蚕豆锈病的离体叶片人工接种技术研究及微生物源先导化合物筛选

蚕豆锈病由蚕豆单孢锈菌(Uromyces fabae de Bary)引起,是一种常见专性寄生的真菌病害,其侵染和传播方式与大豆锈病(Phakopsora pachyrhiri Syd.)相同,主要以夏孢子传播。因此常作为大豆锈病研究的模式靶标。又因其无法在人工培养基上生长繁殖,而基于植株的筛选方式难以适应先导化合物筛选。该文针对蚕豆锈病离体叶片人工接种技术进行了探索,对影响蚕豆锈病侵染的主要因素进行了研究,建立了基于离体叶片法筛选的先导化合物筛选方法。采用离体叶片孢子悬浮液喷雾法对1522份真菌固体发酵提取物和放线菌液体摇瓶发酵提取物进行了初筛,筛选出具有杀菌活性的提取物90份。对经过HPLC纯化后的540个组分进行复筛,获得具较高杀菌活性的化合物3个。筛选结果表明该筛选方法能稳定、高效地进行先导化合物筛选。

酵母菌合成的高效生物絮凝剂特性研究

采用白酒废水为碳源从土壤、垃圾、废水、污泥中分离大量菌株中,筛选到一株能够在简单废水和硫酸铵培养基上合成广谱高效絮凝剂的酵母菌株ZC1。运用单因素法考察了模拟悬浊性废水pH值、絮凝剂用量、助凝剂种类及其浓度对絮凝效果的影响,分别在处理时间为0.5h,pH值中性,Al2(SO4)3浓度0.01 g/L,絮凝剂用量为15 mL/L的条件下,对模拟废水絮凝率达到95%。同时发现该絮凝剂对中性到偏酸性(pH值3～7)废水均有较高的处理效果,废水中适量Ca2+、Fe3+的存在对絮凝都有促进作用,该菌株及其产生的絮凝剂对发酵废水处理及回收利用有较大潜力。

表没食子儿茶素没食子酸酯体外抗柯萨奇病毒的实验研究

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)体外抗柯萨奇病毒B3型(CVB3)的活性及作用机制。方法利用HEp-2细胞体外培养系统,通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑兰(MTT)比色法检测细胞活性,从药物抗病毒吸附、药物直接灭活病毒以及抑制病毒在细胞内的生物合成3个方面检测EGCG抗CVB3的作用方式,以治疗指数(TI)作为评价指标。结果 高浓度EGCG能阻止CVB3的吸附,EGCG具有较好的直接灭活病毒和抗CVB3生物合成的作用,TI分别为8.7和15.3,且随着药物浓度的增加,病毒所致CPE效应逐渐减弱而病毒抑制率则明显升高。结论 EGCG具有很好的体外抗CVB3的作用,其抗病毒方式是多途径的。

胶冻样芽孢杆菌发酵中试研究

利用单因素筛选和正交试验,对胶冻样芽孢杆菌菌株NBF-266的发酵培养基进行了优化,得到其最佳培养基配方为甘油0.8%,淀粉0.6%,花生粕1.5%,碳酸钙0.1%。通过400 L和5 000 L发酵罐分别发酵,发酵液芽孢产量分别为18×10~8 CFU/mL和15.8×10~8 CFU/mL,发酵液经不同方式浓缩干燥,得到冻干粉和喷雾干燥粉芽孢产量分别为2 910×10~8 CFU/g和933×10~8 CFU/g。

高含量原粉生产菌株苏云金芽孢杆菌LX-7的研究

从土壤中分离的苏云金芽孢杆菌LX-7高毒力菌株,利用单因子筛选和正交试验,得到其最佳培养基配方(g/L)为:玉米淀粉30,氮源A30,氮源D15,氮源E15,并对其发酵工艺和后处理工艺进行了优化,40000L发酵罐发酵制得原粉效价达到80000IU/mg以上,晶体蛋白含量达到13.2%。

生物炼制技术的现状与展望

生物炼制是以可再生生物质资源为原料,生产能源与化工产品的新兴工业模式。是转变经济增长模式,保障社会经济可持续发展的重大战略需求。微生物细胞工厂是生物炼制技术至关重要的核心。世界各国纷纷设立重大研究计划支持细胞工厂的研究,以期获得生物炼制技术的领先地位。该文简要回顾了生物炼制的重大计划和进展,展望了生物炼制的前景。

7种药剂对大白菜根肿病田间防效的比较

通过在湖北长阳火烧坪乡进行的大白菜根肿病药剂筛选试验,以白菜鲜重、防效、烂根数目为评价指标,比较了7种药剂对根肿病的防治效果。结果表明,生物农药B防效最高,为54.65%±3.13%,与肿腐萎(50%多·福可湿性粉剂)防效无显著差异,但显著高于其他药剂处理,肿腐萎防效为36.97%±11.44%;生物农药B处理每10株白菜鲜重为6.66kg,显著高于其他处理;烂根数目为0;综合各个指标,药剂B防效最佳,有待进一步研究开发。

苏云金杆菌防治大豆孢囊线虫效果试验

大豆孢囊线虫是一类重要的植物病原线虫,给大豆生产造成巨大的损失。研究发现苏云金杆菌对线虫有毒杀活性,为防治大豆孢囊线虫寻找到了一条新途径。结果表明,苏云金杆菌对大豆孢囊线虫的防治效果优于常规化学农药,且增产效果显著。

