高效好氧反硝化盖氏假单胞菌YZ-7的鉴定及其脱氮性能研究

【目的】筛选出高效好氧反硝化细菌,开发出适宜在虾塘应用且具有强脱氮能力的新菌株,以解决虾塘因氮素含量过高引起的水体富营养化等问题。【方法】采用稀释涂布法和Giltay鉴别培养基从稻虾养殖塘的污水污泥中分离筛选高效脱氮菌株,结合形态学特性、生理生化特征和16S rDNA序列分析对分离菌株进行鉴定;测定分离菌株在KNO3氮源条件下的脱氮效率,同时分析不同环境因子对分离菌株反硝化能力的影响,并通过模拟试验评价其在处理虾塘养殖废水时的反硝化性能。【结果】从稻虾养殖塘污水污泥中分离获得1株高效脱氮菌,经形态学特性、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定为盖氏假单胞菌(Pseudomonas gessardii),命名为YZWF2207(简写为YZ-7)。以KNO3为唯一氮源时,菌株YZ-7经过6 h的迟缓期后进入对数生长阶段,且菌株YZ-7生长速率与含氮物质的去除速率密切相关。以柠檬酸钠为唯一碳源时,菌株YZ-7对硝态氮(NO_(3)^(-)-N)的去除率为99.05%;碳氮比(C/N)范围为4.42~5.00时,菌株YZ-7具有较高的NO_(3)^(-)-N去除率(99.71%~99.85%);菌株YZ-7的最高NO_(3)^(-)-N去除率与生物量最大值并不同步,其更适宜生活在弱碱性(p H 7.0~8.0)环境中;菌株YZ-7的适宜环境温度为30℃,但在低温(15℃)下也能高效率完成反硝化过程,NO_(3)^(-)-N去除率可达79.41%。菌株YZ-7对虾塘养殖废水中的NO_(3)^(-)-N去除效果极显著(P<0.01),且积累的亚硝态氮(NO_(2)^(-)-N)相对于对照组有明显下降趋势。【结论】从稻虾养殖塘污水污泥中分离获得1株反硝化能力强的盖氏假单胞菌(YZ-7),其实现最佳好氧反硝化性能的碳源为柠檬酸钠,C/N为4.42~5.00,pH为7.0~8.0,温度为30℃。菌株YZ-7在养殖废水处理方面具有较强的反硝化能力和竞争优势,作为好氧反硝化细菌在富氮养殖废水的脱氮生物产品研发中具有广阔应用前景。

高粱大斑病研究进展

高梁属禾本科高梁属,是一种重要的粮食作物,它具有抗旱、耐涝、耐盐碱、适应性强的优点,在现代农业生产上一直占有重要地位。高粱大斑病是由大斑凸脐蠕孢菌侵染引起的一种叶部病害,引起世界各地高粱产量的严重下降,造成巨大经济损失。从高梁大斑病的危害、致病菌的生理学特性、病症与传播、防治对策以及高粱大斑病菌真菌病毒等方面详细阐述了相关研究进展,并重点论述了与之相关的寄主抗性基因筛选与低毒力真菌病毒的最新研究成果,以期为今后更好地防治高粱大斑病提供参考。

伯克霍尔德氏菌在植物病害生物防治中的研究进展

伯克霍尔德氏菌(Burkholderia)是一类革兰氏阴性细菌,随着与植物相关的伯克霍尔德氏菌的研究不断增加,越来越多的结果表明,该属细菌可作为一类重要的生防有益微生物。本文综述了伯克霍尔德氏菌的分类和生理生化特征;在植物病害生物防治上的应用及作用机制,主要包括嗜铁素产生及生存空间竞争,拮抗作用中抗生素产生,诱导植物产生抗病性等;还综述了伯克霍尔德氏菌的固氮、解磷、植物激素产生等促生长特性。本论文为伯克霍尔德氏菌的生防机制研究和应用开发提供了理论依据。

