微生物检验实验室质量管理分析

目的:进入新世纪以后,禽流感、传染性非典型肺炎等多种传染性疾病在我国大范围传播和流行,这就使得在疾病的预防诊断和治疗控制的过程中,微生物检验的重要性越来越突出。我国以及一些世界其他各国在对实验室进行质量管理的时候通常都是根据实验室的室间质量评估和质量检测来进行的。本文主要分析微生物检验实验室的质量管理,以期能够对实验室的质量进行分析前、分析中以及分析后3个阶段的全过程管理,首先分析了微生物检验实验室质量管理上面临的问题,并对实验室的全程质量管理和实验室环境质量管理进行了探讨。

综合医院检验科生物安全隐患及干预对策

目的了解综合医院检验科的生物安全隐患,制定切实有效的干预对策。方法调查综合医院检验科生物安全管理中存在的隐患,制定针对性管理措施。结果综合医院检验科在房屋布局、工作环境、生物安全防护设备方面及生物安全制度的落实、工作人员生物安全知识培训、无菌操作意识、洗手依从性、工作习惯等方面存在一系列不足之处。结论医疗机构应严格执行相关的生物安全法规、制度,重视和完善生物安全管理工作,严防实验室生物安全事故发生。

米诺环素对白念珠菌抗菌活性的实验室研究

目的探究米诺环素在白念珠菌感染中的体外抗菌活性。方法用K-B纸片扩散法对临床标本分离出的白念珠菌进行抗菌药物包括米诺环素的药敏试验,观察并记录所有药敏试验中,米诺环素的敏感程度及敏感率。结果发现32种抗菌药物中只有米诺环素对白念珠菌有抑菌环,有抑菌环并且直径14mm以上的占41%。结论米诺环素在体外具有抗真菌药的活性。

铜绿假单胞菌的药敏试验中D-现象的探讨

了解铜绿假单胞菌的药敏试验(K-B法)中,亚胺培南(IPM)诱导哌拉西林(PIP)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)出现D-现象的概率,并对这种现象发生的机制及临床意义进行探讨。采用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的K-B法。其中,将TZP、PIP分别贴在IPM的两侧,纸片中心距离为25 mm,看IPM能否诱导TZP、PIP出现D-现象。结果可见,150株铜绿假单胞菌的药敏试验中,出现D-现象的有120株,占80%;未出现D-现象的有30株,占20%,其中5株耐IPM。铜绿假单胞菌的药敏试验中,IPM诱导TZP、PIP出现D-现象非常普遍,这可能与IPM可诱导AmpC酶的大量产生有关。

时间分辨荧光免疫法人巨细胞病毒IgG抗体定量测定试剂盒的研制

目的建立人巨细胞病毒IgG(HCMV IgG)抗体时间分辨荧光免疫法(TrFIA)并研制其试剂盒。方法采用HCMV pp150+pp52+pp65抗原作为包被抗原,铕标记羊抗人IgG作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主的增强液,应用间接TrFIA法测定HCMV IgG抗体,将自制试剂盒与同类试剂盒进行方法学比对试验,比对定量结果的等效性采用线性回归分析。结果自制HCMV IgG抗体试剂盒的最低检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率均能达到国家检定标准;检测标化的企业校准品,其实测值与理论值相对偏差均在±20.0%以内;在2.0 RU/mL^256.0 RU/mL范围内,线性相关系数不低于0.9900;于37℃恒温箱放置6天后,检测性能无明显改变;临床研究评价一致程度百分比达99.4%,1020例临床样本定量结果的线性回归方程为Y=0.9594X+0.3252,r=0.9918。结论自制试剂盒测定HCMV IgG抗体灵敏度高、特异性强、精密度好、准确度高、线性范围宽;与同类检测结果相关性好,能满足临床需要。

康复科患者医院感染的调查分析

目的调查分析康复科患者的医院感染临床资料,旨在寻找预防与控制医院感染的有效措施,以期降低医院感染率。方法选择2012年5月-2013年4月医院康复科入住患者5 240例为研究对象,分别对不同月份、年龄发生医院感染及医院感染菌群分布进行分析,数据采用SPSS17.0统计软件进行处理。结果 5 240例康复科患者发生医院感染325例,感染率6.2%;年龄≤10岁及≥70岁患者医院感染率较高,均为7.9%;共分离出病原菌80株,其中革兰阳性菌16株占20.0%,革兰阴性菌50株占62.4%,真菌14株占17.6%,大肠埃希菌和铜绿假单胞菌检出最多,分别占18.7%、13.7%。结论康复科患者存在医院感染发生因素,采取必要的对策可以预防或降低医院感染率,从而提高患者治疗效果。

