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湖北枫杨总黄酮通过调控PI3K/AKT信号通路抑制成纤维细胞样滑膜细胞的迁移和侵袭
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作者 吴昊 陈国庆 +5 位作者 卢曼 高瑛 江蕲玲 罗豪楠 袁林 向阳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期134-140,共7页
目的:观察湖北枫杨总黄酮(PHSTF)对人类风湿成纤维细胞样滑膜细胞(MH7A细胞)迁移和侵袭的抑制作用并初步探讨其可能作用机制。方法:将MH7A细胞分为分为对照组(不做任何处理)、低剂量(6.25 mg/L)PHSTF组、中剂量(12.5 mg/L)PHSTF组、高剂... 目的:观察湖北枫杨总黄酮(PHSTF)对人类风湿成纤维细胞样滑膜细胞(MH7A细胞)迁移和侵袭的抑制作用并初步探讨其可能作用机制。方法:将MH7A细胞分为分为对照组(不做任何处理)、低剂量(6.25 mg/L)PHSTF组、中剂量(12.5 mg/L)PHSTF组、高剂量(25 mg/L)PHSTF组、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)激动剂740Y-P(10μmol/L)组和740Y-P(10μmol/L)+高剂量(25 mg/L)PHSTF组。采用CCK-8法检测MH7A细胞活力;划痕实验和Transwell实验检测MH7A细胞的迁移和侵袭;Western blot检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT蛋白水平。结果:与对照组相比,各剂量PHSTF组MH7A细胞活力显著降低(P<0.05),划痕愈合面积显著减小(P<0.01),迁移和侵袭至下室的细胞显著减少(P<0.01),MMP-2和MMP-9蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值显著降低(P<0.01)。与高剂量PHSTF组相比,PI3K激动剂740Y-P显著提高了PHSTF处理下MH7A细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01),也使得MMP-2和MMP-9蛋白表达水平及p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值显著升高(P<0.01)。结论:PHSTF能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制MH7A细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 湖北枫杨总黄酮 成纤维细胞样滑膜细胞 类风湿关节炎 PI3K/AKT信号通路
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湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞迁移、侵袭和铁死亡的影响
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作者 陈国庆 董倩男 +5 位作者 杨锐 高瑛 刘人嘉 袁林 向阳 吴昊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期274-281,共8页
目的:探究湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞迁移与侵袭及铁死亡的影响及机制。方法:将A549细胞分为:对照组,低、中、高剂量(100、150和200μg/mL)枫杨总黄酮组,铁死亡抑制剂liproxstatin-1(Lip-1)组,Lip-1+高剂量枫杨总黄酮组。采... 目的:探究湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞迁移与侵袭及铁死亡的影响及机制。方法:将A549细胞分为:对照组,低、中、高剂量(100、150和200μg/mL)枫杨总黄酮组,铁死亡抑制剂liproxstatin-1(Lip-1)组,Lip-1+高剂量枫杨总黄酮组。采用CCK-8法检测细胞活力;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力;谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测细胞脂质过氧化水平;RT-qPCR检测细胞溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的mRNA水平;Western blot检测SLC7A11、GPX4、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)的蛋白表达水平。结果:与对照组相比,各剂量枫杨总黄酮组A549细胞活力降低(P<0.01),迁移及侵袭能力降低(P<0.01),GSH含量显著降低(P<0.01),SLC7A11和GPX4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Keap-1蛋白表达水平升高(P<0.01);加入铁死亡抑制剂后,与高剂量枫杨总黄酮组相比,A549细胞活力显著升高(P<0.01),SLC7A11、GPX4、Nrf2、HO-1蛋白表达水平升高,Keap-1蛋白表达水平下降(P<0.01)。结论:湖北枫杨总黄酮能抑制A549细胞迁移与侵袭并且通过调控Keap-1/Nrf2/HO-1通路诱导肺癌A549细胞铁死亡。 展开更多
关键词 湖北枫杨总黄酮 非小细胞肺癌 铁死亡 Keap-1/Nrf2/HO-1通路
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湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞的影响及机制研究 被引量:1
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作者 侯孜明 吴昊 +5 位作者 冯佳 洪岚 张宗星 刘道忠 江露 袁林 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第7期119-123,共5页
