目的:探讨尾侧同源盒转录因子1(CDX1)对结直肠癌细胞增殖凋亡及p38MAPK磷酸化水平的影响。方法:用荧光定量PCR和Western blot检测正常肠上皮细胞FHC和结直肠癌细胞SW480、HCT116、Caco2中CDX1 m RNA和蛋白表达水平。在SW480细胞中转染p ...目的:探讨尾侧同源盒转录因子1(CDX1)对结直肠癌细胞增殖凋亡及p38MAPK磷酸化水平的影响。方法:用荧光定量PCR和Western blot检测正常肠上皮细胞FHC和结直肠癌细胞SW480、HCT116、Caco2中CDX1 m RNA和蛋白表达水平。在SW480细胞中转染p IRES-CDX1和p IRES记为CDX1组和载体组,以不做转染的细胞为对照组,荧光定量PCR和Western blot测定CDX1 m RNA和蛋白表达水平,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot测定细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、信号转导与转录因子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平。结果:结直肠癌细胞SW480、HCT116、Caco2中CDX1 m RNA和蛋白表达水平均明显低于正常肠上皮细胞FHC(P<0.05),SW480细胞中CDX1 m RNA和蛋白表达水平明显低于HCT116、Caco2(P<0.05)。CDX1组细胞中CDX1 m RNA和蛋白水平明显高于对照组(P<0.05),载体组细胞中CDX1 m RNA和蛋白水平与对照组相比没有统计学差异(P>0.05)。CDX1组细胞存活率明显降低,细胞凋亡率明显升高,细胞中Cleaved Caspase-3、p-p38MAPK水平升高,细胞中Bcl-2、p-STAT3水平降低,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。载体组细胞存活率、凋亡率及细胞中Cleaved Caspase-3、Bcl-2、STAT3、p-STAT3、p38MAPK、pp38MAPK蛋白水平与对照组相比没有明显变化(P>0.05)。结论:CDX1抑制结直肠癌细胞增殖,诱导Caspase-3介导的细胞凋亡,促进细胞中p38MAPK磷酸化,抑制细胞中STAT3磷酸化。展开更多
文摘目的:探讨尾侧同源盒转录因子1(CDX1)对结直肠癌细胞增殖凋亡及p38MAPK磷酸化水平的影响。方法:用荧光定量PCR和Western blot检测正常肠上皮细胞FHC和结直肠癌细胞SW480、HCT116、Caco2中CDX1 m RNA和蛋白表达水平。在SW480细胞中转染p IRES-CDX1和p IRES记为CDX1组和载体组,以不做转染的细胞为对照组,荧光定量PCR和Western blot测定CDX1 m RNA和蛋白表达水平,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot测定细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、信号转导与转录因子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白水平。结果:结直肠癌细胞SW480、HCT116、Caco2中CDX1 m RNA和蛋白表达水平均明显低于正常肠上皮细胞FHC(P<0.05),SW480细胞中CDX1 m RNA和蛋白表达水平明显低于HCT116、Caco2(P<0.05)。CDX1组细胞中CDX1 m RNA和蛋白水平明显高于对照组(P<0.05),载体组细胞中CDX1 m RNA和蛋白水平与对照组相比没有统计学差异(P>0.05)。CDX1组细胞存活率明显降低,细胞凋亡率明显升高,细胞中Cleaved Caspase-3、p-p38MAPK水平升高,细胞中Bcl-2、p-STAT3水平降低,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。载体组细胞存活率、凋亡率及细胞中Cleaved Caspase-3、Bcl-2、STAT3、p-STAT3、p38MAPK、pp38MAPK蛋白水平与对照组相比没有明显变化(P>0.05)。结论:CDX1抑制结直肠癌细胞增殖,诱导Caspase-3介导的细胞凋亡,促进细胞中p38MAPK磷酸化,抑制细胞中STAT3磷酸化。