红细胞分布宽度和炎性反应标志物的相关性研究

目的研究红细胞分布宽度与炎性反应性标志物C反应蛋白的关系。方法对2890例患者血液标本的C反应蛋白、红细胞分布宽度、红细胞平均体积和血红蛋白数据进行回顾性分析。结果随着红细胞分布宽度的增大,C反应蛋白的浓度有增大的趋势,差异有统计学意义(P<0.001)。结论红细胞分布宽度与C反应蛋白的升高具有相关性。

时间分辨荧光免疫法风疹病毒IgG抗体定量测定试剂盒的研制与性能评价

目的建立风疹病毒（RV）IgG抗体时间分辨荧光免疫法（TrFIA）并研制其试剂盒。方法采用RV抗原作为包被抗原，铕标记羊抗人IgG作为示踪物，配制以β一萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，应用TrFIA法测定RVIgG，并对自研试剂盒的最低检测限、准确度、线性、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、热稳定性进行评价，与同类试剂盒进行方法学比对试验，比对试验定量结果的等效性采用线性回归分析。结果自研试剂盒的最低检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率均能达到国家检定标准；检测国际参考品（10IU／mL）或企业校准品，其实测值与理论值相对偏差均在正负20．0％以内；在2．0～256．0IU／mL范围内，线性相关系数不低于0．9900；于37℃恒温箱放置6d后，检测性能无明显改变；临床研究评价一致程度百分比可达100％。结论自研试剂盒灵敏度高、特异性强、精密度好、准确度高、线性范围宽，与同类产品检测结果相关性好，能满足临床需要。

血清淀粉样蛋白A在重症监测病房早期感染中的诊断价值

目的探讨血清淀粉样蛋白A在重症监测病房（ICU）早期感染中的诊断价值。方法收集本院2013年6月至2013年12月之间入住ICU超过2 d的患者,所有患者均检测血清淀粉样蛋白A（SAA）和高敏C反应蛋白（hs CRP）。根据痰培养（深部无菌吸痰）结果将所有患者区分为正常组与感染组。分别比较正常组与感染组之间的血清淀粉样蛋白A和高敏C反应蛋白变化。结果研究对象入选381例,其中细菌感染组106例,正常对照组275例。SAA在正常对照组与细菌感染组结果分别为5.00 mg/L（95%CI：5.00~5.00 mg/L）与105.12 mg/L（95%CI：48.89~212.47 mg/L）;hs CRP在正常对照组及细菌感染组中分别为9.13 mg/L（95%CI：3.87~14.47 mg/L）和28.15 mg/L（95%CI：16.81~39.63 mg/L）。SAA与hs CRP在正常组与感染组之间呈显著性差异（P〈0.001）。结论 SAA及hs CRP联合检测在ICU早期细菌感染中敏感性较高,具有辅助诊断价值。

抗风疹病毒IgM类抗体生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法的建立与性能评价

目的建立抗风疹病毒IgM类抗体(RV IgM)生物素-亲合素时间分辨荧光免疫分析捕获法(BA Mac TrFIA)并评价其分析性能。方法用鼠抗人μ链单克隆抗体(抗-μMcAb)作为包被抗体,生物素化RV重组抗原为桥接抗原,链霉亲合素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,测定抗RV IgM抗体,并对其检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、试剂热稳定性进行评价,与同类方法学比对检测1 020例样本,比对实验的一致性分析采用Kappa检验。结果本方法检测国家检测限参考品L1、L2和L3的结果均为阳性反应(S/CO≥1.00),批内变异系数(CV)<15.00%,国家阴性参考品符合率为10/10,国家阳性参考品符合率为5/5;本方法的试剂盒于37℃恒温放置6 d后,检测性能无明显改变;与珠海海泰公司试剂结果符合率为98.82%,Kappa=0.96。结论本方法灵敏度高,特异性强,精密度好;与同类方法学检测结果相关性好,能满足临床应用需要。

