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Notch1信号通路对小鼠触液神经元体外增殖能力的调节作用
被引量:
1
1
作者
何宇祺
林宗龙
+5 位作者
王硕
陈立
王洪超
施晓会
豆晓伟
李青
《中国脊柱脊髓杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期262-270,共9页
目的:探讨Notch1信号通路在调节小鼠触液神经元增殖中的作用。方法:(1)取出生24h内C57BL/6小鼠延髓组织,消化后提取细胞,经流式细胞分选得到触液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons, CSFcNs)。将CSF-cNs悬浮培养并传代。(2)...
目的:探讨Notch1信号通路在调节小鼠触液神经元增殖中的作用。方法:(1)取出生24h内C57BL/6小鼠延髓组织,消化后提取细胞,经流式细胞分选得到触液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons, CSFcNs)。将CSF-cNs悬浮培养并传代。(2)将CSF-cNs传至第2代,培养0h、24h、48h、72h、96h、120h时应用CCK-8法检测CSF-cNs光密度(optical density,OD)值,培养5d时应用免疫荧光检测CSF-cNs特异性标志物多囊肾病2型1通道蛋白(polycystic kidney disease 2 like 1,PKD2L1)与神经干细胞标志物Nestin、Sox2及增殖标志物Ki67共表达情况。(3)将第3代CSF-cNs分为4组:对照组、Jagged-1组、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组、γ-分泌酶抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯[(3,5-difluorophenylacetyl)-L-alanyl-L-2-phenylglycine tert-butyl ester,DAPT]组。对照组采用无血清神经培养液培养;Jagged-1组采用无血清神经培养液+5μmol/L Jagged-1培养;DMSO组采用无血清神经培养液+0.05%DMSO培养;DAPT组采用无血清神经培养液+50μmol/L DAPT培养。培养0h、24h、48h、72h、96h、120h时应用CCK-8法检测各组CSF-cNs的OD值;培养5d时应用Western Blot检测各组CSF-cNs PKD2L1、Notch1、Notch受体胞内段(NICD)、Hes1、β-actin蛋白表达情况,应用免疫荧光法检测各组CSF-cNs增殖标志物Ki67蛋白荧光强度(arbitrary unit,A.U.)值。结果:(1)提取的细胞经流式细胞分选后得到的CSF-cNs纯度为(94.5±2.03)%,存活率为(93.64±2.35)%。CSF-cNs可连续传代并形成神经球。(2)第2代CSF-cNs培养0h、24h、48h、72h及96h时的OD值具有统计学差异(P<0.05),96h与120h的OD值无统计学差异(P=0.44)。CSF-cNs中PKD2L1可与Nestin、Sox2或Ki67共表达。(3)第3代CSF-CNS分组处理后各组细胞PKD2L1蛋白表达量无统计学差异(P=0.27)。Jagged-1组细胞Notch1、NICD、Hes1蛋白表达量均较对照组升高(P<0.01);72h、96h、120h的OD值较对照组均显著性升高(P_(72h)=0.03,P_(96h)=0.02,P_(120h)=0.01);Ki67蛋白A.U.值较对照组显著性升高(P<0.01)。DAPT组细胞Notch1、NICD、Hes1蛋白表达量较对照组均显著性减低(P<0.01);72h、96h、120h的OD值与对照组比较均显著性降低(P<0.01);Ki67蛋白A.U.值较对照组显著性降低(P<0.01)。DMSO组各项指标与对照组比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:CSF-cNs在体外具有神经干细胞潜能;激活Notch1信号通路可增强CSF-cNs的增殖能力,抑制Notch1信号通路可降低CSF-cNs的增殖能力。
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关键词
触液神经元
神经干细胞
Notch1信号通路
增殖
大鼠
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职称材料
腕掌部滑膜鞘内滑囊炎并米粒体形成一例
被引量:
1
2
作者
向先祥
齐双
+5 位作者
刘翔
周帅
鹿占斌
谭诗平
左中
周焱涛
《中华医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期711-712,共2页
关节周围滑囊炎是一种慢性炎性疾病,主要影响膝关节、肘关节、髋关节、踝关节及肩关节,很少累及腕关节;米粒体的发病机制尚不明确,相关研究报道其治疗方案不统一,大多数个案报告均以手术治疗为主,现结合我院收治的1例腕掌侧腱鞘内滑囊...
