基于中国生物医学文献数据库的宫颈癌治疗相关文献可视化分析

目的:利用可视化方法分析我国宫颈癌治疗的研究现状和热点,为宫颈癌治疗提供参考依据。方法:应用计算机检索中国生物医学文献数据库(China biology medicine disc,CBMdisc)2001-01-01~2019-11-01以中文形式全文发表的宫颈癌治疗的相关文献,运用书目共现分析系统-2(bibliographic items co-occurrence matrix builder 2,BICOMS 2)对文献进行提取和整理,利用NetDraw和图形聚类工具包(graphical clustering toolkit,Gcluto)绘制网络关系图并进行聚类分析。结果:共检索宫颈癌治疗相关文献2141篇,最终纳入文献2089篇。发文量分析显示,2001~2019年发文量呈阶梯式上升,主要研究机构以医科类大学为主;2001~2019年累计发文量≥10篇的院所7家,其中≥15篇的院所3家,≥20篇的院所仅1家;载文量>40篇的期刊仅1本;参与相关文献撰写的作者共5648人,但发文量>5篇的作者不多,且未见跨省市院所之间的合作关系。对出现频次>8次的96个高频主题词进行社会网络分析显示,宫颈癌治疗研究主要围绕“宫颈癌”展开,新辅助化疗、放疗、化疗和手术治疗是目前宫颈癌治疗的研究热点,低频电刺激、腔内后装放疗、PD-1和PD-L1等也有广泛研究。对96个高频主题词进行聚类分析显示,目前宫颈癌治疗研究热点主要集中在7个主题,即:①尿潴留,特别是宫颈癌术后,易影响膀胱功能;②PD-1和PD-L1对宫颈癌细胞凋亡的影响;③晚期宫颈癌化疗药物的选择;④通过联合放化疗、辅助支持治疗,早中期宫颈癌的临床疗效和预后;⑤年轻宫颈癌患者应尽可能保留生育功能;⑥根治性手术治疗以及联合动静脉全身化疗是治疗巨快型宫颈癌的关键;⑦通过手术治疗、联合放化疗及综合护理干预宫颈癌的临床疗效和预后。结论:近年来开展宫颈癌治疗研究的单位众多,但跨院所之间的资源共享和学术交流仍不足,需加强各机构间合作,提高和扩大宫颈癌临床诊疗、免疫治疗及综合护理的研究质量和规模。

CaMK4对狼疮性肾炎患者外周血中γδT细胞功能的影响

目的:本文探讨钙/钙调素依赖性蛋白激酶(CaMK4)对LN患者外周血中γδT细胞功能的影响。方法:流式细胞术比较LN患者及健康对照组外周血中γδT细胞的比例,磁珠分选LN患者和健康对照组外周血中的γδT细胞,RNA-SEQ分析两组中γδT细胞的差异基因。Real-time PCR和Western blot验证差异基因CaMK4的表达水平,流式细胞术检测CaMK4抑制剂处理后γδT细胞表面CD80,CD86和CD40L的表达水平,ELISA检测CaMK4抑制剂处理后γδT细胞分泌IL-17的水平。结果:LN患者外周血中γδT细胞的比例低于健康对照组(P<0.05)。RNA-SEQ测序共筛选出28个与LN有关的差异基因,其中CaMK4在LN患者和健康对照者间差异显著。LN患者外周血中γδT细胞经过CaMK4阻断剂KN-93处理后,表面共刺激分子CD80、CD86和CD40L的表达下降、分泌的IL-17水平也下降(P<0.01)。结论:CaMK4通过调控γδT细胞分泌IL-17和共刺激分子表达参与LN发病,抑制CaMK4或可成为治疗LN的新靶点。

