检验科微生物检验质量的影响因素及病原菌耐药性分析

目的探讨检验科微生物检验质量的影响因素,并对病原菌的耐药性进行分析。方法选择2018年3月-2019年3月在我院实施微生物检验的408例患者的检验报告,通过K-B法完成药敏试验,并进行数据分析。结果检验科微生物检验质量的影响因素主要包括患者生理因素、检验人员素质水平因素、试剂因素、检验仪器因素以及标本留取时间因素。此次研究分离的病原菌共计512株,革兰阴性菌共262株,占比51.17%;革兰阳性菌共208株,占比40.63%;真菌共42株,占比8.20%,且金黄色葡萄球菌对青霉素耐药性比较高;而大肠埃希菌对头孢呋辛耐药性比较高。结论检验科微生物检验质量的影响因素较多,在实际检验工作之中,应该严格依照相关操作规范及标准完成检验,保证检验结果准确性,从而有助于为临床治疗提供有效依据。

不同病程的糖尿病患者合并肺部感染病原菌分布及耐药性比较

目的探讨不同病程的糖尿病患者合并肺部感染病原菌分布及耐药性差异,为临床合理选用抗菌药物提供参考。方法选择某院2015年1月—2018年10月收治的2型糖尿病合并肺部感染患者,分为长病程组(病程≥10年)和短病程组(病程<10年),采集合格痰标本进行细菌学培养及药物敏感试验,对监测数据进行统计学分析。结果长病程组共纳入132例,短病程组127例。分离病原菌385株,长病程组分离201株,短病程组分离184株。长病程组检出革兰阴性菌和真菌的比例高于短病程组,检出革兰阳性菌的比例低于短病程组;长病程组检出鲍曼不动杆菌的比例高于短病程组,检出金黄色葡萄球菌的比例低于短病程组;差异均有统计学意义(均P<0.05)。长病程组产ESBLs、MR菌株的检出率均高于短病程组(40.87%vs 22.03%;37.50%vs 19.61%),差异有统计学意义(均P<0.05)。药敏结果表明,肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对头孢呋辛、左氧氟沙星的耐药率≥50%;鲍曼不动杆菌对氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、左氧氟沙星、妥布霉素的耐药率均≥50%;铜绿假单胞菌对左氧氟沙星、环丙沙星、妥布霉素的耐药率>50%;金黄色葡萄球菌对头孢唑林、头孢曲松、克林霉素、阿奇霉素、庆大霉素的耐药率均>50%。长病程组检出铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、亚胺培南和阿米卡星的耐药率均高于短病程组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论不同病程糖尿病患者合并肺部感染的病原菌分布和部分细菌对某些抗菌药物的耐药性存在差异,临床应区别对待。

PBMCIP-10mRNA对慢性HBV感染相关肝衰竭预后的影响

目的探讨外周血单个核细胞（PBMC）IP-10mRNA水平与HBV相关慢加亚急性肝衰竭患者预后的关系。方法对2014年1月至2015年2月住院的HBV相关慢加亚急性肝衰竭患者50例，给予内科综合治疗并随访3个月，所有患者抽取外周静脉血检测单个核细胞IP-10mRNA水平；选取同时期20例慢性乙型肝炎（CHB）患者、20例乙肝后肝硬化患者和20例健康体检者作为对照，检测其PBMC中IP-10mRNA表达水平，分析各组间的差异。同时分析肝衰竭生存组和死亡组IP-10mRNA表达的差异。结果健康对照组、慢性乙型肝炎组、乙肝后肝硬化组和肝衰竭组患者PBMCIP-10mRNA水平分别为0．412±0．061，0．641±0．083，0．693±0．033，0．956±0．277。肝衰竭组患者PBMCIP-10mRNA水平显著高于其他三组（P〈0．01）；慢性乙型肝炎组患者PBMCIP—10mRNA水平高于健康对照组（P〈0．01）。肝衰竭死亡组PBMCIP-10mRNA水平为1．126±0．270，高于生存组的0．823±0．202，差异有统计学意义（t=-4．5296，P〈0．01）。受试者工作特征曲线下面积为0．81，临界值为0．9255，大于界值组生存率为18．18％（4／22），小于界值组生存率为85．71％（24／28），χ2=22．803，P〈0．001。结论HBV相关慢加急性肝衰竭患者PBMCIP-10mRNA水平与预后相关，检测患者PBMCIP-10mRNA，有助于评估HBV—ACLF的预后。