柑橘大实蝇的内生殖系统形态结构

柑橘大实蝇Bactrocera minax(Enderlein),是柑橘的重要害虫。本文基于光学显微镜、扫描电镜、石蜡切片观察,对柑橘大实蝇的内生殖系统形态结构进行研究。结果表明,柑橘大实蝇雌虫内生殖系统主要由卵巢、侧输卵管、中输卵管、受精囊、附腺、前生殖腔(包含布氏交配囊、桑葚腺、生殖腔片)、后生殖腔(阴道和产卵针)组成。雄虫内生殖系统主要由精巢、精泵、输精管、附腺、输入射精管、输出射精管、后附腺和阳茎组成。其雌虫有泄殖腔,位于产卵针前端稍后,雄虫无泄殖腔。雌虫前生殖腔表面被2对肌肉包裹,内部的布氏交配囊、桑葚腺和生殖腔片不易被观察。精泵是一个淡黄色球体,由射精突(精泵内骨骼)、肌纤维(肌肉)、射精囊组成。柑橘大实蝇的内生殖形系统形态结构或组织经过进化,从而适应其伪产卵器的运动、交配、产卵等行为机制。为理解昆虫繁殖生理、进化和多样性,以及昆虫的产卵、交配和代谢物排泄等行为机制提供理论基础。

不同寄主对南亚果实蝇生长发育和繁殖的影响

【目的】探究葫芦科和茄科寄主果实对南亚果实蝇生长、发育和繁殖的影响。【方法】构建南亚果实蝇在南瓜、黄瓜、冬瓜和西红柿上的种群生命表,评价南亚果实蝇在4种寄主上的适应性。【结果】南亚果实蝇在南瓜上的成虫前期存活率(87.96%)和繁殖力(361.26粒·雌^(-1))均显著高于南亚果实蝇在黄瓜(80.00%和288.34粒·雌^(-1))、冬瓜(72.03%和84.80粒·单雌^(-1))和西红柿(69.69%、76.55粒·单雌^(-1))上的成虫前期存活率和繁殖力。以南瓜为寄主的南亚果实蝇的内禀增长率(0.10)和净增值率(90.63)显著高于以黄瓜(0.08和74.37)、冬瓜(0.07和35.62)和西红柿(0.07和26.03)为寄主的南亚果实蝇内禀增长率和净增值率。【结论】南亚果实蝇在4种寄主上均能完成世代周期,但是南瓜是南亚果实蝇最适宜的寄主。

西瓜枯萎病生防细菌YZU-S8的筛选及其防病促生作用的研究

【目的】分离和筛选对西瓜枯萎病菌有拮抗作用的细菌,为其生物防治提供更多更优质的菌源。【方法】从荆州市油菜田中采集长势良好的油菜植株,收集其根际土,采用稀释涂布法分离内生细菌及根际细菌。通过平板对峙筛选对西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)具有较强拮抗作用的菌株,经16S rDNA序列比对分析结合系统发育树对其进行鉴定,测定其抑菌谱,并通过温室盆栽实验测定其对西瓜植株的促生作用和在不同接种时间下对西瓜枯萎病的防效。【结果】从油菜植株及其根际土样品中共分离得到127株细菌,其中有17株细菌对西瓜枯萎病菌表现出了抑制作用,抑制作用最强的是一株内生细菌,命名为YZU-S8。该菌株具有广谱的抑菌活性,其无菌滤液在不同浓度下对9种病原真菌均具有一定的抑制作用,浓度为20%时对供试病原真菌的抑制率为40.35%~98.95%。提前3 d接种菌株YZU-S8时,该菌株能明显减轻西瓜植株的发病程度,对西瓜枯萎病的防效为73.8%。经YZU-S8灌根处理后西瓜植株的长势更加旺盛,其主蔓长和根长分别增加了8.01 cm和8.34 cm,地上鲜质量增加了6.88 g。16S rDNA序列分析显示YZU-S8与贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)的相似度达到100%,结合系统发育进化树将其初步鉴定为贝莱斯芽孢杆菌。【结论】菌株YZU-S8对西瓜植株具有显著的促生作用,对西瓜枯萎病具有良好的生防潜力和开发前景。