基于中国知网数据库的养心氏片知识图谱构建研究

目的 通过文献计量和可视化分析探究养心氏片的研究现状及热点。方法 以中国知网为数据源,检索建库至2021年12月31日期间收录的与养心氏片研究相关的文献,运用CiteSpace 5.5.R2软件对文献进行作者、机构和关键词分析并绘制可视化图谱。结果 共获得218篇相关文献,研究机构以青岛国风药业与医学院校(含附属医院)合作为主。冠心病、气虚血瘀证、专家共识、临床应用为排名靠前的关键词;氧化应激、心功能、专家共识等词突现强度持续至今;关键词聚类分析主要有焦虑抑郁、运动耐量、专家共识、Meta分析4个聚类。结论 养心氏片目前研究领域的热点以临床疗效评价为主,涉及疾病包括冠状动脉粥样硬化性心脏病、心力衰竭、焦虑抑郁等,养心氏片的药理研究及高质量临床研究可能是养心氏片下一步的重点研究方向。

焦虑和抑郁情绪对化疗前后乳腺癌患者细胞免疫功能的影响

目的评估综合性心理干预对化疗期乳腺癌患者焦虑和抑郁的作用,并探讨化疗前后焦虑和抑郁对乳腺癌患者细胞免疫功能的影响。方法采用自行设计好问卷、Herth希望量表、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)和汉密尔顿抑郁量表(HAMD)对81例已婚女性乳腺癌患者进行调查和测评,将符合纳入标准的64例抑郁、焦虑共病患者(HAMD评分大于或等于8且HAMA评分大于或等于7分)随机分为干预组和对照组。流式细胞术检测患者外周静脉血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及自然杀伤细胞(NK细胞)。结果化疗后,干预组比对照组Herth评分增加37.19%,HAMD评分减少36.01%,差异有统计学意义(P<0.01);化疗前与化疗后比较,干预组Herth评分增加了(12.57±4.57)分,HAMD和HAMA评分分别下降了(9.32±1.86)分和(4.35±1.15)分,且差异均有统计学意义(P<0.01)。与对照组比较,干预组化疗前后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞差值分别增加2.10±1.63、1.51±1.02、0.05±0.02和0.78±0.52,差异均有统计学意义(P<0.01),HAMD评分与CD4+/CD8+呈负相关(r=-0.554)。结论乳腺癌患者细胞免疫功能减退可能与焦虑合并抑郁程度相关,综合性心理干预模式可改善化疗期乳腺癌患者抑郁、焦虑情绪。

电针对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆和抗氧化能力的影响

目的 观察电针对β淀粉样蛋白25～35片段（Aβ25～35）所致阿尔茨海默病（Alzheimer＇s diseases,AD）模型大鼠学习记忆能力和脑组织自由基代谢的影响.方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为AD模型组、假手术组、正常对照组和电针组,每组12只,采用Aβ25～35建立AD模型,Morris水迷宫观察大鼠学习记忆能力,同时检测脑组织匀浆中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）等抗氧化指标的水平和乙酰胆脂酶（AcbE）、单胺氧化酶（MAO）、一氧化氮（NO）、过氧化氢酶（Cata-lase,CAT）、乳酸脱氢酶（LDH）的活性.结果 与AD模型组相比,电针组能缩短大鼠的逃避潜伏期（P＜0.01）,明显增加大鼠的平台跨越次数（P＜0.01）,延长大鼠在目标象限的停留时间并增高平台象限停留路程占总路程的百分比（P＜0.05）,同时,电针组能明显升高脑组织匀浆中SOD、CAT、GSH、GSH-Px的含量（P＜0.01）,降低MDA、AchE、MAO、LDH、NO的活性（P＜0.01）.且假手术组和正常对照组分别与AD模型组比较,除假手术组平均速度差异无统计学意义外,其余各指标差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 电针可改善AD模型大鼠的学习记忆能力,同时还能增强机体的抗氧化能力,对脑组织中自由基的代谢起到积极的作用.

