医学检验技术专业本科生毕业实习的教学探索与实践

为适应医学检验技术专业的调整和改革,亟须建立基于新专业目录及新培养目标的实习教学体系,科室以培养目标和社会需求为导向,根据前期经验、调查研究及学习借鉴,结合实习教学与检验科具体工作,自2018年起探索实施医学检验技术专业本科生毕业实习的教学体系,通过优化教学内容、重组教学团队、建立评价与考核体系,提出并设计了基于岗位的“一对一”带教、毕业设计(论文)导师制等实习教学方式,构建了以实习项目为基础的实习教学方案。为培养适应未来检验医学发展需求的高素质、创新性人才提供了新的思路与经验,为不断完善并规范化医学检验技术专业本科生实习教学体系奠定了基础。

标本溶血对临床检验项目的影响

标本溶血是临床检验质量控制中对检验结果最常见的一种干扰因素,也是实验室拒收的主要原因之一。因此,识别并合理处理溶血标本是临床实验室的重要工作,由于其干扰机制并不单一,往往是同时发挥着作用,解决方案应根据干扰机制的侧重点不同采取不同的措施,但是没有一种方法可以完全消除干扰,避免溶血干扰最根本的方法是标本的采集、运输、分离、保存等环节的规范化,以及对标本采集人员、转运人员进行规范化培训。

JCI标准下检验危急值报告的实践与应用

目的 了解JCI标准实施过程中,检验危急值报告的实践与应用,为危急值报告的持续改进提供科学依据。方法采用信息化方式对检验危急值进行报告和追踪,从实验室信息系统中筛选出2015年1~6月的危急值项目数据,计算出危急值确认时间、处理时间、确认率、处理率等指标。结果 危急值发生率0.694%,主要分布于血小板计数（PLT）、白细胞计数（WBC）等项目,临床科室分布主要以血液内科、新生儿科、肾内科等科室为主。危急值项目确认时间中位数,红细胞计数（RBC）最长,需26分钟,血液酸碱度（PH）时间最短,需5分钟。红细胞计数（RBC）、凝血酶原时间（PT）的15分钟内确认率确认率低于80%,危急值项目60分钟内处理率,红细胞计数（RBC）、白细胞计数（WBC）、钠（NA）、葡萄糖（GLU）低于80%,临床科室中产科危急值确认率低于80%,产科、老年病科、乳甲胰腺外科的危急值处理率低于80%。结论 JCI标准实施过程中,信息化方式可以提高检验危急值的报告和追踪的效率;检验危急值报告的持续改进、需要多部门协调合作;运用质量管理工具进行目标数据监测,根据数据监测的结果及时进行原因分析,是促进检验与临床的有效沟通,保障服务质量和患者安全的有效方法。

双色谱柱/双检测器顶空气相色谱法检验全血乙醇的性能评估

为评估双色谱柱/双检测器顶空气相色谱法对全血乙醇的检验性能,采用顶空进样器进样,以叔丁醇为内标,通过2根色谱柱和2个氢火焰离子化检测器对样品进行分析,以保留时间定性,以内标法定量,展开了比对实验、精密度验证以及回收试验。分析发现,前检测器和后检测器中乙醇和叔丁醇的保留时间相对偏差小于2%,变异系数小于0.15%,满足行业标准。其定量检测的线性范围为1~200 mg/100 mL,决定系数R^(2)分别为0.9995和0.9994。2套检测器在高、中、低浓度时的相对偏倚均小于10%,批内变异系数和实验室内变异系数均小于5%,平均回收率为99.47%~108.10%,表明双色谱柱/双检测器顶空气相色谱法检验全血乙醇结果稳定、定量准确,能满足实验室需要。

