大黄素对人胃癌BGC-823细胞体外增殖和迁移的影响

目的探讨大黄素对人胃癌BGC-823细胞增殖和迁移的影响。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定不同浓度大黄素对体外培养人胃癌BGC-823细胞增殖的影响;采用流式细胞术测定大黄素对人胃癌BGC-823细胞的细胞周期影响;采用划痕损伤实验测定大黄素对人胃癌BGC-823细胞迁移的影响。结果 MTT法显示,大黄素能抑制人胃癌BGC-823细胞増殖,呈现浓度依赖性;流式细胞术显示,人胃癌BGC-823细胞的细胞周期主要停滞在G0/G1期;划痕损伤实验表明,人胃癌BGC-823细胞迁移受到明显的抑制。结论大黄素对人胃癌BGC-823细胞的增殖和迁移具有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性,并可使人胃癌BGC-823细胞增殖周期停滞于G0/G1期。

shRNA抑制SGK1基因表达对人乳腺癌细胞系生物学特性的影响

目的建立稳定抑制血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)表达的人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,观察SGK1基因沉默对人乳腺癌细胞生物学特性的影响。方法构建针对SGK1的shRNA干扰质粒pGen-3-siSGK1和阴性对照质粒pGen-3-control。转染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经G418筛选得到稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;实时定量PCR、免疫荧光以及Western blotting检测shRNA干扰组、阴性对照组及未转染组细胞中SGK1的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞体外生长能力;体外浸润实验、细胞迁移实验检测各组癌细胞的侵袭和转移。结果成功构建针对SGK1基因的shRNA干扰质粒,建立了稳定抑制SGK1表达的乳腺癌细胞模型;与阴性对照组和未转染组相比,肿瘤细胞中SGK1的表达水平显著降低(P<0.01);SGK1基因沉默后,人乳腺癌细胞的生长能力、浸润和迁移能力均明显降低(P<0.05)。实验中还发现抑制SGK1基因表达之后,β-catenin的含量也出现明显下降。结论抑制SGK1基因的表达可以显著抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长,并降低其侵袭转移的能力,其中β-catenin参与了SGK1基因的抑制功能。