根际细菌吡咯伯克霍尔德氏菌YZU-S377对棉花黄萎病的防效及其促生作用研究

吡咯伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pyrrocinia)YZU-S377(S377)是前期获得的1株水稻根际细菌,对植物病菌具有广谱抑制作用。为探究S377对棉花黄萎病的生防潜力,测定了菌株S377对棉花黄萎病的盆栽防效、在棉花植株内的定殖动态及其促生作用。结果表明,菌株S377对棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)的相对抑制率为89.22%,盆栽防效为62.53%;经S377无菌滤液处理后,棉花种子发芽率提高了22.22个百分点,棉花幼苗根长增加了27.78 mm,地上鲜质量增加了0.73 g;菌株S377可以形成生物被膜,在OD 600等于0.15和0.25时形成生物被膜强度较显著,在棉花植株根部可以持续定殖21 d,其数量呈先增后减趋势。上述结果表明,菌株S377对棉花黄萎病具有良好的生防潜力。

贝莱斯芽孢杆菌D61-A对水稻根际土壤细菌群落结构的影响

为探究贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)D61-A对水稻促生长作用及对根际细菌群落结构的影响,通过菌悬液灌根处理,并于水稻苗期采集水稻样品,测定株高、根长、鲜重及干重,分蘖期采集根际土壤样品,提取土壤中的总DNA并使用高通量测序(Illumina MiSeq)技术对水稻根际细菌群落结构进行分析。结果显示:D61-A对水稻有促生长作用,D61-A处理组茎长和鲜重显著大于对照组,分别增加了23.19%和15.02%;经D61-A处理的水稻根际土壤细菌Sobs指数、Chao指数、Shannon指数和Coverage指数均高于对照组,且Sobs指数和Chao指数显著高于对照组,表明D61-A处理后水稻根际细菌群落多样性更丰富;PCoA分析结果显示处理组和对照组的细菌群落组成存在明显差异;土壤细菌群落结构分析和多物种差异性检验显示,经D61-A处理后细菌数目显著增加,丰富了根际土壤细菌的群落结构,其中绿弯菌门(Chloroflexi)、放线菌门(Actinobacteriota)、变形菌门(Proteobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteriota)为水稻根际土壤的主要优势菌群。结果表明贝莱斯芽孢杆菌D61-A具有较大的生防潜力。

基于ResNet模型的玉米叶片病害检测与识别

针对当前玉米病害发生量大、病情复杂、难以防治,严重影响玉米产量和质量的问题,提出了一种基于卷积神经网络和迁移学习的玉米叶片病害检测与识别方法。首先收集了3 827张玉米健康叶片图像和3种不同的玉米病害叶片图像样本,为了使模型拥有更好的泛化能力,使用生成对抗网络对样本进行处理,得到分辨率更高的样本,再对样本进行平移旋转,使样本数量达到5 153张。然后构建ResNet模型,分别对ResNet34、ResNet50及对其添加CBAM注意力机制和FPN特征金字塔网络,并通过迁移学习方法将预训练权重迁移到训练模型中。试验结果表明,ResNet50结合CBAM注意力机制模型的准确率达到了97.5%,相比ResNet50模型准确率提升了4.2百分点,相比ResNet34模型准确率提升了4.9百分点。本研究表明,提出的ResNet50结合CBAM注意力机制模型能够较精准地检测识别玉米枯萎叶、锈病叶、灰斑病叶和健康叶。并可将模型安装在无人机等移动设备上,实现对玉米叶片病害智能化防治,而且后期还会扩充更多的植物病害数据,实现对多类植物病害的检测,为智慧农业添砖加瓦,促进农业防治现代化。