外周血HBP、SAA和IG%在急性胰腺炎中的诊断价值

目的探讨外周血肝素结合蛋白(HBP)、淀粉样蛋白A(SAA)和未成熟粒细胞百分率(IG%)在急性胰腺炎(AP)中的诊断价值,以期为临床诊疗提供参考依据。方法选取2021年6月至2023年8月该院收治的121例AP患者作为研究对象,根据AP的分级标准将其分为轻症AP组(MAP组,63例)、中重症AP组(MSAP组,36例)和重症AP组(SAP组,22例);另选取同期在该院体检的80例健康体检者作为对照组。检测并比较各组研究对象临床资料及外周血HBP、SAA水平和IG%。采用Spearman相关分析HBP、SAA水平和IG%与AP病情严重程度的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估外周血HBP、SAA和IG%对AP的诊断价值。结果4组性别、年龄、发病时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。HBP、SAA水平为SAP组>MSAP组>MAP组>对照组,且任意两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。SAP组和MSAP组IG%高于MAP组和对照组,且SAP组IG%高于MSAP组,差异均有统计学意义(P<0.05),但MAP组与对照组IG%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关分析结果显示,HBP、SAA水平和IG%与AP病情严重程度均呈正相关(r=0.762、0.823、0.724,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血HBP、SAA、IG%单独及HBP+SAA和HBP+SAA+IG%联合诊断AP的曲线下面积(AUC)分别为0.700(95%CI:0.627~0.773)、0.787(95%CI:0.726~0.848)、0.460(95%CI:0.378~0.542)、0.850(95%CI:0.792~0.907)和0.860(95%CI:0.811~0.908)。结论外周血HBP和SAA联合检测对AP有较高的诊断价值,IG%单独诊断AP的价值不高;外周血HBP、SAA和IG%联合检测有助于临床评估AP病情严重程度,尤其是对预测MSAP和SAP有重要价值。

三阴性乳腺癌患者血清组织多肽抗原和糖类抗原的表达及其对复发的预测价值

目的探讨三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)患者血清组织多肽抗原(tissue polypeptide antigen,TPA)与糖类抗原(carbohydrate antigen)CA15-3表达的相关性及其对术后复发事件的预测价值。方法对组织多肽抗原TPA和糖类抗原CA15-3在三阴性乳腺癌和非三阴乳腺癌患者血清中的表达水平进行组间比较。三阴性乳腺癌患者血清TPA、CA15-3表达的相关性及临床意义进行分析。依据TNBC患者稳定期与术后复发患者检测结果,分析TPA、CA15-3表达对短期复发事件的影响及术后短期复发事件的预测效能。结果三阴性乳腺癌与非三阴乳腺癌患者血清TPA、CA15-3表达水平及TNBC早期、中期患者组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性分析,三阴性乳腺癌患者血清TPA、CA15-3表达相关系数在0.01的水平上呈显著正相关。TNBC患者术后复发事件与稳定期组患者血清TPA、CA15-3表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.01)。三阴性乳腺癌患者血清TPA、CA15-3表达水平的ROC曲线分析结果显示,预测效能敏感度、特异度有统计学意义。结论组织多肽抗原TPA与糖类抗原CA15-3可能是三阴性乳腺癌患者预后的预测靶基因,作为复发事件的生物学观察指标,具有重要的临床意义。

免疫细胞的动态变化预测脓毒症相关急性肾损伤不良结局

脓毒症发病机制复杂,全身炎症反应和免疫抑制是其中两个重要的发展阶段。文章研究了脓毒血症患者3天内免疫细胞计数(ICCs)变化与脓毒症患者急性肾损伤(AKI)持续时间和死亡风险的关系。回顾性研究了166例脓毒症患者,记录入院后第1、2、3天(D1、D2、D3)外周血中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞的计数,并对短暂性AKI和持续性AKI、存活组和死亡组进行相应的统计分析。发现持续性AKI组第3天的中性粒细胞绝对计数(ANC)较高(P=0.007),持续性AKI组或死亡组的淋巴细胞绝对计数(ALC)较低,且呈下降趋势,第2天显著低于第1天(P=0.013、P=0.004),第3天显著低于第1天(P<0.001、P=0.001)。多因素logistic回归分析显示,ANC(D3/D2)(OR=2.39,95%CI:1.03~5.53,P=0.042)是持续性AKI的独立危险因素,ALC(D3/D1)是持续性AKI和死亡的独立危险因素(OR=0.43,95%CI:0.09~2.01,P=0.036;OR=0.09,95%CI:0.01~0.90,P=0.041)。ROC曲线显示持续性AKI组的ANC(D3/D2)曲线下面积AUC为0.763,死亡组的ALC(D3/D1)曲线下面积AUC为0.778。脓毒症患者早期外周血ICCs的动态改变与短暂性和持续性AKI以及死亡相关。