目的观察湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法将A549细胞分为对照组和枫杨总黄酮低、中、高剂量组,分别用相应培养基培养,采用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western... 目的观察湖北枫杨总黄酮对非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用,并探讨其可能作用机制。方法将A549细胞分为对照组和枫杨总黄酮低、中、高剂量组,分别用相应培养基培养,采用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot检测凋亡相关蛋白Fas、Bax、Bcl-2、Cleaved Caspase-3及周期相关蛋白Cyclin D1、P27表达。结果与对照组比较,枫杨总黄酮各剂量组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),G_(0)/G_(1)期细胞比例明显升高(P<0.01),S期细胞比例明显降低(P<0.01),Fas、Bax、Cleaved Caspase-3、P27蛋白表达明显升高,Cyclin D1蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),枫杨总黄酮中、高剂量组细胞Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论湖北枫杨总黄酮能抑制A549细胞增殖,其机制可能与激活线粒体和Fas介导的死亡受体通路以诱导A549细胞凋亡、促进A549细胞G_(0)/G_(1)期阻滞有关。 展开更多
关键词 湖北枫杨总黄酮 A549细胞 增殖 凋亡 细胞周期
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基于网络药理学和动物实验探讨当归补血汤抗肝纤维化的作用
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作者 陶柏楠 王咏兰 +3 位作者 刘道忠 万星 黄德斌 袁林 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期651-657,共7页
目的基于网络药理学和动物实验验证探讨当归补血汤抗肝纤维化的作用机制。方法通过检索TCMSP、TCMID数据库筛选出当归补血汤活性成分,运用PubChem平台获取靶点Canonical SMILES号,SwissTarget、TargetNet数据库筛选出当归补血汤对应的靶... 目的基于网络药理学和动物实验验证探讨当归补血汤抗肝纤维化的作用机制。方法通过检索TCMSP、TCMID数据库筛选出当归补血汤活性成分,运用PubChem平台获取靶点Canonical SMILES号,SwissTarget、TargetNet数据库筛选出当归补血汤对应的靶点,通过GeneCards、OMIM和TTD数据库检索获得肝纤维化相关疾病靶点,Venny 2.1.0获取当归补血汤活性成分靶点与肝纤维化的交集疾病靶点;STRING数据库获取PPI网络,Cytoscape 3.9.1软件获取核心靶点,构建“药物-活性成分-靶点”网络;DAVID数据库对核心靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析,并进行可视化处理。动物实验验证网络药理学预测结果,采用腹腔注射CCl_(4)制备肝纤维化小鼠模型,造模同时给药,持续6周;采用HE、Masson染色观察肝组织病理学变化,试剂盒检测血清ALT、AST水平,ELISA法检测血清IL-6、TNF-α、IL-1β水平,Western blot法检测肝组织α-SMA、Col-1、p-PI3K、p-Akt、p-JNK、p-P38 MAPK蛋白表达。结果从当归补血汤中筛选得到作用于肝纤维化的活性成分29种,肝纤维化相关疾病靶点2901个,药物与疾病有259个交集基因,核心靶点为MAPK、c-Jun、Akt等。KEGG通路富集分析主要涉及癌症通路、PI3K/Akt信号通路、乙型肝炎、脂质与动脉硬化信号通路、MAPK信号通路等。动物实验结果表明,当归补血汤能够下调肝纤维化小鼠血清ALT、AST、IL-6、TNF-α、IL-1β水平和肝组织α-SMA、Col-1、p-PI3K、p-Akt、p-JNK、p-P38 MAPK蛋白表达。结论当归补血汤可通过多组分、多靶点、多通路发挥抗肝纤维化作用,其机制可能与下调炎症因子释放,调节PI3K/Akt和JNK/P38 MAPK信号通路相关。 展开更多
关键词 当归补血汤 肝纤维化 网络药理学 炎症因子 PI3K/AKT信号通路 JNK/P38 MAPK信号通路
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基于HIF-1α/VEGF通路探讨土家族麝针疗法“活血生新”干预缺血性脑卒中大鼠的作用机制
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作者 余秀 涂星 +5 位作者 陈嘉碧 袁丽君 李三宇 陈通华 李鸿 张钰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期1722-1725,共4页
目的 探讨土家族麝针疗法对缺血性脑卒中大鼠运动功能的康复作用,分析缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路在缺血性脑卒中发生、发展和转归中的作用机制。方法 采用改良线栓法复制缺血性脑中风大鼠模型。筛选Zea-long... 目的 探讨土家族麝针疗法对缺血性脑卒中大鼠运动功能的康复作用,分析缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路在缺血性脑卒中发生、发展和转归中的作用机制。方法 采用改良线栓法复制缺血性脑中风大鼠模型。筛选Zea-longa评分为1~3分的大鼠,随机分为模型组、土家族麝针组、针刺组,另设立假手术组,每组15只,土家族麝针组以自制麝针刺激大鼠对侧头皮运动区肌层;针刺组以普通针灸同法治疗,持续治疗3个疗程。假手术组和模型组不做任何处理。在治疗前和每个疗程治疗结束后,每组随机选取6只大鼠进行平衡木实验检测其神经运动功能变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中的VEGF和HIF-1α含量;Western印迹检测海马中VEGF受体(VEGFR)2与酪氨酸蛋白激酶家族成员(Src)蛋白的表达。结果 治疗前,与假手术组相比,模型组、土家族麝针组和针刺组运动功能明显降低,血浆中VEGF和HIF-1α含量明显增高(P<0.05);治疗3个疗程后,与模型组比较,麝针组和针刺组的运动功能明显提高,血浆中HIF-1α和VEGF含量明显升高,大鼠海马中VEGFR2相对表达量明显升高,Src蛋白相对表达量明显降低(P<0.05);与针刺组相比,麝针组神经运动功能恢复明显较好,血浆中VEGF和HIF-1α含量明显高于针刺组(P<0.05)。麝针组海马中VEGFR2相对表达明显升高,Src蛋白相对表达明显降低(P<0.05)。结论 土家族麝针疗法对缺血性脑卒中所致运动功能障碍的康复有明显促进作用,可能是通过调节HIF-1α/VEGF信号通路以“活血化瘀生新”而实现的。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 缺氧诱导因子(HIF)-1α/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路 麝针疗法 运动功能 活血生新