三种微生物杀虫剂对三种小花蝽的安全性评价

为了探究微生物杀虫剂对天敌昆虫小花蝽的安全性,为微生物杀虫剂与小花蝽联合使用防治害虫提供理论依据,本试验在实验室条件下采用浸虫法测定球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)和苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)对微小花蝽(Orius minuius)、南方小花蝽(Orius similis)、东亚小花蝽(Orius sauteri)的毒力,比较其毒性大小,并比较了田间推荐使用剂量下用药7 d对小花蝽的致死率,评价其安全性。结果表明,球孢白僵菌对东亚小花蝽毒性最小,LC_(50)为2.88×10^(8)CFU/mL;金龟子绿僵菌对微小花蝽毒性最小,LC_(50)为5.20×10^(5)CFU/mL;苏云金杆菌对微小花蝽的毒性最小,LC50为1.24×10^(5)IU/mL。按照国际生物防治组织的评价标准,球孢白僵菌对东亚小花蝽的致死率为25.13%,属于无害,但对其余两种小花蝽轻度有害;金龟子绿僵菌与苏云金杆菌对三种小花蝽均为轻度有害。

柑橘大实蝇产卵器的超微结构观察(双翅目:实蝇科)

柑橘大实蝇Bactrocera minax(Enderlein),是柑橘的重要害虫。本文基于光学显微镜、扫描电镜、石蜡切片和透射电镜观察,对柑橘大实蝇的产卵器形态结构进行研究。结果表明,柑橘大实蝇产卵器由产卵器基节、翻缩膜和产卵针3部分组成,翻缩膜是浅黄色的柔软的细长管状结构,又分为骨化带、骨化环和膜质部3部分。骨化带表面有4条褐色的、纵向的、柔软的离散带。骨化环和膜质部表面存在小齿和无齿两种角质化鳞片,鳞片的一端与表皮连接,另外一端处于自由状态,鳞片以覆瓦状包围在骨化环和膜质部表面。骨化带和骨化环弯曲程度极低,而膜质部弯曲程度较大。产卵针由1块背片和2块腹片组成,2块腹片之间、背片与腹片之间与可折叠弯曲的柔性角质层连接。其背片两内侧均存在1个未封闭的圆环,其内部有肌肉(背腹肌)、气管、输卵管和直肠等组织或器官。产卵器上有毛形、腔锥形和钟形3种类型感受器。在产卵器收缩时,首先产卵针折叠在翻缩膜内,然后再一起折叠在基节内。因此,在成虫休息时,产卵器形成了产卵针(内层)、翻缩膜(中间层)和基节(外层)3个腹节的套叠。柑橘大实蝇的产卵器是伪产卵器,其结构或组织经过进化,从而适应其伪产卵器的外翻、弯曲、收缩折叠运动机制。本研究为理解昆虫进化和多样性,以及昆虫的产卵、交配和代谢物排泄等行为机制提供新的例证。

半夏立枯病菌拮抗内生细菌的分离鉴定及功能分析

【目的】从药用植物半夏分离对半夏立枯病病原菌具有拮抗活性的内生细菌并初步探究其抑菌机制,为半夏立枯病的生物防治提供理论和实践依据。【方法】对湖北省潜江市南章莆半夏大棚种植基地的半夏主要病害进行调查和分离,通过柯赫氏法则进行致病性验证,筛选出致病性最强的菌株并进行种类鉴定。采用组织分离法对健康无病半夏进行内生细菌分离及鉴定,通过平板对峙试验筛选出对半夏立枯病病原菌拮抗活性最强的菌株并检测其抑菌谱,测定拮抗菌株无菌发酵液和挥发性物质的抑菌活性,检测拮抗菌株耐酸碱能力、胞外酶活性以及生物被膜的形成能力;通过平板试验检测温度和蛋白酶K对拮抗菌株无菌发酵液抑菌活性的影响;通过乙酸乙酯萃取法提取拮抗菌株的脂肽类活性物质并通过液相色谱—质谱联用仪(LC-MS)检测活性物质的主要成分。【结果】南章莆大棚半夏的主要病害是茎腐病、根腐病、叶斑病和病毒病,发病率分别为20.87%、7.03%、3.57%和4.08%,发病率最高的茎腐病主要是立枯丝核菌引起的半夏立枯病。从半夏种球组织中分离到5株细菌对半夏立枯病病原菌具有拮抗活性,其中菌株B2-7的抑菌效果最好,抑制率为79.60%,经鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。抑菌谱测定结果显示,菌株B2-7对12种植物病原真菌均具有拮抗活性,其抑菌率为61.11%~89.47%。菌株B2-7的挥发性物质和无菌发酵液对立枯丝核菌均具有拮抗作用,挥发性物质的抑菌率为41.18%,当无菌发酵液浓度为2.5%、5.0%、10.0%和20.0%时,其抑制率分别为39.40%、56.06%、73.89%和77.09%。菌株B2-7具有一定的耐酸性,但耐碱性较弱。菌株B2-7能产纤维素酶、淀粉酶、蛋白酶和分泌嗜铁素,形成生物被膜的能力较强,且随着菌液浓度的增加呈先增强后下降的变化趋势。菌株B2-7无菌发酵液对温度和蛋白酶K敏感,75℃高温处理拮抗活性下降至23.45%,蛋白酶K处理拮抗活性下降48.60%。菌株B2-7的脂肽类活性物质能抑制立枯丝核菌生长,抑菌带宽2.06mm;LC-MS分析结果显示该菌株脂肽类活性物质中至少含有16种已知的有机化合物,其中包含surfactin、bacillaene、macrolactin和difficidin等多种已报道的拮抗物质。【结论】半夏内生细菌菌株B2-7对半夏立枯病病原菌具有较好的抑制作用,是防治半夏立枯病的潜力菌株,具有良好的应用前景。