1α,25-二羟维生素D_3对成骨细胞增殖分化和OPG mRNA/RANKL mRNA表达的影响

目的研究1α,25-二羟维生素D3[1α,25-(OH)2D3]对体外培育SD大鼠成骨细胞(OB)增殖、分化和细胞核因子κ配体(RANKL)及骨保素(OPG)mRNA表达的影响。方法采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24 h新生SD乳鼠颅盖骨分离得到的OB,经1 nmol/L、10 nmol/L、100 nmol/L的1α,25-(OH)2D3干预24 h、48 h和72 h后,MTT比色法检测OB增殖率;PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)活性;应用RT-PCR法检测细胞中OPG和RANKL的mRNA表达。结果 1 nmol/L组成骨细胞A值在干预24 h、48 h、72 h后,分别为(0.335±0.080)、(0.451±0.086)、(0.545±0.085);100 nmol/L组OB ALP活性分别增加至(6.274±1.561)U/g、(5.021±1.703)U/g、(6.854±1.468)U/g;OPG mRNA表达分别降低至(0.365±0.068)、(0.340±0.046)、(0.381±0.051);RANKL mRNA表达分别增加至(0.622±0.089)、(0.550±0.064)、(0.468±0.062);与0 nmol/L组比较,RANKL/OPG比值分别增加138.53%、153.45%、157.71%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论高浓度1α,25-(OH)2D3可抑制OB增值和OPG mRNA表达,促进其分化和矿化,上调RANKL/OPG的基因表达,从而促进破骨细胞介导的骨吸收,增强骨更新。

乳腺癌患者化疗前期抑郁焦虑的现况调查和心理+药物干预的疗效评价

目的调查乳腺癌患者化疗前期抑郁焦虑症状发生现况,评估综合心理干预护理联合帕罗西汀疗法对乳腺癌患者焦虑抑郁的临床疗效。方法采用自编问卷、Herth希望量表、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)对81例已婚女性乳腺癌患者进行调查和测评,将符合纳入标准的64例乳腺癌并抑郁焦虑患者(HAMD评分≥8分且HAMA评分≥7分)随机分为干预组(32例)和对照组(32例)。对照组给予常规护理,干预组在常规护理的基础上,在化疗期接受心理干预护理联合服用帕罗西汀,并对两组化疗前后抑郁焦虑的情况及其化疗效果进行对比分析。结果干预组化疗期Herth、HAMD和HAMA水平分别为(33.94±8.26)分、(15.78±5.24)分、(14.34±5.51)分,与对照组比较[(24.74±6.96)分、(24.66±5.23)分、(15.78±4.36)分],除HAMA外,差异均具有显著统计学意义(P<0.01);干预组化疗期Herth、HAMD和HAMA水平与化疗前比较[(21.37±6.51)分、(25.10±5.62)分、(17.69±4.93)分],差异均具有显著统计学意义(P<0.01)。干预组化疗期希望水平、抑郁和焦虑总有效率为96.87%、59.37%、46.88%,与对照组比较,除焦虑外,差异均具有统计学意义(P<0.01)。干预组完全缓解率、部分缓解率和总缓解率分别为18.75%,68.75%,87.5%,均高于对照组。

MxA基因启动子区-88G/T、-123C/A单核苷酸多态性与HCV易感性和IFN-α疗效评价研究

目的:研究黏病毒抗性蛋白(MxA)启动子区-88(G/T)、-123(C/A)位点单核苷酸多态性(SNP)与汉族人群丙型肝炎病毒(HCV)的易感关联性,同时探讨各基因型与PEG-IFNα-2α抗病毒疗效的相关性。方法:应用聚合酶链反应(PCR)及限制性片段长度多态性(RFLP)方法检测46例慢性丙型肝炎患者(CHC组)和50名健康者(HC组)的MxA基因启动子-88和-123位点基因型,以生化、病毒学应答率(RVR、EVR、ETVR、SVR)为疗效评价指标。结果:-88/-123位点各基因型及等位基因在CHC组与CH组中的分布频率差异无统计学意义(P>0.05),MxA-88位点等位基因T和-123位点等位基因A可能与HCV易感性无关(OR95%CI分别为0.60～1.96;0.35～1.14)。ALT水平随HCV-RNA载量的增加而升高,呈正相关(r=0.931)。HCV病毒载量和ALT水平分别在-88或-123位点不同基因型间比较,差异无显著性(P>0.05)。-88G/T、-123C/A和MxA-88/-123间的IFN-α治疗应答反应率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MxA-88G/T和-123C/A位点SNP与HCV易感性无明显关联性,但MxA-88T/-123A变异基因可能间接增加HCV感染的风险,且MxA-88T变异基因可能与IFN-α抗病毒疗效和HCV感染后结局有关。

