医学院校计算机组成原理课程教学的探讨

该文主要讨论《计算机组成原理》这门课程在医学院校中理论教学和实验教学的现状及改革思路,包括理论教学中教学内容、教学方法的创新,实验教学的改革和探讨,以学生为主体,培养动手能力和创新意识,对内容掌握起到促进作用。

分段扩增法克隆大鼠5-脂肪氧合酶cDNA并鉴定其序列

目的 5-脂肪氧合酶(5-LO)是炎性介质白三烯合成过程中的限速酶,本研究克隆大鼠5-LO cDNA编码区,旨在为利用大鼠5-LO分析白三烯在血管壁炎症中的作用做准备。方法从SD大鼠胚肝中提取mRNA并逆转录成cDNA,找出5-LO cDNA中独特的内切酶位点,再设计2对引物,扩出都含此酶切位点的5-LO cDNA片段。用高保真酶分段扩增出2个5-LO cDNA片段,再正确拼接,克隆成功后酶切鉴定并测序。将获取的cDNA序列与NCBI和Ensembl数据库比较序列的差异。结果用Oligo(dT)和随机引物从SD大鼠胚肝总mRNA中逆转录cDNA。以5-LO cDNA独特的PmlⅠ内切酶位点为分界点,扩增出5′端1339bp和3′端790bp的5-LO cDNA片段,将2个片段正确地拼接在pBluescriptⅡSK(+)中。经EcoRⅠ和XhoⅠ酶切和测序显示,重组质粒中包含有5-LO cDNA编码区全长2025bp,它与Ensembl数据库中的序列完全一致,但与NCBI数据库中的序列有较大的差异。结论用分段扩增法从SD大鼠胚肝中成功克隆出全长5-LO cDNA编码区,并证实了其序列的正确性。