柑橘大实蝇精巢、精泵和精泵内骨骼的生长发育状况

【目的】柑橘大实蝇是一种严重为害柑橘类果实的经济害虫。研究其精巢、精泵以及精泵内骨骼生长发育状况,有助于提高柑橘大实蝇人工繁殖效率以及其田间防治效果,为柑橘大实蝇的预测预报及防治提供理论基础。【方法】基于光学显微镜测量恒温和室温条件下柑橘大实蝇雄虫的精巢、精泵以及精泵内骨骼的长度和宽度,并建立其长度、宽度和指数的函数模型,比较恒温和室温2种饲养条件下其雄虫器官发育状况差异。【结果】无论是在恒温还是室温条件下饲养,随着柑橘大实蝇雄成虫日龄的增加,其精巢、精泵以及精泵内骨骼的长度、宽度和指数变化趋势均符合幂函数增长模型。在恒温和室温条件下,其雄虫的精巢宽度、精泵的长度和宽度以及指数、精泵内骨骼宽度均无明显差异。在室温条件下饲养的雄虫的精巢长度[(4.00±0.14)mm]及指数(3.40±0.14)、精泵内骨骼长度[(1.65±0.03)mm]及指数(1.84±0.08)均分别显著高于在恒温条件下饲养的雄虫的精巢长度[(3.75±0.13)mm]及指数(3.19±0.14)、精泵内骨骼长度[(1.61±0.03)mm]及指数(1.77±0.08)。【结论】变温(室温)比恒温更有利于柑橘大实蝇雄虫的精巢和精泵内骨骼的发育,并推荐使用精泵长度推断其雄虫日龄的方法。

基于YOLO V7及TSM模型的橘小实蝇梳理行为检测与识别

【目的】昆虫梳理行为的统计分析和研究对害虫控制和人类健康非常重要,针对传统的人工记录梳理行为的方法费时费力且易出错,提出了一种基于计算机视觉和深度学习的橘小实蝇Bactrocera dorsalis梳理行为检测和识别方法。【方法】首先将橘小实蝇视频数据进行图像处理得到帧图像,筛选其中3000张图像作为训练数据集;建立YOLO V7目标检测算法来检测视频数据中的橘小实蝇目标个体,框选中目标后通过视频处理算法进行裁剪;最后通过迁移学习方法将预训练权重迁移到训练模型中,利用基于非局部注意力改进的时间转换模块(temporal shift module,TSM)深度学习模型识别橘小实蝇的7种梳理行为(前足梳理、头部梳理、前中足梳理、中后足梳理、后足梳理、翅梳理以及静止)。【结果】橘小实蝇原始视频数据集通过YOLO V7目标检测算法训练的准确率为99.2%,召回率为99.1%。本研究算法处理后的视频数据集通过基于非局部注意力模块改进的TSM模型识别和统计梳理行为,最终平均准确率达到了97%以上,标准偏差低于3%。与其他4种深度学习模型(I3D,R2+1D,SlowFast和Timesformer)对比,本研究方法的准确率最高提升了9.76%,保证了橘小实蝇梳理行为检测和识别的准确率和正确性。【结论】本研究提出的方法大大减少了人工观察的时间,同时保证了橘小实蝇梳理行为识别的准确性,为研究昆虫行为提供了新的思路和方法,为智慧农业的现代化发展添砖加瓦。