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大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞自噬的影响
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作者 陶柏楠 王咏兰 +1 位作者 洪岚 袁林 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期1-7,共7页
目的基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MD... 目的基于cGAS/STING信号通路研究大黄素对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)自噬的潜在作用。方法采用CCK-8法检测MH7A细胞增殖的结果,并根据细胞存活率筛选出药物的浓度,并加入自噬抑制剂3-MA进一步验证大黄素对自噬的影响;采用MDC法检测MH7A细胞自噬情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测cGAS、STING、p-STING、LC3-I、LC3-II、P62和Beclin-1的蛋白表达水平。结果MDC染色结果提示,大黄素能够增强MH7A细胞自噬;Western blot结果提示,大黄素可降低MH7A细胞自噬相关蛋白cGAS、STING、p-STING和P62的表达,增加LC3-II和Beclin-1的表达。加入自噬抑制剂3-MA后,MH7A细胞P62蛋白表达升高,LC3-II和Beclin-1蛋白表达降低。结论大黄素可能通过下调cGAS/STING信号通路加速自噬,抑制MH7A细胞增殖。 展开更多
关键词 大黄素 MH7A细胞 cGAS/STING信号通路 自噬 类风湿关节炎
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温针灸治疗类风湿关节炎的临床研究进展
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作者 江露 张宗星 +1 位作者 刘道忠 袁林 《中医临床研究》 2024年第3期51-54,共4页
类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种慢性炎症及自身免疫性疾病,主要侵袭滑膜关节,最终可导致关节畸形甚至骨折,具有复发率高、致残率高、病程长的特点,严重影响患者生活质量。其病因复杂且不清楚,迄今为止,尚无治疗RA特效药... 类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种慢性炎症及自身免疫性疾病,主要侵袭滑膜关节,最终可导致关节畸形甚至骨折,具有复发率高、致残率高、病程长的特点,严重影响患者生活质量。其病因复杂且不清楚,迄今为止,尚无治疗RA特效药物及疗法。近年来,现代医学治疗RA的药物虽可较快控制临床症状,能在一定程度上延缓疾病进程,但其不良反应大、费用昂贵等问题日益凸显。RA归属于中医“痹证”的范畴,中医药治疗RA已成为研究的热点。中医药治疗RA具有多途径、多靶点、多效应等优势。中医外治法治疗RA已广泛应用于临床,其中温针灸治疗RA历史悠久、不良反应小、疗效显著。目前温针灸治疗RA在单独使用、联合西药、联合中药、联合其他中医外治法(穴位贴敷、中药熏洗、中药热敷、刺络拔罐疗法、刺络放血、中频药透、穴位注射)及联合臭氧自血疗法等在改善临床症状、延缓疾病进程、改善预后上作用明显,且安全性高,不良反应小。本篇文章主要将近5年来温针灸治疗RA的临床研究进展进行综述,以期为临床使用温针灸治疗RA提供更好的理论依据。 展开更多
关键词 温针灸 类风湿关节炎 综述
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桂枝附子汤调控AGEs/RAGE/NF-κB信号通路对类风湿关节炎大鼠的影响 被引量:3
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作者 尹谢添 赵诗超 +3 位作者 向楠 朱晓密 徐俊 张誉丹 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1809-1815,共7页
目的研究桂枝附子汤对类风湿关节炎(RA)大鼠的干预作用及对晚期糖基化终末产物(AGEs)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法将50只大鼠随机分为空白组、模型组、桂枝附子汤组(6.1 g/kg)、RAGE抑制... 目的研究桂枝附子汤对类风湿关节炎(RA)大鼠的干预作用及对晚期糖基化终末产物(AGEs)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法将50只大鼠随机分为空白组、模型组、桂枝附子汤组(6.1 g/kg)、RAGE抑制剂组(0.5 mg/kg)、桂枝附子汤+RAGE抑制剂组(6.1 g/kg+0.5 mg/kg),每组10只。用牛Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂(IFA)混合乳化诱导建立RA大鼠模型,造模后连续灌胃给药30 d。给药结束后,测定大鼠关节炎指数和关节肿胀度,HE染色观察大鼠踝关节软骨及滑膜组织病理变化,ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western blot法检测大鼠踝关节软骨组织RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达,免疫组化(IHC)法观察大鼠踝关节软骨组织AGE和软骨及滑膜组织TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)阳性细胞表达。结果与模型组比较,桂枝附子汤组、抑制剂组和桂枝附子汤+抑制剂组均能有效降低RA大鼠关节炎指数、关节肿胀度、血清炎性因子IL-6、TNF-α水平、软骨组织AGE、RAGE、p-NF-κB p65蛋白表达和软骨及滑膜组织TNF-α、IL-1β蛋白表达(P<0.01),并能减轻软骨破坏,改善滑膜的炎性细胞浸润。结论桂枝附子汤对RA大鼠软骨和滑膜具有保护作用,该作用与抑制AGEs/RAGE/NF-κB信号通路活化,进而下调下游炎性因子表达有关。 展开更多
