目的 研究环指蛋白Efp对人肝细胞株Bel7404增殖及侵袭力的作用机制。方法 采用siRNA技术沉默Efp在人肝细胞株Bel7404的表达,沉默后48 h采用蛋白印迹法检测细胞株中Efp、细胞周期蛋白CyclinE和细胞周期依赖性激酶CDK2的蛋白表达。采用MT...目的 研究环指蛋白Efp对人肝细胞株Bel7404增殖及侵袭力的作用机制。方法 采用siRNA技术沉默Efp在人肝细胞株Bel7404的表达,沉默后48 h采用蛋白印迹法检测细胞株中Efp、细胞周期蛋白CyclinE和细胞周期依赖性激酶CDK2的蛋白表达。采用MTT法检测细胞的增殖能力,采用Transwell检测细胞侵袭能力。结果 转染siRNA后,Bel7404细胞株中siRNA组中,Efp蛋白含量为0.32±0.05,明显低于对照组的1.00±0.00( P <0.05);而siRNA组的细胞增殖标志蛋白CyclinE的蛋白含量为0.47±0.04,明显低于对照组的1.00±0.00( P <0.05);同时siRNA组中CDK2的蛋白含量为0.27±0.12,明显低于对照组的1.00±0.00( P <0.05);MTT检测显示在Bel7404细胞株在沉默24 h、48 h和72 h室的细胞增殖率分别为0.087±0.010、0.107±0.013和0.120±0.010,各自明显低于对照组的0.112±0.012、 0.134 ±0.011和0.163±0.010( P <0.05);Transwell检测显示细胞株中siRNA组的细胞侵袭率为0.3384±0.0492,明显低于对照组的侵袭率0.7057±0.0836( P <0.05)。结论 环指蛋白Efp基因沉默可以通过抑制细胞周期蛋白CyclinE和CDK4进而改善人肝癌细胞株Bel7404的增殖及侵袭能力。展开更多
文摘目的 研究环指蛋白Efp对人肝细胞株Bel7404增殖及侵袭力的作用机制。方法 采用siRNA技术沉默Efp在人肝细胞株Bel7404的表达,沉默后48 h采用蛋白印迹法检测细胞株中Efp、细胞周期蛋白CyclinE和细胞周期依赖性激酶CDK2的蛋白表达。采用MTT法检测细胞的增殖能力,采用Transwell检测细胞侵袭能力。结果 转染siRNA后,Bel7404细胞株中siRNA组中,Efp蛋白含量为0.32±0.05,明显低于对照组的1.00±0.00( P <0.05);而siRNA组的细胞增殖标志蛋白CyclinE的蛋白含量为0.47±0.04,明显低于对照组的1.00±0.00( P <0.05);同时siRNA组中CDK2的蛋白含量为0.27±0.12,明显低于对照组的1.00±0.00( P <0.05);MTT检测显示在Bel7404细胞株在沉默24 h、48 h和72 h室的细胞增殖率分别为0.087±0.010、0.107±0.013和0.120±0.010,各自明显低于对照组的0.112±0.012、 0.134 ±0.011和0.163±0.010( P <0.05);Transwell检测显示细胞株中siRNA组的细胞侵袭率为0.3384±0.0492,明显低于对照组的侵袭率0.7057±0.0836( P <0.05)。结论 环指蛋白Efp基因沉默可以通过抑制细胞周期蛋白CyclinE和CDK4进而改善人肝癌细胞株Bel7404的增殖及侵袭能力。