关节周围滑囊炎是一种慢性炎性疾病,主要影响膝关节、肘关节、髋关节、踝关节及肩关节,很少累及腕关节;米粒体的发病机制尚不明确,相关研究报道其治疗方案不统一,大多数个案报告均以手术治疗为主,现结合我院收治的1例腕掌侧腱鞘内滑囊炎并米粒体形成患者的临床表现、影像学及病理结果,对其病因、诊断及治疗进行简单讨论。
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关键词
米粒体
滑囊炎
腕掌部
原文传递
题名
Notch1信号通路对小鼠触液神经元体外增殖能力的调节作用
被引量:
1
1
作者
何宇祺
林宗龙
王硕
陈立
王洪超
施晓会
豆晓伟
李青
机构
贵州医科大学临床医学院
湖北
省
恩施土家族苗族自治州
中心医院
骨科
山东省日照市莒县人民
医院
骨科
四川省达州市
中心医院
骨科
贵州医科大学附属
医院
临床研究
中心
贵州医科大学附属
医院
创伤
骨科
出处
《中国脊柱脊髓杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第3期262-270,共9页
基金
国家自然科学基金(81960234)
贵州省自然科学基金[QKH-J(2020)1Y323]。
文摘
目的:探讨Notch1信号通路在调节小鼠触液神经元增殖中的作用。方法:(1)取出生24h内C57BL/6小鼠延髓组织,消化后提取细胞,经流式细胞分选得到触液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons, CSFcNs)。将CSF-cNs悬浮培养并传代。(2)将CSF-cNs传至第2代,培养0h、24h、48h、72h、96h、120h时应用CCK-8法检测CSF-cNs光密度(optical density,OD)值,培养5d时应用免疫荧光检测CSF-cNs特异性标志物多囊肾病2型1通道蛋白(polycystic kidney disease 2 like 1,PKD2L1)与神经干细胞标志物Nestin、Sox2及增殖标志物Ki67共表达情况。(3)将第3代CSF-cNs分为4组:对照组、Jagged-1组、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组、γ-分泌酶抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯[(3,5-difluorophenylacetyl)-L-alanyl-L-2-phenylglycine tert-butyl ester,DAPT]组。对照组采用无血清神经培养液培养;Jagged-1组采用无血清神经培养液+5μmol/L Jagged-1培养;DMSO组采用无血清神经培养液+0.05%DMSO培养;DAPT组采用无血清神经培养液+50μmol/L DAPT培养。培养0h、24h、48h、72h、96h、120h时应用CCK-8法检测各组CSF-cNs的OD值;培养5d时应用Western Blot检测各组CSF-cNs PKD2L1、Notch1、Notch受体胞内段(NICD)、Hes1、β-actin蛋白表达情况,应用免疫荧光法检测各组CSF-cNs增殖标志物Ki67蛋白荧光强度(arbitrary unit,A.U.)值。结果:(1)提取的细胞经流式细胞分选后得到的CSF-cNs纯度为(94.5±2.03)%,存活率为(93.64±2.35)%。CSF-cNs可连续传代并形成神经球。(2)第2代CSF-cNs培养0h、24h、48h、72h及96h时的OD值具有统计学差异(P<0.05),96h与120h的OD值无统计学差异(P=0.44)。CSF-cNs中PKD2L1可与Nestin、Sox2或Ki67共表达。(3)第3代CSF-CNS分组处理后各组细胞PKD2L1蛋白表达量无统计学差异(P=0.27)。Jagged-1组细胞Notch1、NICD、Hes1蛋白表达量均较对照组升高(P<0.01);72h、96h、120h的OD值较对照组均显著性升高(P_(72h)=0.03,P_(96h)=0.02,P_(120h)=0.01);Ki67蛋白A.U.值较对照组显著性升高(P<0.01)。DAPT组细胞Notch1、NICD、Hes1蛋白表达量较对照组均显著性减低(P<0.01);72h、96h、120h的OD值与对照组比较均显著性降低(P<0.01);Ki67蛋白A.U.值较对照组显著性降低(P<0.01)。DMSO组各项指标与对照组比较均无统计学差异(P>0.05)。结论:CSF-cNs在体外具有神经干细胞潜能;激活Notch1信号通路可增强CSF-cNs的增殖能力,抑制Notch1信号通路可降低CSF-cNs的增殖能力。
关键词
触液神经元
神经干细胞
Notch1信号通路
增殖
大鼠
Keywords
Cerebrospinal fluid-contacting neurons
Neural stem cells
Notch1 signal pathway
Proliferation
Rat
分类号
Q507 [生物学—生物化学]
Q813 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
腕掌部滑膜鞘内滑囊炎并米粒体形成一例
被引量:
1
2
作者
向先祥
齐双
刘翔
周帅
鹿占斌
谭诗平
左中
周焱涛
机构
大连九洲世纪
医院
骨科
大连九洲世纪
医院
病理科
湖北恩施土家族苗族自治州中心医院骨科
出处
《中华医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第9期711-712,共2页
文摘
关节周围滑囊炎是一种慢性炎性疾病,主要影响膝关节、肘关节、髋关节、踝关节及肩关节,很少累及腕关节;米粒体的发病机制尚不明确,相关研究报道其治疗方案不统一,大多数个案报告均以手术治疗为主,现结合我院收治的1例腕掌侧腱鞘内滑囊炎并米粒体形成患者的临床表现、影像学及病理结果,对其病因、诊断及治疗进行简单讨论。
关键词
米粒体
滑囊炎
腕掌部
分类号
R684 [医药卫生—骨科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Notch1信号通路对小鼠触液神经元体外增殖能力的调节作用
何宇祺
林宗龙
王硕
陈立
王洪超
施晓会
豆晓伟
李青
《中国脊柱脊髓杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
1
下载PDF
职称材料
2
腕掌部滑膜鞘内滑囊炎并米粒体形成一例
向先祥
齐双
刘翔
周帅
鹿占斌
谭诗平
左中
周焱涛
《中华医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
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