关键词 桂枝附子汤 类风湿关节炎 AGEs/RAGE/NF-κB信号通路 炎性因子
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儿茶素干预硬脂酰辅酶A去饱和酶-1表达抗小鼠肝纤维化损伤 被引量:2
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作者 万星 陶柏楠 +3 位作者 邵文翠 金铮钰 黄德斌 袁林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期305-310,共6页
目的探讨儿茶素(catechin,CA)是否通过影响SCD1表达抗四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的小鼠肝纤维化。方法48只C57bl/6雄性小鼠被随机分为6组:正常组、CCl_(4)组、CA 100、200、400 mg·kg^(-1)组(CA-L/M/H)、水飞蓟宾... 目的探讨儿茶素(catechin,CA)是否通过影响SCD1表达抗四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl_(4))诱导的小鼠肝纤维化。方法48只C57bl/6雄性小鼠被随机分为6组:正常组、CCl_(4)组、CA 100、200、400 mg·kg^(-1)组(CA-L/M/H)、水飞蓟宾组(200 mg·kg^(-1))。腹腔注射CCl_(4)造模,共6周,前3周给小鼠灌胃CA和水飞蓟宾。处死后,观察肝大体形态、测量肝指数,通过HE染色、AST、ALT检测肝损,Masson染色检测胶原沉积及免疫组织化学检测α-SMA、collagenⅠ的表达观察肝纤维化程度,ELISA检测甘油三酯、油红O染色观察脂质累积,进而QPCR、Western blot检测CA对脂肪酸限速酶SCD1表达的影响并用分子对接技术检测CA与SCD1相互作用模式。结果较正常组,CA明显降低ALT、AST、α-SMA、collagenⅠ、甘油三酯的含量,抑制了CCl_(4)引起的肝纤维化,减少脂质累积(P<0.05),量效依赖地降低SCD1mRNA和蛋白表达(P<0.05),与SCD1通过4个氢键(Arg74,Asn148,Trp184和Val187)和6个氨基酸形成的范德华力相互作用,结合自由能为-5.4 kcal·mol^(-1)。结论CA可量效依赖地对抗CCl_(4)引起的小鼠肝纤维化,其机制可能与抑制SCD1表达从而减少脂质合成有关。 展开更多
关键词 儿茶素 肝纤维化 SCD1 脂质 分子对接技术 CCl_(4)
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中医治疗风寒湿痹型类风湿关节炎的研究进展 被引量:1
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作者 张宗星 江露 +2 位作者 刘道忠 袁林 冯佳 《中医临床研究》 2023年第27期96-100,共5页
类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎及对称性、破坏性的关节病变为主要特征的自身免疫性疾病,其病程长,致畸和致残率高,迄今尚无特效疗法。目前西医治疗RA常见药物有非甾体抗炎药、糖皮质激素、生物制剂等,但长... 类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎及对称性、破坏性的关节病变为主要特征的自身免疫性疾病,其病程长,致畸和致残率高,迄今尚无特效疗法。目前西医治疗RA常见药物有非甾体抗炎药、糖皮质激素、生物制剂等,但长期使用不良反应大,若治疗不及时,严重者将导致关节畸形和功能障碍,给患者的生活带来了极大痛苦。随着现代研究深入,中医治疗RA积累了丰富的临床经验,起到良好的效果。RA在中医归属于“痹病”范畴,常见证型有风寒湿痹、湿热痹阻、风湿热痹、痰瘀痹阻等,其中风寒湿痹型最为常见。中医各派医家治疗风寒湿痹型RA源远流长,留下了许多疗效显著的经方及治疗经验。中医治疗风寒湿痹型RA有其独特的治疗方法。常见中医外治法有温针灸、艾灸、针刺结合艾灸、火刃针、小针刀、中药蜡疗法、中药熏洗法、中药外敷、穴位贴敷等;中医内治法有经方与自拟方、中成药等。中医内治法与外治法相结合可发挥协同作用,提高临床疗效,更好地缓解临床症状、降低疾病活动度、减少不良反应。文章收集近十年中医治疗风寒湿痹型RA的文献进行汇总分析,探讨其独具特色的中医治法,为有效治疗本病提供理论基础,以期为临床实践提供借鉴和参考。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 风寒湿痹型 中医治疗 研究进展
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延龄草总皂苷对2-VO模型大鼠认知功能及神经血管单元的作用
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作者 杨丹 杨丽君 +3 位作者 唐鲜娥 王刚 段壬泽 陈显兵 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期316-322,共7页
