miR-29b2c重组腺病毒的构建及对胃癌细胞增殖和迁移的影响

构建了miR-29b2c重组腺病毒Ad-miR-29b2c,考察了其对HGC-27、MGC-803胃癌细胞增殖及迁移的抑制作用。采用PCR从基因组扩增miR-29b2c片段,并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdT-29b2c,经酶切及测序鉴定。穿梭质粒经PmeⅠ线性化后与腺病毒骨架载体共转化BJ5183感受态,产生重组腺病毒质粒Ad-miR-29b2c,再经PacⅠ线性化后转染293A细胞进行包装。重组腺病毒扩增后感染HGC-27细胞,通过MTT及细胞迁移实验观察Ad-miR-29b2c对HGC-27、MGC-803细胞增殖及迁移的影响。采用Western blotting检测Ad-miR-29b2c对HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达的影响。酶切、测序及荧光定量PCR结果表明重组腺病毒构建成功,miR-29b及miR-29c在HGC-27细胞过表达。MTT实验表明Ad-miR-29b2c能显著抑制HGC-27、MGC-803细胞增殖。细胞迁移实验表明Ad-miR-29b2c能显著抑制HGC-27、MGC-803细胞迁移。此外,Ad-miR-29b2c能显著降低HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达水平。综上所述,构建了miR-29b2c的重组腺病毒,并发现其可以抑制胃癌细胞HGC-27和MGC-803的增殖及迁移,该作用可能与miR-29抑制HGC-27、MGC-803细胞δ-catenin蛋白表达有关。

和厚朴酚及其代谢物在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学与组织分布对比研究

本文旨在对比研究和厚朴酚在正常及2型糖尿病大鼠体内的药动学及组织分布差异。采用高脂饮食联合低剂量链脲佐菌素的方法造模,灌胃50 mg·kg^(-1)和厚朴酚后,采用HPLC法检测正常及糖尿病大鼠和厚朴酚及代谢产物在血浆及组织中的浓度,计算药代动力学参数。结果表明糖尿病模型组和厚朴酚的AUC0-t(3 004.7±391.4μg·h L^(-1))、Cmax(614.7±182.4μg·L^(-1))相对于正常对照组AUC0-t(3 827.2±926.9μg·h·L^(-1))、Cmax(872.5±233.1μg·L^(-1))显著降低(P<0.05),模型组代谢产物M2的Cmax(2 785.3±756.3μg·L^(-1))和AUC0-t(6 830.6±2660.4μg·h·L^(-1))都大于正常对照组(Cmax为1 711.9±1 026.4μg·L^(-1),AUC0-t为5 472.9±2 527.2μg·h·L^(-1)),且Cmax有极显著性差异(P<0.01)。糖尿病模型组大鼠肝脏、肾脏和脑中和厚朴酚暴露量均高于正常对照组,M1在模型组肝脏中的暴露量高于正常组;M2在模型组肝脏和肾脏中的暴露量高于正常组。说明在糖尿病病理状态下,和厚朴酚及其代谢产物的药动学和组织分布发生了一定改变。