长链非编码RNA通过上皮-间质转化对射频消融术后肝癌复发的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)通过上皮-间质转化(EMT)对射频消融术后肝癌复发的影响。方法通过47℃水浴热诱导Huh-7细胞得到Huh-7h细胞,体外模拟不完全射频消融肝癌细胞。Western blot检测EMT分子标记;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;CCK-8实验检测细胞增殖能力;使用LncPath TM芯片筛选Huh-7与Huh-7h细胞差异表达的EMT相关LncRNA,并通过RT-PCR验证。结果Huh-7h细胞上皮表型标志物E-钙黏蛋白相对表达量低于Huh-7细胞,细胞间质表现标志物N-钙黏蛋白、波形蛋白相对表达量高于Huh-7细胞(P<0.05)。Transwell细胞迁移实验中Huh-7h穿膜细胞数高于Huh-7穿膜细胞数(P<0.05);细胞侵袭实验中Huh-7h穿膜细胞数高于Huh-7穿膜细胞数(P<0.05)。CCK-8实验显示,培养24 h、48 h、72 h时Huh-7h细胞吸光度值高于Huh-7细胞(P<0.05)。使用LncPath TM芯片最终筛选出与差异表达相关的2个下调LncRNA,分别为Fundc2p4(ENST00000552318)、Rpl27p7(ENST00000552432);1个上调LncRNA为Mtnd4lp14(ENST00000538558)。经RT-PCR验证,Huh-7h细胞中Fundc2p4相对表达量低于Huh-7细胞(P<0.05)。临床标本RT-PCR验证,LncRNAFundc2p4在癌旁组织中的相对表达量>手术切除的肝癌组织>射频消融术后残余肝癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论射频消融不完全的肝癌细胞通过低表达EMT相关的LncRNA Fundc2p4基因来促进EMT,增强癌细胞的迁移和侵袭能力,提升肝癌复发的风险。