目的观察延龄草总皂苷(TST)对大鼠的血管性认知障碍及其神经血管单元(NVU)和神经环路完整性的作用。方法将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、TST组及多奈哌齐组,每组12只。除假手术组外,其他3组大鼠均采用双侧颈总动脉结扎(2-VO... 目的观察延龄草总皂苷(TST)对大鼠的血管性认知障碍及其神经血管单元(NVU)和神经环路完整性的作用。方法将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、TST组及多奈哌齐组,每组12只。除假手术组外,其他3组大鼠均采用双侧颈总动脉结扎(2-VO)法建立脑缺血后认知障碍模型。造模后,TST组给予TST100mg/kg灌胃,多奈哌齐组给予盐酸多奈哌齐0.45mg/kg灌胃,对照组及模型组给予同体积的生理盐水,1次/d,连续28d。采用水迷宫实验检测各组大鼠的认知功能;HE、尼氏染色观察大鼠脑组织病理改变;免疫组织化学染色观察大鼠海马突触核蛋白(SYN)的表达情况;高尔基染色观察海马神经元树突棘的变化;Westernblotting检测各组大鼠海马组织白细胞介素(IL)-1β、IL-10、血管内皮生长因子A(VEGFA)、突触后致密蛋白95(PSD95)和生长关联蛋白43(GAP43)表达水平。结果水迷宫实验结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数和在目标象限的停留时间比均减少(P<0.05);与模型组比较,TST组和多奈哌齐组逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数和在目标象限的停留时间比增多(P<0.05)。与假手术组比较,模型组海马CA1区神经元、尼氏小体、树突棘数量和SYN表达量减少(P<0.05);与模型组比较,TST组和多奈哌齐组神经元、尼氏小体、树突棘数量和SYN表达量增多(P<0.05)。Westernblotting结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马组织IL-1β、VEGFA表达水平升高(P<0.05),PSD95、GAP43表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,TST组和多奈哌齐组IL-1β表达水平均降低(P<0.05),VEGFA、IL-10、GAP43表达水平均升高(P<0.05)。结论TST可能通过促进突触可塑性和NVU重塑减轻2-VO模型大鼠的认知障碍,有望用于卒中的治疗。 展开更多
关键词 延龄草总皂苷 2-VO 认知功能 神经血管单元 卒中
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酸枣仁汤通过抑制神经炎症和改善神经营养水平促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生 被引量:4
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作者 龙清华 赵宾宾 +2 位作者 丁莉 谭爱华 王平 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2021年第9期3014-3022,共9页
目的观察酸枣仁汤对APP/PS1痴呆小鼠海马促炎性因子和神经营养因子的影响,并探讨其改善神经发生的可能机制。方法32只APP/PS1小鼠随机分为模型组(Model,20 mL·kg^(-1))、多奈哌齐组(Donepezil,0.92 mg· kg^(-1))、酸枣仁汤低... 目的观察酸枣仁汤对APP/PS1痴呆小鼠海马促炎性因子和神经营养因子的影响,并探讨其改善神经发生的可能机制。方法32只APP/PS1小鼠随机分为模型组(Model,20 mL·kg^(-1))、多奈哌齐组(Donepezil,0.92 mg· kg^(-1))、酸枣仁汤低剂量组(L-SZRD,12.96 g·kg^(-1))和酸枣仁汤高剂量组(H-SZRD,25.92 g·kg^(-1)),8只相同月龄和相同品系的C57BL/6JNju小鼠设为空白组(Control,20 mL·kg^(-1))。灌胃30天后,采用HE染色观察小鼠海马病理形态变化,采用免疫荧光(IF)对小鼠海马中5-溴脱氧尿苷(BrdU)、肾上腺皮质激素(DCX)、神经元核抗原(NeuN)进行标记,采用免疫印迹(Western blot)检测各组小鼠海马中肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、c-fos、表皮细胞生长因子(Epidermal growth factor,EGF)、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)、脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)的蛋白表达水平。结果Control组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列整齐,细胞染色均匀,细胞数量较多且细胞连接紧密。Model组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列欠整齐,细胞核固缩明显,细胞数量明显减少。Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马CA3区和DG区细胞排列稍整齐,细胞核固缩减少,细胞数量有所增加。与Control组比较,Model组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数明显减少(P<0.01),与Model组比较,Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马DG区BrdU、DCX、NeuN标记的阳性细胞数增加(P<0.01,P<0.05)。与Control组比较,Model组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平明显升高(P<0.01),而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平明显下降(P<0.01),与Model组比较,Donepezil组、L-SZRD组和H-SZRD组小鼠海马中TNF-α、IL-1β、IL-6、c-fos的蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05),而EGF、VEGF、BDNF的蛋白表达水平升高(P<0.01,P<0.05)。结论酸枣仁汤可通过抑制神经炎症和改善神经营养促进APP/PS1痴呆小鼠海马神经发生。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 酸枣仁汤 神经发生 神经炎症 神经营养
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基于PI3K/AKT/mTOR通路的三百棒促进脂多糖诱导的RAW 264.7细胞自噬并抑制炎症 被引量:6