不同孕期妇女部分纤溶指标和C反应蛋白水平变化

目的:检测分析不同孕期正常孕妇D-二聚体(D-Dimer)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、纤维蛋白原(Fib)和C反应蛋白(CRP)水平变化。方法:369例正常孕妇包括孕16周、24周和34周3组(n均=123)和40例正常非孕妇女作为对照组。采用乳胶增强免疫透射比浊法检测各组血浆D-Dimer、FDP、Fib和血清CRP水平,并行统计学比较分析。结果:各孕妇组D-Dimer、FDP、Fib水平均高于对照组,且从孕16周到34周逐渐升高(P<0.01)。各孕妇组CRP水平高于对照组(P<0.01),但各孕周组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:正常孕妇血液多呈生理性高凝状态,仍需防范血栓性风险。

70例急性脑梗死患者血清OX-LDL及S-100B蛋白检测分析

目的讨论急性脑梗死患者血清OX-LDL、S-100B蛋白的表达规律及临床意义。方法用ELISA法检测70例急性脑梗死患者发病24h内及40例正常对照组血清OX-LDL、S-100B蛋白含量。结果急性脑梗死患者血清OX-LDL、S-100B蛋白含量均显著高于正常对照组(P<0.01),它们分别为(615.9±197.6)μg/L、(0.884±0.594)μg/L;正常对照组为(158.6±68.4)μg/L、(0.065±0.02)μg/L。急性脑梗死患者血清OX-LDL、S-100B蛋白含量呈正相关(r=0.536,P<0.01),且含量高低与病情严重程度有密切关系。结论血清OX-LDL、S-100B蛋白的含量可作为急性脑梗死病情监测的指标。

七氟醚对前列腺癌细胞比卡鲁胺抵抗的影响及其机制

目的研究七氟醚在体外对前列腺癌细胞比卡鲁胺抵抗的影响及其可能的相关机制。方法培养人前列腺癌细胞株LNCa P并通过比卡鲁胺诱导构建抵抗比卡鲁胺的LNCa P细胞株(LNCa P-RB),0%、1.7%、3.4%及5.1%气体浓度的七氟醚处理LNCa P(分别为对照组、低浓度组、中浓度组及高浓度组)及LNCa P-RB细胞(分别为对照抵抗组、低浓度抵抗组、中浓度抵抗组及高浓度抵抗组)6 h,CCK-8实验检测不同浓度七氟醚处理后LNCa P及LNCa P-RB细胞的比卡鲁胺半抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR技术(RT-q PCR)检测各组细胞中微小RNA-216a(miR-216a)的表达水平,免疫印迹实验(Western blot)检测各组细胞中E-cadherin及Snail的表达。结果与对照组相比,高浓度组比卡鲁胺IC50显著降低,中浓度组及高浓度组miR-216a及Snail表达显著降低,且E-cadherin表达显著升高;与对照抵抗组相比,中浓度抵抗组及高浓度抵抗组比卡鲁胺IC50均显著降低,且Snail表达显著降低,中浓度抵抗组及高浓度抵抗组E-cadherin表达显著升高,低浓度抵抗组、中浓度抵抗组及高浓度抵抗组miR-216a表达显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论七氟醚可下调前列腺癌细胞miR-216a的表达并抑制上皮间充质转化(EMT)进程,增强细胞比卡鲁胺的敏感性。

乙型肝炎病毒表面抗原低水平阳性血清的病毒核酸载量分析

目的：对电化学发光法检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg ）低水平阳性标本的病毒核酸载量进行分析，判断感染状态。方法收集湖北省中山医院检验科2012年6月至2012年10月电化学发光检测HBsAg COI值在0．8～5．0的血清标本130份，进行荧光定量PCR检测，获得 HBV-DNA载量值。结果130份标本中 HBV-DNA检测阳性2份。结论 HBsAg低水平阳性条件下联合 HBV DNA检测对乙型肝炎诊断有重要的临床价值。