CXCL10基因rs56061981单核苷酸多态性与HBV相关慢加急性肝衰竭易感性及严重程度的关系

目的探讨CXC趋化因子配体10(C-H-C motif chemokine ligand 10,CXCL10)基因rs56061981单核苷酸多态性与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关慢加急性肝衰竭(hepatitis B virus related acute-on-chronic liver failure,HBV-ACLF)发病风险及病情严重程度的关系。方法收集86例HBV-ACLF和42例慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者入院时的血液标本。常规方法检测患者血清丙氨酸转氨酶(alanine transferase,ALT)、总胆红素(total bilirubin,TBil)、国际标准化比值(international standard ratio,INR)、肌酐(creatinine,Cr)、白蛋白(albumin,ALB)和胆碱酯酶(cholinesterase,CHE),计算终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分,荧光定量PCR方法检测患者外周血单个核细胞CXCL10 mRNA水平,DNA测序法检测CXCL10基因rs56061981位点基因型。卡方检验比较ACLF和CHB组的基因型和等位基因型频率的差异。按是否携带T等位基因分组,t检验比较两组ALT、TBil、INR、MELD、ALB、CHE及CXCL10 mRNA水平的差异。结果CHB组和HBV-ACLF组比较,性别、年龄、酗酒史、吸烟史、HBV基因型、HBeAg状态和HBV-DNA水平等差异无统计学意义(P>0.05)。ACLF组CXCL10基因rs56061981位点CT+TT基因型频率和T等位基因频率均明显高于CHB组(χ^(2)=4.83,P=0.03和χ^(2)=4.95,P=0.03),有显著性差异。基因型CT+TT是CHB进展成HBV-ACLF的危险因素(OR=2.897,95%CI:1.09~7.68);等位基因T是CHB进展成HBV-ACLF的危险因素(OR=2.746,95%CI:1.10~6.89)。携带T等位基因的ACLF个体血浆INR值和MELD评分明显高于携带C等位基因的个体(t=2.63,P=0.013和t=2.7,P=0.011),有显著性差异。ALB和CHE明显低于携带C等位基因的个体(t=2.67,P=0.01和t=3.545,P=0.001),有显著性差异。而两组间血清TBiL和ALT差异无统计学意义。结论CXCL10基因rs56061981单核苷酸多态性与HBV-ACLF易感性及严重程度存在显著关联。等位基因T可能是HBV-ACLF的易感基因,可以作为患者病情严重程度的预测指标之一。

非侵入性分子标志物评估临床缓解期炎症性肠病内镜活动度价值研究

目的评估非侵入性分子标志物在临床缓解期炎症性肠病（IBD）患者内镜活动度判断中的效能。方法选择2014年8月至2015年2月在南方医院消化内镜中心行电子结肠镜检查的已确诊临床缓解期结肠或回结肠型克罗恩病（CD）34例，溃疡性结肠炎（UC）25例，均于结肠镜检查前1-3d留取粪便，检测粪便钙卫蛋白（FC）浓度，并搜集血标本检测C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）及降钙素原（PCT）浓度。结肠或回结肠型CD及UC患者内镜活动度评估分别采用简单克罗恩病内镜评分（SES—CD）和Mayo评分。结果34例临床缓解结肠或回结肠型CD中，FC与SESCD相关性最高（r=0．730），FC在临界值250μg／g时，预测内镜活动度的敏感度和特异度分别为93％和70％。25例UC中，FC与Mayo评分相关性最高（r=0．825），FC在临界值250μg／g时，预测内镜活动度的敏感度和特异度分别为84．6％和100．0％。结论FC能更有效发现临床缓解期IBD内镜下的活动性炎症。

神经梅毒血清TRUST试验特征及危险因素研究

目的探讨神经梅毒血清甲苯胺红不加热血清反应素试验(toluidine red unheated serum test,TRUST)与其他检测指标的相关性,分析神经梅毒的危险因素。方法 171例疑似梅毒患者,确诊为神经梅毒患者73例为观察组,非神经梅毒患者98例为对照组,比较2组一般资料、神经系统症状、血清TRUST滴度、脑脊液梅毒螺旋体明胶颗粒凝聚试验(treponema pallidum particle agglutination,TPPA)、脑脊液TRUST滴度、脑脊液压力、脑脊液白细胞计数、脑脊液蛋白水平,分析血清TRUST滴度与其他指标的相关性,分析神经梅毒发生的危险因素及血清TRUST滴度对神经梅毒的诊断效果。结果观察组男性比率(50.7%)、年龄[(49.7±7.8)岁]、神经系统症状比率(75.3%)、脑脊液白细胞计数[(35.9±8.1)×106/L]、脑脊液蛋白[(617±126)mg/L]、血清TRUST阳性率(100.0%)、血清TRUST滴度[1∶(51.7±5.7)]、脑脊液TRUST阳性率(100.0%)、脑脊液TRUST滴度[1∶(4.1±1.7)]高于对照组[14.3%、(39.4±12.5)岁、8.2%、(2.8±0.6)×106/L、(224±35)mg/L、72.4%、1∶(12.8±3.7)、0、1∶(0.0±0.0)](P<0.05);血清TRUST滴度与脑脊液TRUST滴度、脑脊液蛋白呈正相关(r=0.310,P=0.006;r=0.318,P=0.000);高脑脊液TRUST滴度、脑脊液TPPA阳性、脑脊液蛋白增高均为神经梅毒的危险因素(OR=3.043,95%CI:1.538~12.815,P=0.031;OR=7.523,95%CI:1.178~81.415,P=0.004;OR=20.389,95%CI:8.533~252.158,P=0.017);当血清TRUST滴度检测神经梅毒的最佳截断值为1∶16时,AUC为0.828(95%CI:0.767~0.889,P=0.000),灵敏度为68.5%,特异度为84.7%,约登指数为0.532。结论神经梅毒血清TRUST滴度与脑脊液TRUST滴度、脑脊液蛋白呈正相关;高脑脊液TRUST滴度、脑脊液TPPA阳性、脑脊液蛋白增高均是神经梅毒发生的危险因素。