CYP2C19基因多态性与丙戊酸血药浓度相关性及个体化用药研究

目的观察分析CYP2C19基因多态性与癫痫患者丙戊酸血药浓度的个体差异,并为临床个体化用药提供参考依据。方法选取2015年1月至2016年12月于该院就诊的癫痫患者148例,采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测148例患者的CYP2C19基因分型,同时给予丙戊酸治疗,分析CYP2C19基因多态性与丙戊酸血药浓度的相关性。结果不同CYP2C19基因型的癫痫患者丙戊酸血药浓度存在很大的个体差异,其中148例癫痫患者等位基因和基因型分布频率比较,差异无统计学意义(P>0.05);CYP2C19*2位点的AA基因型服药2、4、8h后丙戊酸血药浓度水平显著高于CYP2C19*2位点GG基因型,差异有统计学意义(P<0.05);CYP2C19*3位点AA基因型服药8h后丙戊酸血药浓度水平显著高于8h后丙戊酸血药浓度水平CYP2C19*3位点GG基因型,差异有统计学意义(P<0.05);其他基因型丙戊酸血药浓度水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论癫痫患者的CYP2C19基因具有多态性,且与服用丙戊酸治疗的癫痫患者血液浓度具有相关性。因此,在采用丙戊酸治疗癫痫患者时,可检测患者CYP2C19基因分型,以指导癫痫患者的临床个体化治疗。

亮氨酸氨基肽酶和甲胎蛋白联合检测肝癌的临床价值

目的探讨血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)、甲胎蛋白(AFP)在肝癌诊断和介入治疗中的临床应用价值。方法对2011年6月至2013年8月在本院体检健康者102例和肝癌患者78例采用罗氏P800全自动生化分析仪测定其血清LAP、AFP水平。结果肝癌组血清LAP、AFP显著高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两种标志物的联合检测阳性率达91.0%,较LAP、AFP单项检测时有明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LAP、AFP在肝癌的诊断和介入治疗的效果监测方面有一定应用价值,联合检测可提高肝癌的阳性诊断率。

抗CCP抗体、RF与CRP联合检测在类风湿关节炎诊断中的意义

目的探讨血清中抗环胍氨酸肽抗体(A-CCP)、类风湿因子(RF)与C反应蛋白(CRP)联合检测在类风湿关节炎(RA)早期诊断中的意义。方法选取2016年10月至2018年5月在我院就诊的RA患者110例(RA组),同时选取其他风湿病患者97例(非RA组),健康体检者95例(健康组)的临床样本为试验材料。采用北京九强试剂定量检测A-CCP、RF及CRP水平,比较3种指标在类风湿关节炎(RA)早期诊断中的价值。结果RA组A-CCP、RF及CRP的阳性率显著高于非RA组及健康组,三者联合检测的灵敏性和特异性与单独检测时比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抗CCP抗体、RF和CRP三者联合检测可大大提高早期诊断RA的灵敏度和特异性,对早期诊断RA具有重要意义。