1α，25-二羟维生素D3对体外培养的成骨细胞分化及矿化成熟影响

目的：探讨1α，25-二羟维生素D3（1α，25-（OH）2D3）对体外培育SD大鼠成骨细胞（OB）增殖、分化和成熟矿化的影响。方法采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24h新生SD乳鼠颅盖骨分离得到的OB，设置0nmol/L、1nmol/L、10nmol/L、100nmol/L的1α，25-（OH）2D3为空白对照、低、中、高干预组，干预24h、48h和72h后分别采用噻唑蓝（MTT）比色法检测OB增殖率、PNPP法测定碱性磷酸酶（ALP）活性、放射免疫法检测骨钙素（OC）含量、RT-PCR检测BMP-2 mRNA表达；3d和6d后测定钙盐沉积量；10d和20d后茜素红染色法检测细胞钙化结节数。结果与空白组比较，在干预24h、48h、72h后低干预组成骨细胞A值分别增加20.50%、38.77%、18.22%，高干预组ALP分别增加（3.068±1.137）%、（0.505±0.156）%、（1.115±0.382）%，OC含量分别增加（0.285±0.097）%、（0.469±0.134）%、（0.734±0.225）%；高干预组成骨细胞钙沉积量在干预3d和6d后分别增加（0.968±0.236）%和（0.929±0.307）%，成骨细胞矿化结节在干预10 d和20d后，分别增加（13.889±3.973）%和（10.472±0.263）%，均呈正相关（P〈0.05）。结论在本实验浓度范围内，中、高剂量1α，25-（OH）2D3可促进体外成骨细胞分化和矿化，刺激成骨细胞分泌骨钙素，发挥着促进骨形成的作用。

免疫增强型肠内营养对胃肠道恶性肿瘤病人术后炎症反应的影响

目的观察免疫增强型肠内营养对胃肠道恶性肿瘤病人术后炎症反应的影响。方法将58例胃肠道恶性肿瘤术后病人随机分为免疫增强型肠内营养组（IEDs组）和常规肠内营养组（EN组）各29例，分别输注免疫增强型肠内营养制剂及常规肠内营养制剂。于术前1d和术后1、9d检测两组病人血清总蛋白（TP）、清蛋白（ALB）、前清蛋白（PA）、转铁蛋白（TRF）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白细胞介素6（IL-6）和c-反应蛋白（CRP）的水平；观察病人术后并发症发生情况、肛门排气恢复时间及住院时间。结果与术前1d比较，术后1dIEDs组病人CRP、IL-6、TNF-α分别增加了735．7％、38．8％、36．8％，差异有显著性（F=14．832～140．743，t=9．773～22．382，P〈0．05）；术后9d与术后1d比较，CRP、IL-6、TNF-α分别降低了54．1％、21．6％、20．3％，除IL-6恢复到术前1d水平外，CRP、TNF-α均显著高于术前1d水平（=2．226、18．056，P〈0．05）。IEDs组与EN组病人比较，TP、ALB、PA和TRF在术后9d分别升高了7．37％、11．24％、10．01％、17．58％，CRP、IL-6、TNF-α分别降低了37．14％、17．79％、15．90％；同时术后并发症发生率及住院时间显著下降（x2=3．835，t=2．153，P〈0．05）。结论免疫增强型肠内营养可降低胃肠道恶性肿瘤病人术后炎症反应，提高病人术后生存质量。