枯草芽孢杆菌YZU-S149的分离鉴定及对西瓜枯萎病的生防作用

西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)引起的一种土传维管束病害,是西瓜(Citrullus lanatus)的主要病害之一。为筛选高效防治西瓜枯萎病的拮抗细菌,采用稀释涂布法和平板对峙法从对节白蜡(Fraxinus hupehensis)的根部及根际分离和筛选西瓜枯萎病菌的拮抗菌株,并测定其抑菌谱、生防特性以及盆栽防效,通过形态特征和16S rDNA序列对其进行鉴定。结果共筛选得到有效菌株50株,其中YZU-S7、YZU-S149和YZU-S146这3株细菌拮抗效果较强,对西瓜枯萎病的抑菌率分别为68.90%、73.51%和75.34%,均具有广谱的抑菌作用和产纤维素酶、蛋白酶及嗜铁素的能力,对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、玉米茎基腐病菌、马铃薯晚疫病菌具有良好的抑菌效果。用菌株YZU-S7、YZU-S149和YZU-S146的发酵液灌根接种西瓜植株,其中YZU-S149对西瓜枯萎病的防治效果最为显著,其第3次灌根后18d时西瓜植株的病情指数为17.09,而对照植株的病情指数为70.83,其防效达到75.87%。经形态学和16S rDNA分析,将菌株YZU-S149初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。结果显示菌株YZU-S149对西瓜枯萎病具有良好的生防潜力和开发应用前景。

伯克霍尔德氏菌YZU-S230对西瓜枯萎病的防效及其促生作用

伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)YZU-S230是长江大学植物与微生物互作研究室前期分离的一株白芨内生细菌,对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans(Mont)de Bary)、草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)、棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum)等具有较强的抗菌活性。为筛选用于防治西瓜枯萎病的拮抗细菌,通过对峙培养、盆栽试验和绿色荧光标记测定了伯克霍尔德氏菌YZU-S230对西瓜枯萎病的防效和促生作用以及在西瓜体内的定殖动态。结果显示,YZU-S230对西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)的抑制率达到82.80%,且在温室条件下对西瓜枯萎病具有较好的防效,同时接种时其防效为30.87%,提前3d接种时其防效为68.40%。经YZU-S230处理后30d,西瓜主蔓长增加了8.7cm,根长增加了3.0cm,地上鲜重增加了6.9g,显著高于对照组。菌株YZU-S230能在西瓜根部稳定定殖,接种后1、3、5、7、9、15、21d其在西瓜根部的定殖量分别为80×10^(5)、120×10^(5)、29×10^(5)、9×10^(5)、1.7×10^(5)、1.4×10^(5)、1.2×10^(5)cfu/g。结果表明,菌株YZU-S230在防治西瓜枯萎病方面具有良好的开发应用潜力。

