缺血再灌注致心律失常大鼠模型钙调蛋白介导的L型离子通道电流的变化

目的:探讨缺血再灌注致心律失常大鼠钙调蛋白(CaM)的变化及其对L型离子通道电流的影响。方法:选取健康SD大鼠48只,以单盲法随机分为4组(n=12);空白组不做任何处理,模型组以左冠状动脉前降支结扎法制备缺血再灌注致心律失常模型,干预组在制备缺血再灌注致心律失常模型前肌注钙调蛋白抑制剂W-7(100μmol/kg),假手术组仅进行开胸手术和动脉套线,无结扎。模型制备成功后,取大鼠心脏组织,以免疫印迹法检测L型钙离子通道主要亚型CaV1.2功能决定性亚单位α1C和CaM的表达水平;同时分离大鼠心肌细胞,以膜片钳技术进行L型离子通道电流(ICa,L)测定。结果:模型组大鼠心肌组织的α1C、CaM的表达水平,以及ICa,L均高于空白组和假手术组,差异具有统计学意义(P<0.05);较模型组相比,干预组CaM的表达水平和ICa,L均有降低,差异具有统计学意义(P<0.05);I-V曲线有所上移,α1C的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ICa,L过激所致Ca2+内流和细胞超载为缺血再灌注后心肌损伤和心律失常的重要因素之一,CaM在该病理过程中能够发挥不依赖于L型离子通道表达水平的调节作用,可作为其临床治疗的新靶点。

缺血再灌注致心律失常大鼠模型Ca2＋／CaM／CaMKⅡ信号通路的研究

[目的]探讨缺血再灌注致心律失常大鼠模型心肌组织Ca2＋/CaM/CaM KⅡ信号通路的变化。[方法]选取健康SPF级SD大鼠48只，雌雄各半，以单盲法随机分为四组（ n＝12）；空白组不做任何处理，假手术组仅进行开胸手术和动脉套线，无结扎，模型组以左冠状动脉前降支结扎法制备缺血再灌注致心律失常模型，不做任何处理，干预组在制备缺血再灌注致心律失常模型前肌注 CaMKⅡ抑制剂KN-93（100μmol/kg），四组取大鼠心脏组织，以免疫印迹法检测CaM、CaM KⅡ及P-CaM KⅡ的蛋白表达水平；同时分离大鼠心肌细胞，以激光共聚焦显微镜检测Ca2＋荧光强度。结果模型组大鼠的心律失常评分显著高于空白组和假手术组（ P ＜0．05），干预组心律失常评分显著下降（ P＜0．05）；模型组大鼠心肌组织的 CaM、P-CaMKⅡ/CaMKⅡ表达水平及Ca2＋荧光强度均显著高于空白组和假手术组（ P＜0．05），干预组各指标均明显下调（ P ＜0．05）。[结果]Ca2＋/CaM/CaM KⅡ信号通路可被认为是介导缺血再灌注致大鼠心律失常发病机制的重要环节之一。