肿瘤相关成纤维细胞分泌SDF-促进卵巢癌细胞增殖耐药

目的:探讨基质细胞来源因子1(SDF-1)在卵巢癌中的表达情况和对卵巢癌细胞Ca OV3增殖耐药的影响。方法:用Kmplot在线软件分析SDF-1表达水平对卵巢癌患者预后的影响;20μg/ml SDF-1预处理Ca OV3细胞12 h后,在对照组和SDF-1预处理组细胞中克隆形成试验比较细胞克隆形成能力改变;CCk8试验检测细胞增殖能力活性;不同浓度c DDP作用后CCk8试验检测细胞相对活性;c DDP 40μmol/L作用12 h后荧光共聚焦confocal检测细胞DNA双链损伤标志蛋白γ-H2AX表达及同源重组修复关键蛋白RAD51表达,以及两者细胞核中共定位;Western blotting法比较分离得到的配对正常卵巢成纤维细胞NOF和肿瘤相关成纤维细胞中SDF-1的表达情况。结果:在2个卵巢癌公共数据库GSE26712(HR=1.82,P=0.000 21)和GSE9891(HR=1.73,P=0.000 56)中SDF-1高表达组预后显著差于低表达组;第7天对照组和SDF-1组细胞克隆数目分别为(52.3±6.2)和(135.2±8.4);第14天分别为(114.3±3.8)和(258.2±8.6)(P<0.01);SDF-1组细胞增殖速度明显高于对照组(P<0.01);c DDP 40μmol/L作用48 h对照组和SDF-1组细胞存活率分别为(43.2±3.5)%和(67.8±6.6)%(P<0.01);c DDP 40μmol/L作用12 h SDF-1组γ-H2AX较对照组明显减少,同时DNA损伤部位却募集到更多的RAD51;Western blot结果示配对CAF较NOF表达更高的SDF-1。结论:SDF-1在卵巢癌间质细胞CAF中高表达,促进肿瘤细胞增殖与克隆形成能力,提高细胞同源重组修复能力介导c DDP耐药,其高表达是卵巢癌预后不良的标志。