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作者 张宗星 江露 +5 位作者 刘道忠 侯孜明 田梦杰 陶柏楠 冯佳 袁林 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2023年第4期573-583,共11页
三百棒来源于芸香科植物飞龙掌血Toddalia asiatica(L.)Lam的根,是一种天然土家族中草药,具有抗炎、抗风湿、抗肿瘤、抗微生物等药理活性。其毒副作用小,疗效显著的特点使之成为当前研究热点。许多天然产物已被证明可通过靶向PI3K/AKT/m... 三百棒来源于芸香科植物飞龙掌血Toddalia asiatica(L.)Lam的根,是一种天然土家族中草药,具有抗炎、抗风湿、抗肿瘤、抗微生物等药理活性。其毒副作用小,疗效显著的特点使之成为当前研究热点。许多天然产物已被证明可通过靶向PI3K/AKT/mTOR介导的自噬来抑制炎症及自身免疫性疾病,本项研究通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路来研究三百棒醇提物(Toddalia asiatica alcohol extract,TAAE)对自噬的影响,用脂多糖(LPS)诱导单核巨噬细胞(RAW 264.7)建立炎症模型,通过细胞毒性检测试剂盒检测TAAE对细胞活力的影响,并筛选出药物的浓度及干预时间,透射电镜和单丹磺酰尸胺染色检测巨噬细胞的生物学功能,酶联免疫吸附法检测上清液中相关炎症因子水平,Western blot检测自噬和通路相关蛋白的表达水平;并采用自噬早期抑制剂(3-MA)和通路PI3K激动剂(740Y-P)进一步验证自噬对炎症和信号通路的影响。实验结果表明TAAE可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进自噬泡的形成、自噬体溶酶体融合和降解,降低LPS处理的RAW 264.7细胞中炎性细胞因子的表达和分泌。总体而言,本研究结果为三百棒的抗炎机制的研究提供了新的线索,并为临床更好的应用三百棒治疗炎症性疾病提供理论依据。 展开更多
关键词 三百棒 PI3K/AKT/mTOR通路 自噬 炎症 RAW 264.7细胞
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基于JAK2/STAT3信号通路探究鬼箭羽醇提物抗CCl_(4)诱导C57BL/6J小鼠肝纤维化作用机制 被引量:1
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作者 王咏兰 陶柏楠 +3 位作者 陈明环 曾华华 马敏 黄德斌 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期875-881,共7页
目的基于JAK2/STAT3信号通路探究鬼箭羽醇提物抗CCl_(4)诱导C57BL/6J小鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)作用机制。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、鬼箭羽低剂量组(EAL)、鬼箭羽中剂量组(EAM)、鬼箭羽高剂量组(EAH)、... 目的基于JAK2/STAT3信号通路探究鬼箭羽醇提物抗CCl_(4)诱导C57BL/6J小鼠肝纤维化(hepatic fibrosis,HF)作用机制。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、鬼箭羽低剂量组(EAL)、鬼箭羽中剂量组(EAM)、鬼箭羽高剂量组(EAH)、水飞蓟宾(Silybin)阳性治疗组,每组10只。除正常组外,其余小鼠腹腔注射25%CCl_(4)花生油液1.6 mL·kg^(-1)诱导HF模型。同时,阳性治疗组给予12.6 mg·kg^(-1)的水飞蓟宾,EAL、EAM、EAH分别给予鬼箭羽醇提物72、140、280 mg·kg^(-1),每日1次,连续6周。当第6周治疗结束,空腹称质量,采血取肝,观察肝脏外形,计算肝脏指数,检测小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-6、IL-1β。检测肝组织α-SMA、Collagen-Ⅰ和JAK2/STAT3信号通路相关蛋白(JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3)表达。结果与模型组相比,EAM和EAH明显降低CCl_(4)导致的肝脏指数增加,抑制血清ALT、AST、α-SMA、collagen I升高;鬼箭羽干预组的肝形态结构、细胞炎性浸润、纤维变化及胶原沉积呈剂量依赖性优于模型组;EAM、EAH血清中TNF-α、IL-6和IL-1β表达明显低于模型组(P<0.05),肝组织中与JAK2/STAT3信号通路有关的JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达也明显低于模型组(P<0.05)。结论鬼箭羽醇提物具有抗CCl_(4)诱导小鼠HF作用,其机制可能与JAK2/STAT3信号通路的调控有关。 展开更多
关键词 鬼箭羽醇提物 肝纤维化 TNF-α JAK2 STAT3 IL-6
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竹节参多糖通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路对急性肝损伤大鼠的影响 被引量:1
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作者 宋添力 唐浪 +3 位作者 王一民 吴广阳 刘绪 黄胜 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2472-2479,2534,共9页