Th17细胞与糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨Th17细胞与糖尿病肾病的相关性。方法选择2013年3~6月湖北省中山医院收治的96例2型糖尿病患者作为研究对象,根据患者尿白蛋白排泄率(UAER)不同分为两组:正常蛋白尿组(UAER<20μg/min)52例,糖尿病肾病组(UAER≥20μg/min)44例;同期选择健康体检者50例作为对照组。采用流式细胞仪检测各组受试者Th17细胞的比例。分析Th17细胞与患者糖化血红蛋白、UAER等指标的相关性。结果糖尿病肾病组UAER、尿素氮、血肌酐、Th17/CD4+T细胞显著高于正常蛋白尿组和对照组[(221.1±43.27)μg/min比(14.2±2.6)μg/min、(7.1±1.9)μg/min;(7.6±3.4)mmol/L比(5.0±1.0)mmol/L、(4.3±1.0)mmol/L;(74±32)μmol/L比(60±11)μmol/L、(62±18)μmol/L;(2.79±1.07)%比(0.37±0.21)%、(1.83±0.96)%],糖化血红蛋白(Hb A1c)、空腹血糖(FBG)显著高于对照组[(9.2±2.6)%比(4.4±1.1)%;(11.6±2.2)mmol/L比(5.1±0.5)mmol/L],正常蛋白尿组UAER、Hb A1c、FBG、Th17/CD4+T细胞[(14.2±2.6)μg/min,(8.9±1.9)%,(10.5±1.7)mmol/L,(1.83±0.96)%]显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。正常蛋白尿组与糖尿病肾病组Hb A1c、FBG比较差异无统计学意义(P>0.05)。Th17细胞与UAER呈正相关(r=0.802,P<0.01)。UAER[OR=2.764,95%CI 1.199~6.372]和Th17/CD+4T[OR=3.524,95%CI 1.984~6.259]是影响糖尿病肾病患者的危险因素。结论Th17细胞在预测诊断糖尿病肾病方面具有一定的临床价值,能否作为临床诊断指标有待于大量样本深入展开研究。

急性脑卒中患者血清S-100B蛋白的检测

目的讨论急性脑卒中患者血清S-100B蛋白的表达规律及临床意义。方法用ELISA法对70例急性脑卒中患者发病24h内的血清S-100B蛋白含量及健康对照组40例进行检测。结果急性脑卒中缺血性和出血性患者血清S-100B蛋白含量均显著高于健康对照组(P<0.01);急性脑卒中缺血性和出血性患者血清S-100B蛋白含量比较,差异无统计学意义(P>0.05);脑卒中含量高低与病情严重程度有密切关系。结论血清S-100B蛋白的含量可作为急性脑卒中病情监测的指标。

血浆和脑脊液中A_(42)的检测在阿尔茨海默病诊断中的意义

阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）是一种常见的神经系统退行性疾病,其典型的病理特征是神经元细胞外沉积的老年斑（Senile Plaque,SP）和细胞内神经纤维缠结（Neurofibrillary tangles,NFT）。Aβ是SP的主要组成成分,与AD的发病相关,大量研究表明,Aβ具有较强的细胞毒性,通过引起tau蛋白的过度磷酸化,

抗胰岛素样生长因子Ⅰ型受体单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备和鉴定抗胰岛素样生长因子Ⅰ型受体(IGF-IR)单克隆抗体(mAb),为深入研究肿瘤细胞中IGF-IR功能及致病机制奠定基础。方法:用脂质体法将制备的重组慢病毒载体三质粒pWPXL-IGF-IR、PMD2G、PAX2共转染包装细胞293T,将上清病毒转染目的细胞NIH-3T3,通过West-ern blot检测稳转NIH-3T3细胞中IGF-IR的表达。将细胞株NIH3T3-IGF-IR免疫BALB/c小鼠,提取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0进行杂交融合,筛选出针对IGF-IR的特异性杂交瘤细胞株,Western blot鉴定单克隆细胞株的特异性。并检测其免疫球蛋白亚类及mAb效价。结果:通过细胞融合和克隆化,筛选出1株持续分泌抗IGF-IR mAb的杂交瘤细胞株9F3。该抗体能与IGF-IR特异性结合,经鉴定该抗体属于IgG1亚类。结论:成功地制备了抗IGF-IR mAb,为研究IGF-IR在肿瘤中的生物学功能奠定了基础。

实验室自动化系统的性能验证

目的建立实验室自动化系统的性能验证方法，以保证检验质量。方法验证实验室免疫生化自动化系统处理样本过程中的样本信息、样本定位信息、样本状态、超出线性范围的复检、处理样本效率、样本检测结果比对、数据传输等是否符合质量要求。结果免疫生化自动化系统的样本信息能保证样本处理过程中的安全性，样本定位信息准确，样本状态如溶血、黄疸和脂血自动提示，超出线性范围自动复检，处理样本效率达到本实验室要求，样本检测结果比对在允许范围内，检测数据传输正确。结论免疫生化自动化系统经性能验证，满足质量要求，适合本实验室需要。