常压室温等离子体(ARTP)诱变快速选育对亚洲玉米螟高毒的苏云金芽孢杆菌突变株

采用常压室温等离子体(Atmospheric and room temperature plasma,ARTP)诱变苏云金芽孢杆菌Bt-NBIC-380菌株,选育对亚洲玉米螟高毒力突变株。经过4轮的ARTP诱变、镜检及摇瓶发酵筛选得到的突变株Bt-NBIC-380-18-407,其摇瓶发酵液对玉米螟二龄幼虫效价达到6 835 IU/μL,杀虫晶体蛋白含量6.3 mg/mL。该突变株的效价较初始菌株提高了25.7%,杀虫晶体蛋白含量提高了18.9%。经过5次传代,证实该突变株具有良好的遗传稳定性。

一种抗真菌抗生素的分离纯化及初步鉴定

从海南五指山采集的土样中分离到一株放线菌,编号为WS-23883,其发酵提取物对多种植物病原真菌具有很强的抑制活性。对其产物进行提取精制及制备液相纯化,获得了纯度达90%以上的化合物。生测表明,在20μg/mL浓度下该抗生素对多种植物病原真菌的抑制率达100%。根据活性产物紫外吸收光谱,可判断其为一多烯大环内酯类抗生素。质谱分析表明,活性化合物分子质量约667 u,据此判断其为一四烯大环内酯类抗生素。

16000IU/mg苏云金杆菌悬浮剂对稻纵卷叶螟的防治效果

试验结果表明,16 000 IU/mg苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)悬浮剂对稻纵卷叶螟(Cnaphalocrocis medinalis Guenee)有较好的防效,750、1 500、2 250 g/hm2 3个处理浓度药后12 d的防效分别为83.73%、87.73%、93.50%,可用于绿色及有机农业的生产。

17600IU/mg苏云金芽孢杆菌浓悬浮剂的研制

选取常用的农用助剂,通过正交试验对苏云金芽孢杆菌17600IU/mg浓悬浮剂配方进行了研制。结果表明,240g80000IU/mg苏云金杆菌原粉,4g苯甲酸钠,40g木质素磺酸钙,10g硅酸镁铝,加水定容至1000mL,搅拌均匀,调节pH值至4.5,用砂磨机研磨1h,得到的产品悬浮率为90%,流动性、分散性均较好,生物效价为20365IU/mg,(54±1)℃的恒温箱中热贮两周后生物效价为15624IU/mg,生物效价分解率为23%。

潮霉素B抗性基因在木醋杆菌中的整合表达

以质粒pSET152为出发载体,构建潮霉素B抗性基因的表达载体pSET152-HYG,通过大肠杆菌-木醋杆菌的属间接合转移将pSET152-HYG导入木醋杆菌,在位点特异性重组酶作用下潮霉素抗性基因B整合到木醋杆菌的染色体上。与出发菌株相比,重组菌株传代稳定,潮霉素抗性有了较大的提高,从100μg/mL提高到了400μg/mL以上,而产纤维素能力只略有下降。

1200ITU/mg Bti浓悬浮剂的研制

通过对苏云金芽孢杆菌以色列亚种Bti L-10菌株进行培养基的改良优化得到一种理化性质好、利于后处理的配方。200 L罐发酵效价达395 ITU/μL;通过后处理工艺的优化,得到一种制备1 200 ITU/mgBti浓悬浮剂路线,即发酵液2次离心并高倍浓缩得到菌浆,添加各种助剂经砂磨机研磨,得到Bti浓悬浮剂产品效价达到1 245 ITU/mg。

提高小麦叶枯菌筛选敏感度的方法

为了提高先导化合物杀菌活性筛选敏感度,选用小麦叶枯菌(Mycosphaerella graminicola)作为供试靶标,比较了半固体法杀菌活性筛选中的不同单孢子纯培养对标准样品杀菌活性的敏感度。结果表明,小麦叶枯菌不同单孢子纯培养,对标准样品的敏感度差异显著。基于以上结果,使用微生物源发酵提取物对敏感的单孢子纯培养和对照培养物进行了验证筛选。结果表明,对1 920个样品的筛选中,敏感的单孢子纯培养比对照培养物的活性样品检出率提高2.24%,活性样品检出数量增加54.43%。

一株侧孢芽孢杆菌发酵条件和培养基的优化

为获得一株侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterosporus)(NBF-129)发酵工艺,以发酵液活芽孢数为指标,在单因素试验基础上,采用正交试验对其培养基及培养条件进行优化。培养基优化结果为玉米淀粉2.0%、蚕蛹粉2.5%、酵母浸出粉1.0%、玉米浆1.0%。最佳培养条件为初始pH 7.5,培养温度30℃,转速220 r/min。优化后的侧孢芽孢杆菌摇瓶发酵液芽孢数达到4.12×10^9 CFU/mL,较优化前的2.30×10^9 CFU/mL提高79.1%。利用优化后的培养基和培养条件进行了30 L罐发酵小试,发酵周期为35 h,发酵液芽孢数为3.96×10^9 CFU/mL,发酵液离心浓缩后菌浆冷冻干燥,得到原粉芽孢数为6.70×10^10 CFU/g。

诺沃霉素植生链霉菌发酵培养基的优化

通过优化发酵培养基中的成分及其含量,提高诺沃霉素有效组分的产量。以高效液相色谱检测目标产物的峰面积作为指标,通过单因素试验获得最佳碳源及氮源。使用正交试验等获得最佳发酵培养基:葡萄糖4.0%,酵母浸粉0.5%,豆粕1.0%,磷酸氢二钾0.035%,碳酸钙0.05%,豆油0.1%。相关发酵条件为p H 7.0,种龄96 h,接种量10%,发酵温度28℃,发酵时间120 h。根据高效液相色谱检测结果,在最佳发酵条件下,目标产物产量比对照培养基提高了657%。