些纯系对褐飞虱具有显著的抑制作用．这些揭飞虱抗性提高的转基因纯系将应用于水稻抗虫育种中．实验证明，通过遗传转化和筛选可获得含在农业上有应用价值基因的转基因水稻纯系．

生物鉴定和喂养试验证明GNA赋予转基因水稻纯系对褐飞虱的抗性(英文)

参照Rao等 (1998)的褐飞虱生物鉴定和喂养方法 ,用水稻褐飞虱生物Ⅰ型的一龄若虫食喂 ,用基因枪法获得 2个转基因水稻纯系 .这 2个纯系均含有并表达潮霉素抗性基因 (hpt)、gusA报告基因和雪花莲凝集素基因 (gna) .褐飞虱生物鉴定和喂养试验表明 ,水稻纯系对褐飞虱具有显著的抑制作用 .具体表现为降低褐飞虱成活率和繁殖力、延缓褐飞虱发育以及减少褐飞虱进食量 .通过褐飞虱生物鉴定和喂养试验证明 ,表达GNA的转基因水稻纯系对严重危害水稻生产的褐飞虱具有抗性作用 .