生物化学设计性实验教学的探索与实践

以湖北医药学院2012级临床医学本科生为研究对象,在生物化学实验教学中开设"动物糖原的提取和鉴定"设计性实验课程,并对实验结果和教学效果进行评价。结果显示,87.5%的学生愿意接受设计性实验教学。设计性教学模式有利于学习主动性、合作性、研究性、创新性的培养和提高。因此,设计性实验是一种适合普通高等医学院校生物化学实验教学的模式,并可取得良好的教学效果。

牙周基础治疗对2型糖尿病相关性牙周炎患者血糖控制的Meta分析

目的系统评价牙周基础治疗对2型糖尿病相关性牙周炎患者血糖控制的影响,探讨牙周基础治疗在糖尿病治疗中的具体作用。方法计算机检索Cochrane图书馆对照试验注册中心、Medline、EMbase、SIGLE、GreyNet、NTIS、中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库、中国期刊全文数据库和万方数据库,查找有关牙周基础治疗对糖尿病血糖控制影响的研究。检索时限均为1991—2011年4月31日。均由2名评价者独立选择试验、提取资料和评估方法学质量,然后采用RevMan 5.1软件对资料进行Meta分析。纳入7个研究,共计471例受试患者。结果牙周基础治疗能明显降低2型糖尿病相关性牙周炎患者糖化血红蛋白的水平,组间差异有统计学意义(95%CI:-0.94～-0.22,P=0.001)。治疗组牙周袋探诊深度低于对照组,组间差异也有统计学意义(95%CI:-2.26～-0.69,P=0.000 2)。结论牙周基础治疗有利于2型糖尿病相关性牙周炎患者总体血糖水平的控制。

PDCD4在Hela细胞中过表达致抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调机制探讨

目的:探讨程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的抑癌机制。方法:以含有全长PDCD4的c DNA为模板,扩增PDCD4全长基因,融合PDCD4-GFP融合基因真核表达载体,将其转染Hela细胞,采用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白在细胞中的表达,以荧光定量PCR和Western-blot检测PDCD4在细胞内的表达以及抗凋亡基因Bcl-2的表达情况。结果:经酶切图谱分析、PCR扩增及DNA测序证实融合基因真核表达载体构建正确;荧光显微镜可观察到细胞内PDCD4-GFP融合蛋白的表达;RT-PCR证实经PDCD4基因转染的细胞内PDCD4 mRNA表达增高。PDCD4的过表达能够导致Bcl-2基因表达下调。结论:PDCD4基因表达于宫颈癌细胞核和胞浆内,并且PDCD4能够抑制Bcl-2基因的表达水平。

火棘多糖对小鼠各组织抗氧化作用的研究

目的探讨火棘多糖对小鼠肝、肾、脑和心各组织体内外的抗氧化作用。方法将昆明种小鼠分为正常对照组、模型组和火棘多糖高、中、低保护组。饲养8d后,正常对照组腹腔注射植物油溶液,其余各组腹腔注射0.15%CCl4植物油溶液。24h后眼球取血,分离血清,测定ALT和AST。用PBS制备肝、心、肾和脑匀浆;在组织匀浆中加入FeSO4和H2O2,诱导自由基的生成,测定各组织体内外的抗氧化作用。结果不同浓度的火棘多糖保护组均可降低血清ALT和AST的含量(P<0.01或P<0.05),降低各组织MDA的含量(P<0.01或P<0.05)。体外抗氧化实验能抑制脂质过氧化物的生成(P<0.01或P<0.05)。结论火棘多糖能降低CCl4肝损伤小鼠血清ALT和AST活性,对小鼠肝、肾、心和脑各组织体内外均有抗氧化作用,尤其对心、肾和肝组织的抗氧化作用较强。

聚乙二醇IFNα-2a联合利巴韦林治疗自身免疫抗体阳性慢性丙型肝炎的临床疗效及安全性评估

目的：探讨聚乙二醇IFN α-2a联合利巴韦林对自身免疫抗体阳性慢性丙型肝炎的临床疗效。方法慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染者102例，筛查自身抗体，分为自身抗体阳性组和阴性组，均给予IFN α-2a联合利巴韦林治疗。观察治疗前HCV RNA载量、治疗过程中血ALT和AST水平变化、病毒学应答情况及不良反应。结果102例慢性HCV感染者中，共检出自身抗体阳性患者31例，其中，抗线粒体抗体（ AMA）阳性18例，抗平滑肌抗体（ SMA）阳性10例，抗1型肝肾微粒抗体（ LKM1）阳性3例。治疗前，阳性组和阴性组 HCV RNA载量，以及治疗后快速和持续病毒学应答率比较差异无统计学意义。治疗0~20周，两组患者ALT和AST水平比较差异无统计学意义（P〉0．05），治疗24周后，阳性组高于阴性组。两组患者的不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论聚乙二醇IFN α-2a联合利巴韦林可有效治疗自身抗体阳性和阴性慢性丙型肝炎患者，自身抗体的存在与否对治疗安全性无明显影响。

姜黄素通过LXRα-ABCA1通路抑制小鼠巨噬细胞脂质聚集

目的：探讨姜黄素（curcumine,CUR）对氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）所致小鼠巨噬细胞泡沫化过程中脂质聚集的影响及其机制。方法：体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,分别采用oxLDL（50 mg/L）和Dil（Dioctadecyl）-ox-LDL（10 mg/L）处理细胞24 h,将细胞培养于含不同浓度CUR（0.1~50.0μmol/L）的培养基,MTT法筛选合适的实验浓度;荧光共聚焦显微镜观察Dil-ox-LDL处理后脂质聚集情况;酶学终点法定量细胞内总胆固醇和游离胆固醇的变化;蛋白免疫印迹法检测细胞LXRα和ABCA1的表达水平。结果：与泡沫化组相比,CUR治疗组脂质聚集显著下降;总胆固醇和游离胆固醇的含量均明显下调;另外CUR可以在蛋白水平上引起LXRα和ABCA1的高表达。结论：CUR具有抑制ox-LDL氧化小鼠巨噬细胞脂质聚集的作用,且该作用可能与其上调LXRα-ABCA1表达从而调节细胞内胆固醇的含量有关。

胃癌组织中Her-2蛋白的表达及意义

目的:观察Her-2基因在胃癌组织中的表达,探究Her-2与胃癌发生的关系。方法:采用组织芯片技术、免疫组织化学(IHC)技术及荧光原位杂交(FISH)技术检测60例患者胃癌组织中Her-2蛋白的表达情况,分析Her-2基因扩增与肿瘤的侵袭、转移及预后的相关性。结果:Her-2蛋白在不同分化程度的胃癌组织中的表达量不同,43例(71.67%)阳性表达Her-2蛋白,其中12例弱阳性(+)表达,17例中等阳性(++)表达,14例强阳性(+++)表达。运用FISH技术检测7例胃癌组织中的Her-2基因扩增情况,其中3例为IHC检测强阳性(+++)表达,3例为中-弱阳性(+～++)表达,1例阴性(-)。结论:Her-2蛋白在不同分化程度的胃癌组织中表达不同,虽然尚未证明其确切的相关性规律,但以此为出发点研究胃癌的发生发展及恶性进展具有重大的意义。