1503例9种呼吸道感染病原体检测结果分析

目的探讨婴幼儿呼吸道感染的病原体流行情况。方法采用间接免疫荧光法(IFA)检测1 503例住院婴幼儿患者血清中嗜肺军团菌血清Ⅰ型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型等9种呼吸道感染病原体的IgM抗体。结果在1 503例样本中,共检测出IgM抗体阳性病例499例,阳性检出率为33.20%,其中肺炎支原体387例(25.75%),肺炎支原体合并呼吸道合胞病毒5例(0.33%),肺炎支原体合并腺病毒4例(0.27%),单纯呼吸道合胞病毒34例(2.26%),副流感病毒1、2和3型30例(2.00%),单纯腺病毒19例(1.26%)、乙型流感病毒13例(0.86%)和甲型流感病毒7例(0.47%),未检出Q热立克次体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌血清Ⅰ型。结论采用间接免疫荧光法快速检测人血清中9种呼吸道感染主要病原体的IgM抗体,可为临床的诊断和治疗提供重要的参考依据,避免抗生素的滥用。

糖化白蛋白、糖化血红蛋白与2型糖尿病早期肾损伤的关系

目的分析糖化白蛋白(GA)、糖化血红蛋白(Hb A1C)与2型糖尿病患者(T2DM)肾损伤的关系。方法将96例T2DM患者按是否合并糖尿病肾病(DN)分为早期DN组(n=54)与非DN组(n=42),选取同期体检的40例正常健康人作为对照组。各组均抽取清晨空腹静脉血、收集晨尿标本,测定GA、Hb A1C、尿微量白蛋白(U-m ALB)、尿液转铁蛋白(U-TRF)、尿液α1微球蛋白(U-α1MG)、尿液IGg(UIg G)、血清肌酐(Cr)、血清尿素(UREA)等指标,分析GA及Hb A1C与糖尿病并发肾损伤的相关性。结果非DN组、早期DN组GA、Hb A1C均高于对照组(P<0.05);早期DN组GA、Hb A1C水平高于非DN组(P<0.05)。Logistic回归分析显示GA、Hb A1C、U-m ALB、U-TRF是早期DN的独立影响因素(P<0.05),且Hb A1C的相关度(OR值=1.551,P<0.05)高于GA(OR值=1.224,P<0.05)。通过ROC曲线分析,GA和Hb A1C对糖尿病患者DN诊断的最佳切点为18.5%(敏感度0.854,特异度0.827)和7.7%(敏感度0.976,特异度0.613),而当GA与Hb A1C联合检测时,则具有更高的ROC曲线下面积(0.976)。结论 GA、Hb A1C、U-m ALB、UTRF等参数均与糖尿病早期肾损伤有密切关联,且GA与Hb A1C均为影响早期DN进展的独立危险因素,而当GA与Hb A1C联合检测时,其对糖尿病早期肾损伤的预测和诊断具有重要的参考价值。

Plackett-Burman设计与响应面法优化毕赤酵母产重组抗菌肽LL-37发酵培养基

目的通过优化毕赤酵母产重组抗菌肽LL-37的培养基组成,以最大程度提高重组蛋白产率。方法采用PlackettBurman设计法对培养基中相关影响因素的效应进行评价;然后进行最陡爬坡实验逼近最佳响应面(RSM)区域;最后通过中心组合设计RSM实验建立二次回归模型以确定最佳培养基配方。结果经优化后的培养基发酵产重组蛋白水平相较于初始培养基提高了约22%。结论 Plackett-Burman设计和RSM可以很好地对毕赤酵母产重组抗菌肽LL-37的发酵培养基进行优化。

重组分泌型Fas配体对肝癌细胞株HepG2凋亡的影响

目的构建重组表达Fas配体(FasL)基因(N端含有IL2信号肽)的慢病毒,探讨其介导肝癌细胞凋亡的可行性及其可能的分子机制。方法将含有IL2信号肽的FasL基因克隆至慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+Puro(简称pCDH)中,然后将重组pCDH-IL2sig-FasL与慢病毒辅助质粒共同转染至HEK293细胞中,获得重组慢病毒LV-IL2sig-FasL,阴性对照为LV,分别感染HepG2细胞。最后将成功构建的稳转细胞HepG2-LV-IL2sig-FasL及HepG2-LV同时培养至96 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测细胞中相关凋亡信号因子的转录水平,Western blot检测蛋白表达水平,MTT检测细胞增殖抑制水平。结果HepG2-LV-IL2sig-FasL细胞相对于阴性对照株HepG2-LV,其凋亡因子转录及表达水平均上调;MTT检测结果显示HepG2-LV-IL2sig-FasL细胞生长明显受到抑制。结论外源表达IL2sig-Fas基因可诱导肿瘤细胞HepG2凋亡,有可能作为肿瘤基因治疗的新途径。

