间充质干细胞分泌的血管内皮生长因子对心肌细胞的保护作用

目的:探索间充质干细胞通过其分泌的血管内皮生长因子对H9C2细胞的保护作用及机制。方法:收集骨髓源间充质干细胞的条件培养基,分别处理培养,将其置于缺氧小室缺氧处理21 h,复氧处理6 h。阻断实验利用VEGFR阻断剂SU5416与间充质干细胞的条件培养基共处理。随后,利用流式细胞术ANNEXIN/PI双标法分析其凋亡变化。Western blotting分析H9C2细胞pAkt的表达。结果:RT-PCR结果显示间充质干细胞表达血管内皮生长因子,Western blotting结果显示间充质干细胞条件培养基增加了H9C2细胞pAkt的水平。AnnexinV/P1分析发现间充质干细胞条件培养基明显降低了H9C2细胞缺氧复氧的凋亡,且这种抗凋亡作用能被VEGFR阻断剂SU5416或PI3-K/Akt途径阻断剂LY294002所阻断。结论:间充质干细胞通过其分泌的血管内皮生长因子通过激活PI3-K/Akt途径保护H9C2细胞。