宏基因组二代测序用于结核性脑膜炎诊断的Meta分析

目的通过Meta分析探讨宏基因组二代测序(mNGS)对结核性脑膜炎(TBM)的诊断价值,旨在为TBM的诊断和治疗提供科学依据。方法检索PubMed、Scopus、Cochrane library、Embase、万方数据库、中国知网和中国生物医学文献数据库,收集相关研究数据。采用Meta分析评估mNGS对TBM的诊断价值。结果共纳入11篇文献,涉及TBM患者435例及非TBM患者454例。mNGS诊断TBM的合并灵敏度为0.65[95%CI(0.61~0.70)],合并特异度为0.98[95%CI(0.96~0.99)],合并阳性似然比为12.09[95%CI(6.68~21.87)],合并阴性似然比(NLR)为0.38[95%CI(0.28~0.53)],合并诊断比值比为32.73[95%CI(14.39~74.45)],综合受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.95(Q^(*)=0.89)。合并灵敏度和合并NLR的异质性均较大,但不存在阈值效应。亚组分析结果表明,回顾性研究组合并灵敏度高于前瞻性研究组,差异有统计学意义(P=0.019);回顾性研究组合并特异度与前瞻性研究组比较,差异无统计学意义(P=0.196)。结论mNGS对TBM的诊断具有良好的特异度和AUC,但灵敏度中等。因此,应开发更为灵敏的检测方法,以辅助诊断TBM。

下调microRNA-10b通过靶向调控CEBPα表达促进脂肪干细胞的成骨分化

目的探讨下调microRNA-10b(miR-10b)对小鼠脂肪干细胞(ADSCs)成骨分化的影响。方法分离培养小鼠ADSCs,对其进行细胞形态学及流式细胞术鉴定;应用脂质体稳定转染法转染小鼠ADSCs,将转染miR-10b inhibitor、si-CEBPα及miR-10b inhibitor+si-CEBPα的ADSCs依次设为miR-10b inhibitor组、si-CEBPα组及miR-10b inhibitor+si-CEBPα组;同时将上述对应的阴性对照序列转染入ADSCs中,分别记为miR-NC组、si-NC组及miR-NC+si-NC组,正常对照组(control组)为无任何特殊处理的ADSCs;采用RT-PCR法检测转染后ADSCs中miR-10b的表达;生物信息学预测miR-10b与CEBPα的靶向关系,并采用双荧光素酶基因报告实验、实时荧光定量PCR及Western blot验证两者的靶向关系;利用茜素红染色及碱性磷酸酶(ALP)活性检测实验明确miR-10b对小鼠ADSCs成骨分化的影响及CEBPα在其中的作用。结果与control组和miR-NC组相比,miR-10b inhibitor组小鼠ADSCs中miR-10b的表达显著较低(P<0.05);双荧光素酶基因报告实验、RT-PCR和Western blot实验结果表明,miR-10b可在小鼠ADSCs中靶向调控CEBPα基因的表达,且与miR-NC组相比,miR-10b inhibitor组ADSCs中CEBPα的mRNA及蛋白表达均显著增加(P<0.05);茜素红染色及ALP活性检测结果表明,与control组和miR-NC组相比,miR-10b inhibitor组ADSCs细胞形成的矿化结节及ALP活性均显著增加(P<0.05)。功能挽救实验证实,在小鼠ADSCs细胞中同时转染沉默CEBPα的si-CEBPα及miR-10b inhibitor后,miR-NC+si-NC组和miR-10b inhibitor+si-CEBPα组ADSCs细胞形成的矿化结节与ALP活性均较si-NC+miR-10b inhibitor组低(P<0.05),且前2组之间无明显差异(P>0.05)。结论在小鼠ADSCs中,下调miR-10b通过靶向调控CEBPα的表达促进脂肪干细胞的成骨分化。