尿微量白蛋白检测试剂盒性能评价

目的评价北京九强生物免疫比浊法尿微量白蛋白检测试剂盒的性能。方法评价九强生物免疫比浊法检测尿微量白蛋白的精密度、准确度、线性范围、最大稀释倍数、前带性能以及特异性。结果精密度实验显示,日内不精密度高低浓度质控的变异系数(CV)分别为0.61%和0.70%,日间精密度高低浓度质控的CV分别为1.95%和2.83%;准确度实验结果显示,九强生物与罗氏尿微量白蛋白检测试剂盒的检测结果回归方程为Y=1.0169X+5.7251,相关系数(r)为0.9987;测量线性范围与厂家提供的范围一致;最大稀释倍数最大可达40倍;检测样本浓度43000mg/L时前带样本仍在可控范围;在厂家说明书标示的干扰物浓度范围内,对检测结果没有明显影响。结论九强生物的mALB检测试剂盒精密度好、准确度高、线性范围宽、前带性能好,性能完全能满足临床的使用要求。

Foxp3 mRNA和SCCA联合检测对宫颈癌的诊断价值

目的:回顾分析宫颈癌患者外周血叉状头螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA、鳞状细胞癌抗原(SCCA)等的水平变化,相关性及联合检测对诊断宫颈癌的价值。方法:92例宫颈癌患者(宫颈癌组)和87例体检健康女性(对照组)分别采用RT-PCR和化学发光法检测两组外周血Foxp3 mRNA和SCCA以及糖类抗原CA50、CA125水平;Pearson法分析Foxp3 mRNA与SCCA和CA50、CA125水平的相关性;绘制ROC曲线,分析Foxp3 mRNA联合SCCA检测对诊断宫颈癌的价值。结果:宫颈癌组Foxp3 mRNA、SCCA、CA50和CA125水平明显高于对照组(13.71±5.27 vs 2.09±1.51、13.07±1.82 vs 2.85±0.08ng/ml、49.2±13.29 vs 15.61±6.94IU/ml、51.72±15.26 vs 11.57±7.64U/ml,均P<0.01)。宫颈癌患者Foxp3mRNA相对表达水平与SCCA含量呈正相关(r=0.577,P<0.05),但与CA50和CA125无明显相关性(r=0.013和0.085,均P>0.05)。ROC曲线分析显示,Foxp3 mRNA联合SCCA诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)为0.911(95%CI:0.760—0.995),灵敏度为93.10%,特异度为84.70%,明显高于单检Foxp3mRNA或SCCA(均P<0.05)。结论:Foxp3 mRNA与SCCA联合检测可提高对宫颈癌的诊断效能。

血清淀粉样蛋白A对发热患者的临床诊断价值

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)在发热患者临床诊断中的指导意义。方法对120名体检健康者及140例发热患者采用罗氏Cobas 6000全自动生化分析仪测定血清SAA、C反应蛋白(CRP),采用希森美康XS800i血细胞分析仪检测全血白细胞计数水平。结果发热患者组血清SAA、CRP、白细胞均高于健康对照组。3种检测指标联合检测发热患者感染阳性率达99.3%,较CRP、白细胞单项检测时差异有统计学意义(P<0.05)。结论SAA在病毒感染早期即可升高,敏感性高于CRP,可为临床提供更好的参考价值。SAA、CRP、白细胞3项指标联合检测可提高对发热患者的初步病因诊断。

