PEITC对人鼻咽癌CNE-1/CNE-2细胞凋亡作用及机制研究

目的:观察PEITC(异硫氰酸苯乙酯)对人鼻咽癌CNE-1/2细胞生长的影响以及对正常鼻咽部上皮细胞的毒性作用,探讨其抗肿瘤作用机制.方法:MTT法测定PEITC对CNE-1/2细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测PEITC对CNE-1/2细胞凋亡和氧化还原水平的影响;NAC阻断后其氧化还原水平的变化.结果:PEITC能抑制CNE-1/2细胞生长,随时间延长和剂量增加肿瘤细胞数明显减少,CNE-2凋亡作用更加明显,而对NP-69细胞组细胞毒性较低.当10.0 mg·ml^(-1) PEITC在96 h时间点,NP-69细胞组IC50(12.62±0.52)与CNE-1组(3.57±0.34)、CNE-2细胞组IC_(50)(2.64±0.20)差异具有统计学意义(P<0.01);用Annexin V/PI染色流式细胞检测各组细胞经PEITC处理24 h后细胞发生凋亡,随着PEITC浓度(0、5.0、10.0 mg·ml^(-1))的增加,细胞凋亡率增加;当PEITC10.0 mg·ml^(-1)浓度时,CNE-1/CNE-2凋亡率与对照组差异具有统计学意义(P<0.01);DCFH-DA探针标记后流式检测活性氧水平结果显示:CNE-1/CNE-2活性氧水平分别在6、12h时间点与对照组差异具有统计学意义(P<0.01);Rhodamine-123试剂盒测定线粒体膜电位显示:10.0 mg·ml^(-1)浓度PEITC时CNE-1/CNE-2线粒体膜电位在24 h时间点与对照组差异具有统计学意义(P<0.01);用NAC预处理各组细胞后检测细胞活性氧及线粒体膜电位均出现反向作用.结论:PEITC能抑制人鼻咽癌CNE-1/2细胞的生长,同时对NP-69细胞具有低毒性,其抗肿瘤作用可能与其干扰细胞内的氧化还原反应,诱导细胞凋亡有关.