高产DHA寇氏隐甲藻突变株的筛选

以寇氏隐甲藻ATCC30772(C.cohniiATCC30772)为出发菌株,经60Co-γ射线辐照诱变,根据生长发育、苏丹黑B染色镜检、生物量、含油率和DHA含量等指标,经初筛、复筛,选出最佳突变株2.4k-2A2-5,其平均DHA含量达到39.04%,比出发株提高了3.39%,油脂产量和含油率比出发株分别提高了51.66%和63.37%,其DHA产量为7.14g/L发酵液,比出发株提高了近56.92%。

寇氏隐甲藻不同破壁方法的研究

寇氏隐甲藻是海洋微藻的一种,在寇氏隐甲藻的细胞油脂中,二十二碳六烯酸的含量高达30%～50%。但长期以来,因为微藻的细胞壁很难破碎,导致油脂的提取率不高。运用超声波法、生物酶法,反复冻溶法等方法,对寇氏隐甲藻进行了破壁研究。结果表明,这些方法都对寇氏隐甲藻都具有一定的破壁作用,破壁后油脂的提取率也有了不同程度的提高,把酶法破壁和超声波法破壁结合起来,在酶解5 h后,再超声波1 h,破壁率可高达91.7%,油脂提取率提高了21.7%,破壁效果更为理想。

^60Co-γ射线辐射诱变寇式隐甲藻6号的技术研究

寇氏隐甲藻是产DHA的优良藻种,期望通过60Co-γ射线诱变提高其DHA的产率,实现商业化生产DHA。寇氏隐甲藻(Crypthecodium cohnii 6号)经不同剂量的60Co-γ射线分别辐照诱变,经分离培养获得了不同诱变剂量下藻体的致死率,并对它们的的生长时间、生长速率以及生物量进行了比较,以确定最佳诱变条件。实验结果表明诱变剂量3.0kGy^5.4kGy时,死亡率达到99.999%以上,诱变剂量为1.8kGy的寇氏隐甲藻经培养后生物量最高,并在开始培养后36h就达到最大生长速率,这为进一步研究提供了科学依据。

DHA的来源及寇氏隐甲藻生产DHA的研究

DHA（二十二碳六烯酸）在耍幼儿大脑发育和视力发育中具有非常重要的生理作用，并且具有防治G血管疾病，提高人体免疫力和消炎、抗癌等功能。DHA的来源有多种，在寇氏隐甲藻（Crypthecodinium cohnii）的细胞油脂中，DHA的含量高达30％-50％，而其他多不饱和脂肪酸（PUFAs）含量较少，寇氏隐甲藻可以在添加了有机底物的培养基中高密度发酵，是人体补充DHA的良好来源。

高山被孢霉产花生四烯酸的代谢研究

研究了3个批次的高山被孢霉发酵产花生四烯酸(ARA)过程中,生物量、糖耗、氮耗、油脂含量和ARA含量的变化。结果表明,发酵7 d的生物量(干重)为30.650 g/L,糖耗85.33%,氮耗78.81%,发酵液油脂含量17.142 g/L,ARA含量7.482 g/L。

高山被孢霉原生质体菌龄的研究

确定了适合制备生产用高山被孢霉(Mortierella alpina)原生质体的最佳菌龄。将溶壁酶和蜗牛酶按比例(2%+4%)配制成混合酶解液制备不同菌龄Mortierella alpina 200012201(1)的原生质体,分别进行5 L发酵罐连续发酵,通过苏丹黑B染色和气相色谱法测定发酵产物。结果表明:菌龄对高山被孢霉原生质体发酵产物中花生四烯酸的含量有一定影响,选择菌龄为12 h的高山被孢霉原生质体进行发酵培养较为理想,培养7 d后总油脂和花生四烯酸含量分别为17.3 g/L和7.55 g/L。

高山被孢霉的扫描电镜观察

本文对三株高山被孢霉(Mortierella alpina)菌株200012201、88335和87649进行了研究。PDA(potato dextrose agar,马铃薯葡萄糖琼脂培养基)平板观察,200012201菌株的菌落呈波浪状或高山状,菌丝为白色;扫描电镜观察,菌丝发达,分支繁密,很少发现孢囊孢子,但观察到少量的高山被孢霉接合孢子。而88335和87649菌株的PDA平板的菌落平铺于表面,菌丝白色,呈绒毛状;扫描电镜观察,与200012201菌的菌丝相比,菌丝较细,同样分支繁密,容易观察到大量由菌丝梗分化产生的成串的分生孢子。

碱性蛋白酶制备酪蛋白磷酸肽的条件研究

本文研究了采用碱性蛋白酶酶解酪蛋白制备酪蛋白磷酸肽(CPP)的最佳条件,得到最佳酶解条件为:底物浓度5%、温度50℃、加酶量9 000U/g、pH值9.0、酶解时间3h。并研究了水解度、pH值、乙醇用量对CPP的N/P(摩尔比)和得率的影响。

高山被孢霉及其产生的花生四烯酸的安全性评价

花生四烯酸是人体的必需脂肪酸,具有极高的保健价值,其安全性问题日益受到注。本文从高山被孢霉菌种的分类、孢子变应原性、产毒性、抑菌作用和花生四烯酸产品的规格营养价值、毒性、与雌激素受体结合活性、潜在变应原性、基因毒性诸个方面综述了高山被孢霉及其产生的花生四烯酸的安全性问题。