两种类型标本糖化清蛋白检测结果的评估

目的评估静脉血浆和血清标本糖化清蛋白(GA)检测结果之间的差异。方法选取2019年1月于该院就诊的患者75例,无特定的排除标准,收集其乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K 2)抗凝静脉血和无添加剂静脉血标本各1管,分离出血浆和血清,检测清蛋白(ALB)、GA(%)水平,应用统计学方法分析分别使用血浆标本和血清标本检测GA(%)的偏倚。结果ALB水平为26.3~47.5 g/L,GA(%)水平为10.5%~20.0%,静脉血浆与血清的ALB水平差异有统计学意义(P<0.05),GA(%)水平差异无统计学意义(P>0.05)。呈偏态分布的血浆与血清GA(%)相对偏差的中位数为-1.01%,Passing-Bablok回归模型拟合得到的回归方程为Y=-1.882+1.126 X,将GA(%)诊断切点14.3%和16.3%代入回归方程,偏倚分别为-0.15%和1.41%,均小于生物学变异研究的预期偏倚范围(±2.9%)。结论GA(%)的水平在10.5%~20.0%时,EDTA-K 2抗凝静脉血浆与无添加剂静脉血清标本用于GA检测的差异小,其偏倚在临床可接受范围内,均可在临床使用。

循环增强荧光免疫发光法检测血清白介素6的性能分析

目的评价循环增强荧光免疫发光法检测血清白介素6(IL-6)的性能。方法用循环增强荧光免疫发光法和电化学发光法(ECLIA)平行检测554例血清样本IL-6的水平。(1)定性检验,设临界值为2pg/mL,以ECLIA法作为确认方法,计算循环增强荧光免疫发光法的灵敏度、特异性和符合率。用成组χ^(2)检验进行关联分析。用配对χ^(2)检验观察两种方法对定性结果的差异。(2)定量检验,对于结果范围在2~50000pg/mL的样本,用循环增强荧光免疫发光法和ECLIA进行配对资料的t检验,并以ECLIA法为比对方法(X),以循环增强荧光免疫发光法为实验方法(Y),结果进行线性回归和相关系数(r)的计算。结果(1)循环增强荧光免疫发光法检测IL-6的灵敏度为99.2%,特异性为92.6%,阳性预测值为99.6%,阴性预测值为86.2%,总符合率为98.9%。成组χ^(2)检验,χ^(2)值=436.646,P<0.001,配对McNemarχ^(2)检验,P=0.687。(2)配对资料的t检验,t值=0.532,P值=0.595。直线回归方程为Y=0.990 X-0.344,r=0.996。结论循环增强荧光免疫发光法检测血清白介素6,在低、中、高各种水平上和ECL IA法检测的结果相关性高,吻合度好,是一种准确、快速的方法,能满足临床诊断的需要,适用于各级医疗机构血清白介素6的检验。

原发性肾病和糖尿病肾病患者蛋白尿与肿瘤标志物的相关性

目的了解原发性肾病(PGD)和糖尿病肾病(DNP)蛋白尿患者血清中肿瘤标志物水平与健康者差异及蛋白尿与肿瘤标志物水平相关性。方法选取黄石市中心医院收治的PGD患者150例和DNP患者140例,另取同期健康体检者150例作为健康对照组,晨起空腹抽取静脉血并分离出血清,检测血清肝肾功能、肿瘤标志物糖类抗原125(CA125)、糖类抗原15-3(CA15-3)、糖类抗原19-9(CA19-9)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、总前列腺特异抗原(TPSA)、游离前列腺特异抗原(FPSA),比较3组人群各指标水平。结果PGD组和DNP组血清CA125、CA15-3、CA19-9、TPSA、TPSA水平均高于对照组,AFP和FPSA水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PGD组和DNP组血清CA125、CA15-3、CA19-9、AFP、TPSA、TPSA水平差异无统计学意义。PGD组与DNP组患者中,尿蛋白和血清清蛋白均与血清肿瘤标志物CA125、CA15-3和CA19-9呈正相关,而与AFP、CEA、TPSA和FPSA呈负相关。结论临床上对于蛋白尿及血清清蛋白异常的肾病患者,根据血清肿瘤标志物来诊断相应肿瘤的假阳性率增高,临床医生应慎重对待,需综合考虑多种影响因素。