趋化因子19在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及对细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的观察趋化因子19(CCL19)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达,并探讨其对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法选取病理科档案室的DLBCL患者冻存标本76例,另选取30例滤泡性淋巴瘤标本作为对照组,通过免疫印记(Western blot)法检测两组冻存标本CCL19蛋白表达情况。采用脂质体Lipofectamin 2000法将CCL19 mimics转染DLBCL细胞株OCI-Ly19,通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况;采用Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力;Western blot法检测CCL19、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达情况。结果与对照组相比,DLBCL组组织和细胞中CCL19蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白组、CCL19 NC组相比,CCL19 mimics组CCL19蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);与CCL19 NC组和空白组相比,CCL19 mimics组转染48 h后OD值降低,转染后侵袭、迁移细胞数降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白组、CCL19 NC组相比,CCL19mimics组β-catenin、Cyclin D1蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DLBCL肿瘤组织中CCL19低表达,CCL19过表达可抑制DLBCL细胞增殖、侵袭、迁移能力。

基于lncRNA微阵列芯片技术探索间充质干细胞外泌体增强小鼠胰岛β细胞抗低氧损伤的潜在机制

目的探索间充质干细胞(MSC)外泌体提高低氧条件下胰岛β细胞活性的潜在分子机制。方法将小鼠胰岛β细胞分别培养于常氧环境(5%CO_(2),95%空气)、低氧环境(2%O_(2),5%CO_(2),93%N_(2))以及低氧环境添加MSC外泌体(50μg/mL)。采用CCK-8检测试剂盒测定小鼠胰岛β细胞活性、细胞凋亡检测试剂盒分析小鼠胰岛β细胞凋亡情况;通过小鼠Arraystart LncRNA微阵列芯片分析不同培养环境下lncRNA和mRNA的表达情况;以Arraystart LncRNA微阵列芯片检测结果为生物信息学分析数据来源,基于t检验并设置显著性阈值P≤0.05和|Fold Change|≥2为筛选标准,筛选并获得差异表达显著的lncRNA和mRNA,采用Pearson相关系数法分析样本间lncRNA与mRNA表达情况的相关性以明确差异lncRNA的潜在靶基因,进而通过对上述靶基因进行GO和KEGG富集分析,来探究MSC外泌体通过哪条信号通路在低氧条件下增强小鼠胰岛β细胞抗低氧损伤能力。两组间数据比较采用t检验,三组间进行单因素方差分析,然后进行Dunnett's-t多重比较分析。结果CCK-8结果显示,与常氧条件相比,低氧条件下小鼠胰岛β细胞OD值(0.44±0.02比0.53±0.01)下降(t=4.455,P<0.05)。凋亡分析结果显示,与常氧培养相比,低氧条件下小鼠胰岛β细胞凋亡率(33.03%±3.12%比11.27%±2.69%)升高(t=5.289,P<0.01)。低氧培养条件下加入MSC来源外泌体干预后,小鼠胰岛β细胞活性OD值较单纯低氧培养(0.42±0.03比0.33±0.01)升高(P<0.01);小鼠胰岛β细胞凋亡率较低氧培养(15.23%±0.62%比32.63%±0.95%)降低(P<0.01)。利用LncRNA微阵列芯片完成小鼠胰岛β细胞中35293个lncRNA和24881个mRNA表达水平的检测,结果显示,与常氧培养条件相比低氧培养条件可引起1726个lncRNA和1023个mRNA表达差异;与低氧培养条件相比,加入MSC来源外泌体干预后,491个lncRNA和406个mRNA表达差异。对两种不同培养条件下差异lncRNA和mRNA利用韦恩图分别取交集,最终获得均有表达差异的lncRNA 112个、mRNA 60个;进一步相关性分析提示这112个lncRNA存在1582个潜在靶基因;进而对这些靶基因进行GO和KEGG富集分析,结果显示差异表达lncRNA靶基因主要与MAPK、自噬等信号通路等密切相关。结论低氧可引起小鼠胰岛β细胞凋亡,MSC来源外泌体可提高低氧条件下β细胞活性,抑制低氧诱发的小鼠胰岛β细胞凋亡,这可能与lncRNA调控MAPK、自噬等信号通路有关。