帕金森发病机制及其最新治疗策略

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种与年龄相关的神经退行性疾病,患者大脑黑质中的多巴胺能神经细胞随着时间的推移逐渐死亡.帕金森病主要表现为静止性震颤、运动迟缓、僵硬,最终无法控制运动功能而导致严重残疾.PD的发病机制复杂且尚不清楚,治疗方案也收效甚微.从氧化应激、线粒体功能缺陷、蛋白过度表达和聚集、神经炎症以及Ca^(2+)稳态受损方面介绍帕金森病的发病机制及其最新治疗策略,为后续帕金森病的治疗提供理论基础.

基于网络药理学对刺五加总苷治疗2型糖尿病作用机制研究

本文以刺五加总苷中的7种主要成分为研究对象,利用网络药理学方法对刺五加总苷治疗2型糖尿病(diabetes mellitus type 2)的作用机制进行探讨。首先运用SwissTargetPrediction、GeneCard、String平台在线预测这7种成分与2型糖尿病相关的潜在靶点共35个。然后使用Cytoscape3.6.1构建"成分-靶点"网络图,并利用内置的Networkanalyzer工具进行拓扑学分析。在DAVID6.8平台上进行基因功能(gene ontology,GO)富集分析和KEGG通路富集分析,根据富集结果构建"成分-靶点-通路"网络图。并筛选出可能主要作用于2型糖尿病的成分作为核心成分,然后将核心成分与关键疾病靶蛋白进行分子对接验证,并深入分析刺五加总苷作用的潜在机制。结果经筛选,共有8条与2型糖尿病相关的重要通路。本研究表明,刺五加苷A、刺五加苷D、刺五加苷E和芝麻素在胰岛素抵抗、细胞凋亡和炎症相关通路起关键作用。刺五加总苷可能主要通过作用信号转导子和转录激活子(signal transducer and activator of transcription,STATs)、非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶(polyclonal antibody to protein tyrosine phosphatase,non receptor type,PTPN)1、PTPN2、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p38蛋白等靶点,通过多通路的方式共同作用,起到对2型糖尿病的综合治疗效果,并为今后的刺五加总苷作为抗2型糖尿病药物的开发奠定了基础。

MiR-22重组腺病毒的构建及对HepG2细胞葡萄糖摄取的影响

文中构建了miR-22重组腺病毒Ad-miR-22,分析了其对HepG2细胞胰岛素信号通路及葡萄糖摄取的抑制作用。通过PCR方法,扩增了miR-22的前体及侧翼序列,酶切后克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdT-22,经PCR及测序鉴定。穿梭质粒经PmeⅠ线性化后,直接转化含有腺病毒骨架载体的感受态细胞BJ5183,产生重组腺病毒质粒Ad-miR-22,最后经PacⅠ线性化后转染包装细胞系293A。重组腺病毒经过3轮扩增后感染HepG2细胞,通过荧光定量PCR检测miR-22表达水平。通过葡萄糖摄取实验观察Ad-miR-22对HepG2细胞葡萄糖摄取的影响。采用Western blotting检测Ad-miR-22对HepG2细胞SIRT1在蛋白质水平的表达及GSK-3β磷酸化水平的影响。采用荧光定量PCR检测miR-22对PEPCK及G6Pase等基因在mRNA水平表达的影响。结果表明,重组腺病毒Ad-miR-22感染显著增加HepG2细胞miR-22表达水平。此外,Ad-miR-22显著抑制胰岛素诱导的HepG2葡萄糖摄取,并通过下调GSK-3β磷酸化抑制胰岛素信号通路的激活。Ad-miR-22反转胰岛素对糖异生关键酶表达的抑制作用,并下调SIRT1基因在蛋白质水平的表达。综上所述,构建了miR-22的重组腺病毒,发现其显著增加糖异生,抑制HepG2细胞葡萄糖摄取,该作用可能与miR-22调节SIRT1在蛋白质水平的表达有关。