硒拮抗氟致大鼠肝细胞氧化应激和DNA损伤作用

目的探讨硒对氟诱导的原代大鼠肝细胞氧化应激和DNA损伤的拮抗作用。方法采用改良原位2步非循环灌流法及多次过滤低速离心法分离原代大鼠肝细胞,实验设空白对照组、氟染毒组(氟化钠250、500、1 000、2 000μmol/L,染毒24 h)和硒干预组(亚硒酸钠10或100 nmol/L,干预4 h);测定细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,采用单细胞凝胶电泳技术和微核实验检测DNA损伤情况。结果与空白对照组比较,2 000μmol/L氟染毒组ROS(16.75±8.32)和MDA[(11.54±3.83)nmol/mg·prot]含量明显增加,SOD[(19.53±5.28)NU/mg·prot]和GSH[(21.73±15.32)μg/mg·prot]明显下降,彗星率[(46.25±10.60)%]、彗星尾长[(31.74±9.25)μm]、尾矩[(15.57±7.92)]和微核率[(42.80±24.61)‰]明显增加(均P<0.01);与等剂量氟染毒组比较,10 nmol/L硒干预组ROS(12.36±5.15)和MDA[(7.33±4.01)nmol/mg·prot]含量明显下降,SOD[(23.72±7.15)NU/mg·prot]与GSH[(26.36±14.24)μg/mg·prot]明显增加,彗星率[(39.27±15.0)%]、彗星尾长[(24.06±8.77)μm]、尾矩[(9.64±4.80)]和微核率[(31.28±12.65)‰]分别降低(P<0.05)。结论适量的硒可拮抗氟对原代大鼠肝细胞的氧化应激和DNA损伤作用。

电针对Aβ25-35致阿尔茨海默病模型大鼠cAMP/PKA/CREB信号转导通路的影响

目的探讨电针对Aβ25-35导致的阿尔茨海默病模型大鼠应用电针刺激后cAMP/PKA/CREB信号转导通路的变化。方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为AD模型组、电针组、假手术组和正常对照组各12只。模型组与电针组采用Aβ25-35建立AD模型后电针组给予电针刺激,模型组未给予电针刺激;假手术组双侧海马注射等量生理盐水;正常对照组不做任何处理。4组均采用Morris水迷宫实验检测大鼠记忆与空间探索能力,采用分光光度计法检测脑组织超氧化物歧化酶与丙二醛水平,采用放射免疫法检测海马cAMP水平,采用免疫组织化学法检测海马5-羟色胺1A受体、蛋白激酶A与p-CREB蛋白表达水平,采用Western blot检测海马总Tau蛋白表达水平及Tau蛋白Ser396位点磷酸化情况。结果与模型组比较,电针组、假手术组与对照组逃避潜伏期缩短、跨越平台次数增多、目标象限停留时间延长(P<0.05),脑组织中超氧化物歧化酶、5-羟色胺1A受体、蛋白激酶A及p-CREB水平增高(P<0.05),丙二醛、总Tau蛋白、pTau-Ser396、c-fos蛋白水平降低(P<0.05);电针组总Tau蛋白、c-fos及PKA水平高于假手术组(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针可明显提高阿尔茨海默病大鼠学习记忆功能和空间探索能力,可能是通过拮抗cAMP/PKA/CREB信号转导通路相关蛋白的异常改变起作用。

免疫增强型肠内营养对胃肠癌根治术后患者免疫功能的影响

目的评价术后免疫增强型肠内营养对胃肠癌根治患者术后免疫功能的影响。方法将58例胃肠癌根治患者随机分为免疫增强型肠内营养组（IEDs组）和常规肠内营养组（EN组）各29例，IEDs组使用含谷氨酰胺、精氨酸、ω－3多不饱和脂肪酸的免疫增强型肠内营养制剂，EN组使用常规的制剂能全力。分别检测术前1d、术后l，9d2组患者的免疫指标：T淋巴细胞亚群（CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋）、自然杀伤（NK）细胞和免疫球蛋白（IgA、IgM、IgG）。结果2组患者均无严重并发症，术后恢复顺利。术前、术后1d2组各项免疫指标比较差异有统计学意义。术后1d2组的各项免疫指标均降低，术后9d均回升。术后9d IEDs组CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋、NK细胞、IgA、IgG与IgM较术后1d均显著增加。术后9d IEDs组CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋、NK细胞、IgA、IgM较EN组分别增加了6．57％、27．97％、26．47％、36．05％、22．75％、25．62％，差异有统计学意义。结论胃肠癌根治患者术后给予免疫增强型肠内营养在改善免疫功能方面优于常规的肠内营养。