以竹节参(Panax japonicus)为原料,经水提醇沉法制备了竹节参多糖(PSPJ),通过观察和记录大鼠一般情况及肝脏指数(肝脏质量/体质量)探讨了PSPJ通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路干预CCl4诱导的急性肝损伤(ALI)大鼠的作用机制;采用苏木素-伊红(... 以竹节参(Panax japonicus)为原料,经水提醇沉法制备了竹节参多糖(PSPJ),通过观察和记录大鼠一般情况及肝脏指数(肝脏质量/体质量)探讨了PSPJ通过PI3K/AKT/NF-κB信号通路干预CCl4诱导的急性肝损伤(ALI)大鼠的作用机制;采用苏木素-伊红(H&E)染色法评价了PSPJ对肝组织病理变化的改善作用;采用免疫组织化学(IHC)染色检测了肝脏组织NF-κB的表达情况;通过蛋白免疫印迹(Westernblot)检测考察了PSPJ对ALI大鼠肝脏PI3K/AKT/NF-κB信号通路相关蛋白及炎症指标的表达水平。结果表明,与空白对照组相比,模型组的体质量、肝脏质量和肝脏指数均显著上升(P<0.05,表示差异有统计学意义,下同),模型组出现大量肝组织炎症浸润,用药组肝脏病理变化明显缓解;与空白对照组比较,模型组大鼠肝组织p-PI3K蛋白表达显著下降(P<0.01),PI3K、p-AKT、p-NF-κB、IL-1β蛋白表达显著升高(P<0.05);药物组p-PI3K蛋白表达显著上升(P<0.05),p-AKT、IL-1β蛋白表达显著下降(分别为P<0.01、P<0.05)。PSPJ通过PI3K/AKT/NF-κB通路信号中的相关关键蛋白表达减轻了CCl4诱导的大鼠ALI症状。 展开更多
关键词 竹节参多糖 PI3K/AKT/NF-κB 急性肝损伤 抗氧化 抗炎 中药现代化技术
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基于超高效液相色谱-串联高分辨质谱的血清代谢组学用于探索区分结直肠腺瘤和结直肠癌的生物标志物 被引量:1
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作者 杨珊伊 陈鸿炜 +5 位作者 周海琳 朱一帆 张嘉豪 王旋成 黄宗声 张淇淞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期173-180,共8页
结直肠腺瘤(Colorectal adenoma,CA)发展成为结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一个相对漫长而隐匿的过程,然而,目前仍缺乏微创且可靠的生物标志物来区分CA和CRC患者。该文采用超高效液相色谱-串联高分辨质谱(UHPLC-HRMS)技术结合多元... 结直肠腺瘤(Colorectal adenoma,CA)发展成为结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是一个相对漫长而隐匿的过程,然而,目前仍缺乏微创且可靠的生物标志物来区分CA和CRC患者。该文采用超高效液相色谱-串联高分辨质谱(UHPLC-HRMS)技术结合多元统计分析方法对64例CA患者和84例CRC患者的血清样本进行代谢组学比较分析,结合P<0.05和倍数变化>1.50或<0.67筛选两者的血清差异代谢物,并通过受试者工作特征曲线(ROC)分析考察其对CA和CRC的鉴别能力。同时利用差异代谢物的通路及富集分析初步探索CA癌变的代谢机制。结果表明,两组的血清代谢谱存在差异,据此筛选并鉴定获得66种组间差异代谢物,主要涉及不饱和脂肪酸的生物合成、嘌呤代谢、亚油酸代谢,提示其可能与CA癌变有关。此外,PC 36∶3、腺嘌呤、鞘氨醇、PC 18∶0、PC 20∶4标志物组合的ROC曲线下面积为0.941,对CA和CRC表现出良好的判别效能,可为CRC的临床早期预防提供有价值的参考。 展开更多
关键词 结直肠癌 结直肠腺瘤 超高效液相色谱-串联高分辨质谱(UHPLC-HRMS) 血清代谢组学 生物标志物
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中医从五脏论治阿尔茨海默病的研究进展 被引量:4
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作者 谢喆尧 张希 +2 位作者 杨浩辰 张婧凡 曾楚华 《湖北民族大学学报(医学版)》 2023年第1期76-80,共5页
阿尔茨海默病(AD)是一种以记忆力持续减退的神经退行性疾病,属于中医神志病的范畴。现代医学认为AD的病位在脑,故治疗方案多从脑着手,而中医学建立了人体以五脏为中心的整体观念,认为五脏皆藏神,AD的发生不局限于脑。基于此,中医学论治A... 阿尔茨海默病(AD)是一种以记忆力持续减退的神经退行性疾病,属于中医神志病的范畴。现代医学认为AD的病位在脑,故治疗方案多从脑着手,而中医学建立了人体以五脏为中心的整体观念,认为五脏皆藏神,AD的发生不局限于脑。基于此,中医学论治AD多从五脏入手,并取得了一定的疗效。本文通过收集和整理诸多学者从五脏论治AD的临床经验和实验成果,以期为临床防治AD提供参考。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 五脏 论治 文献综述
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柚皮纤维调节高脂饮食小鼠血脂与肥胖及其与肠道菌群的关系
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作者 张倩倩 袁林 +5 位作者 王雪儿 韩婕 王学强 张睿 张涵鸣 莫开菊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第19期131-139,共9页
用柚皮纤维原料及其提取物不溶性膳食纤维、果胶结合D12492高脂饲料饲喂C57BL/6小鼠67 d,观察小鼠摄食量、体质量、血脂生化指标、脏器指数及肠道菌群变化,探究膳食纤维预防肥胖及其调节肠道菌群的效果。结果表明:与肥胖对照组(obesity ... 用柚皮纤维原料及其提取物不溶性膳食纤维、果胶结合D12492高脂饲料饲喂C57BL/6小鼠67 d,观察小鼠摄食量、体质量、血脂生化指标、脏器指数及肠道菌群变化,探究膳食纤维预防肥胖及其调节肠道菌群的效果。结果表明:与肥胖对照组(obesity control group,OCG)相比,不溶性膳食纤维组(insoluble dietary fiber group,IDF)小鼠体质量、血清总胆固醇(total cholesterol,TC)及低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)浓度、附睾脂肪系数、Lee’s指数分别降低4.9%、8.3%、14.29%、0.44%、2.54%;果胶组(soluble dietary fiber group,SDF)分别降低5.1%、11.4%、21.21%、0.60%、2.47%;原料组(raw material group,RMG)分别升高1.3%、7.4%、12.5%、0.96%、1.27%;而IDF、SDF、RMG小鼠血清高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)浓度分别提高0.52%、0.78%、5.44%。