1α,25-二羟维生素D_3对成骨细胞增殖分化、I型胶原及核心结合因子α-1基因表达的影响

目的研究1α,25-二羟维生素D3[1α,25-(OH)2D3]对体外培育SD大鼠成骨细胞(OB)增殖分化以及核心结合因子α-1(Cbfa-1)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA表达的影响。方法采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24 h内新生SD乳鼠颅盖骨分离得到OB,设置0、1、10、100 nmol/L 1α,25-(OH)2D3干预组,干预24、48、72 h后分别采用噻唑蓝比色法(MTT)检测OB增殖率,采用PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)活性,采用逆转录-聚合酶链反应法检测细胞Cbfa-1和ColⅠmRNA表达。结果在1α,25-(OH)2O3干预24、48 h和72 h后,与0 nmol/L组比较,1 nmol/L组吸光度(A值)均显著增加(P<0.05);1α,25-(OH)2D3干预细胞ALP活性、ColⅠ和Cbfa-1基因mRNA表达呈时间依赖性和剂量依赖性增高,且在24 h、48 h和72 h,100 nmol/L组与0 nmol/L组比较,以上指标差异均显著性增高(P<0.05)。结论低浓度1α,25-(OH)2D3可促进OB增殖和分化;高剂量对OB增殖无明显作用,但可促进OB分化,提高其ALP活性,增强ColⅠ及Cbfa-1基因mRNA表达而影响骨代谢。

1α,25-(OH)_2D_3对大鼠成骨细胞周期及相关蛋白表达的影响

目的研究1α,25-(OH)2D3对SD大鼠成骨细胞增殖及相关蛋白的表达的影响。方法采用流式细胞术(FCM)检测细胞周期,RT-PCR和Western blotting分别检测细胞G1期调节蛋白细胞周期素D1(cyclin D1)、细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)、p21 mRNA和蛋白的表达。结果与0 nmol·L-1组比较,各1α,25-(OH)2D3干预组细胞周期发生改变,G0/G1期细胞数递减,而S+G2/M期细胞比例升高,PI增加,差异显著(P<0.05);且1α,25-(OH)2D3可诱导细胞cyclin D1、CDK4 mRNA及蛋白表达和下调p21(P<0.05)。结论置1α,25-(OH)2D3可上调cyclin D1、CDK4表达和抑制负性调节因子p21,调节相关蛋白表达以促进成骨细胞增殖。

支气管哮喘小鼠肺组织miR-155的变化及对环氧合酶-2的影响

目的探讨支气管哮喘(哮喘)小鼠肺组织microRNA-155(miR-155)的变化及对环氧合酶-2(COX-2)的影响。方法雌性BALB/c小鼠28只,随机分为4组:正常对照组、哮喘模型组、antagomir阴性对照组、antagomir干预组,每组7只。应用鸡卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏和反复超声雾化吸入复制哮喘模型,观察各组小鼠的哮喘发作表现。通过HE染色观察肺部炎症浸润情况、酶联免疫吸附试验试剂盒测定外周血清中前列腺素E2(PGE2)的浓度、蛋白质印迹(Western-blotting)检测COX-2蛋白的表达,并通过逆转录PCR(RT-PCR)检测COX-2mRNA及miR-155-5p的表达。结果哮喘模型组小鼠miR-155-5p、COX-2及PGE2的表达均较正常对照组显著增加(t=-21.420、-15.270、-9.613,P值均<0.01);antagomir干预组miR-155、COX-2和PGE2较哮喘模型组显著降低(t=-15.273、-12.421、-6.025,P值均<0.01)。肺组织miR-155-5p的表达和COX-2的含量之间呈显著正相关(r=0.977,P<0.01)。结论哮喘小鼠肺组织中miR-155-5p表达增加,可能通过调控COX-2/PGE2途径参与哮喘发病过程。