补充柚皮膳食纤维提高了小鼠肠道中拟杆菌门、毛螺菌属相对丰度,降低了厚壁菌门、脱硫菌门、脱铁杆菌相对丰度。结论:柚皮不溶性膳食纤维、果胶对预防肥胖和降低血脂有显著效果。其作用效果并非通过抑制摄食量实现,很可能与其增加小鼠肠道中拟杆菌门、毛螺菌属等相对丰度,降低脱硫菌门、脱铁杆菌等相对丰度有关。厚壁菌门相对丰度的升高与体质量变化无显著相关性,但与HDL-C浓度呈显著正相关,与LDL-C浓度呈显著负相关,有利于控制血脂;拟杆菌门相对丰度的升高与体质量及TC、HDL-C浓度呈显著负相关,与LDL-C浓度呈显著正相关,有利于控制体质量,但不利于控制血脂,因此拟杆菌门与厚壁菌门对体质量和血脂的影响还需要深入研究。未经提取纯化的柚皮纤维能增加小鼠摄食量,使其体质量和LDL-C浓度增加,但同时能显著增加HDL-C浓度,因此其对体质量和血脂影响的利弊还需要进一步确认。 展开更多
关键词 柚皮 膳食纤维 果胶 肠道菌群 肥胖
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竹节参总皂苷中10种活性成分在正常、肥胖大鼠体内药动学比较
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作者 彭国爽 曾迪 +6 位作者 周昌园 郭玉鸿 张方 杨鑫蓥 郑蓉 秦燕华 杨宝 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期702-708,共7页
目的比较竹节参总皂苷中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rb1、Rg2、Rd,竹节参皂苷Ⅴ、Ⅳ、Ⅳa,拟人参皂苷RT1在正常、肥胖大鼠体内药动学。方法大鼠随机分为正常组和肥胖组,灌胃给予总皂苷0.4%CMC-Na混悬液(0.8 g/kg),于0、0.08、0.25、0.5、0.75... 目的比较竹节参总皂苷中人参皂苷Re、Rg1、Rf、Rb1、Rg2、Rd,竹节参皂苷Ⅴ、Ⅳ、Ⅳa,拟人参皂苷RT1在正常、肥胖大鼠体内药动学。方法大鼠随机分为正常组和肥胖组,灌胃给予总皂苷0.4%CMC-Na混悬液(0.8 g/kg),于0、0.08、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、6、8、12、24、48 h采血,UPLC-MS法测定各活性成分血药浓度,计算主要药动学参数。结果各活性成分C_(max)、AUC_(0~t)与其在总皂苷中的含量呈正相关。竹节参皂苷Ⅴ、Ⅳ、Ⅳa为体内主要暴露成分,t_(1/2)、MRT_(0~t)更长。与正常组比较,肥胖组各活性成分C_(max)(除人参皂苷Rg1)、AUC_(0~t)(除人参皂苷Re、Rg1和拟人参皂苷RT1)降低,t_(1/2)、MRT_(0~t)、T_(max)无明显变化。结论肥胖可影响竹节参总皂苷中部分活性成分的体内药动学,竹节参皂苷Ⅴ、Ⅳ、Ⅳa可能是竹节参总皂苷改善肥胖的关键组分。 展开更多
关键词 竹节参总皂苷 活性成分 肥胖 体内药动学 UPLC-MS
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柔肝降酶方含药血清抑制人肝星状细胞的活化及自噬
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作者 陶柏楠 王咏兰 +5 位作者 江露 张宗星 刘道忠 万星 黄德斌 袁林 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第33期5334-5341,共8页
背景:自噬在肝纤维化中发挥重要作用,可以通过诱导肝星状细胞活化促进肝纤维化的进程。前期研究表明,柔肝降酶方具有保护肝功能、抗炎、抗氧化应激反应等作用,其是否通过自噬抗肝纤维化的作用机制尚未阐明。目的:探讨柔肝降酶方含药血... 背景:自噬在肝纤维化中发挥重要作用,可以通过诱导肝星状细胞活化促进肝纤维化的进程。前期研究表明,柔肝降酶方具有保护肝功能、抗炎、抗氧化应激反应等作用,其是否通过自噬抗肝纤维化的作用机制尚未阐明。目的:探讨柔肝降酶方含药血清对脂多糖诱导的人肝星状细胞活化及自噬的影响及其潜在的作用机制。方法:用脂多糖建立人肝星状细胞活化模型,分成不同的处理组:(1)空白组:人肝星状细胞+空白血清;(2)模型组:人肝星状细胞+空白血清+脂多糖;(3)柔肝降酶方低、中、高剂量含药血清组:人肝星状细胞+低、中、高剂量柔肝降酶方含药血清+脂多糖;(4)柔肝降酶方高剂量含药血清联合雷帕霉素组:高剂量组基础上+雷帕霉素;(5)柔肝降酶方高剂量含药血清联合PI3K抑制剂组:高剂量组基础上+LY294002。CCK-8法观察细胞增殖情况;采用单丹磺酰尸胺染色法观察细胞自噬情况;WesternBlot检测细胞通路蛋白(PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT、mTOR、P-mTOR)、自噬相关蛋白(P62、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ)、人肝星状细胞活化标志蛋白(α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原纤维)表达水平的影响。结果与结论:(1)柔肝降酶方含药血清能够降低人肝星状细胞的增殖活性,下调Ⅰ型胶原纤维、α-平滑肌肌动蛋白的蛋白表达,上调自噬P62蛋白的表达,降低LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白的表达,且呈现剂量依赖性;(2)MDC荧光染色结果显示,柔肝降酶方含药血清可使细胞绿色斑点荧光强度降低;(3)加入自噬激动剂雷帕霉素后,P62蛋白表达降低,LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达升高;(4)经过柔肝降酶方含药血清处理后,PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化水平升高,呈剂量依赖性,这种作用能被PI3K抑制剂LY294002减弱;(5)提示柔肝降酶方含药血清可能通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制自噬,减少脂多糖诱导的人肝星状细胞活化。 展开更多
关键词 柔肝降酶方 细胞自噬 Akt mTOR LC3-Ⅱ 人肝星状细胞
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