稻瘟病生防细菌的筛选及其防效测定

为筛选得到对稻瘟病有良好防效的拮抗细菌,为稻瘟病的生物防治提供更多的菌源。采用稀释涂布法从对节白蜡(Fraxinus hupehensis Chiu,Shang et Su)及其根际分离细菌,通过平板对峙、离体叶片试验和盆栽试验筛选稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)的拮抗菌株,测定其产胞外酶活性,并经16S rDNA序列分析对其进行鉴定。结果显示,从对节白蜡及其根际共分离得到193株细菌,经平板筛选得到7株对稻瘟病菌具有抑制作用的细菌,其抑制率为62.53%~75.47%,其中菌株YZU-S033和YZU-S061对稻瘟病菌的抑制率最高,在离体叶片试验中对稻瘟病的防效较强,分别为81.7%和69.4%。在盆栽试验中,菌株YZU-S033和YZU-S061的菌体悬浮液显著降低了稻瘟病的发病率,减轻了该病害的发病程度,其防效分别可达69.8%和64.0%,与对照药剂(枯草芽孢杆菌可湿性粉剂)的防效相当。这2株拮抗细菌均能产生蛋白酶和纤维素酶,其中YZU-S061还可分泌嗜铁素。经系统发育分析将菌株YZU-S033和YZU-S061均鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。结果表明菌株YZU-S033和YZU-S061对稻瘟病均具有良好的生防潜力和应用前景。

贝莱斯芽孢杆菌B4-7联合水稻秸秆生物炭对烟草青枯病的防治作用

【目的】探究贝莱斯芽孢杆菌B4-7联合水稻秸秆生物炭对烟草青枯病的防治效果,明确水稻秸秆生物炭对菌株B4-7防治烟草青枯病的增强作用,为进一步研发烟草青枯病的生防产品提供参考。【方法】采用平板培养法测定不同含量水稻秸秆生物炭(1%C、2%C、3%C和4%C)对烟草青枯病菌生长的抑制作用、吸附作用及运动性影响;通过盆栽试验测定菌株B4-7联合2%和5%水稻秸秆生物炭(B4-7+2%C、B4-7+5%C)对烟草的促生长作用及对烟草青枯病的防治作用。【结果】不同浓度的水稻秸秆生物炭对烟草青枯病菌均具有一定的生长抑制作用、吸附作用及运动性影响,与对照相比,1%C、2%C、3%C和4%C处理每培养皿中的青枯菌数量分别减少8.07%、37.01%、53.74%和69.29%,青枯菌的运动性分别减少28.57%、35.71%、42.86%和48.57%,对烟草青枯菌的吸附率分别为24.18%、42.42%、64.55%和81.97%。B4-7+5%C处理与对照相比,烟草株高、叶数、最大叶长和最大叶宽分别增加209.36%、27.98%、254.51%和185.09%;B4-7+5%C处理与B4-7单独处理相比,烟草株高和叶数均存在显著差异(P<0.05,下同),分别增加77.52%和11.74%。B4-7+5%C处理与对照相比,烟草青枯病发病率和病情指数分别显著减少81.33%和80.61%;B4-7+5%C处理与B4-7单独处理相比,烟草青枯病发病率和病情指数分别显著减少54.82%和45.29%,防治效果显著增加24.85%。【结论】水稻秸秆生物炭能增强生防细菌B4-7对烟草青枯病的防治效果,菌株B4-7联合5%水稻秸秆生物炭是烟草青枯病综合防控的一种有效措施,具有较大的应用前景,值得进一步推广和应用。

丁硫克百威和阿维菌素对柑橘大实蝇成虫运动行为的亚致死效应

柑橘大实蝇Bactrocera minax(Enderlein)是一种为害柑橘类果实的毁灭性害虫。评价亚致死浓度的丁硫克百威和阿维菌素对其成虫运动行为的影响,可为预防和控制该害虫提供理论基础。本文通过不同亚致死浓度的丁硫克百威和阿维菌素处理柑橘大实蝇成虫,并于药后1 h和6 h检测其起飞率、水平和垂直爬行距离。结果表明,与空白对照组(CK)相比,LC 5、LC 10丁硫克百威处理后1 h的雌、雄虫起飞率分别显著降低66.7%、50.0%、43.3%和40.0%;LC 5丁硫克百威处理的成虫垂直爬行距离也明显降低34.6%,而LC 10丁硫克百威处理的成虫水平爬行距离却显著增加24.7%。与空白对照组(CK)相比,LC 5、LC 10、LC 25阿维菌素的处理后1 h的柑橘大实蝇雌、雄成虫起飞率分别显著降低33.3%、23.3%、23.3%、33.3%、53.3%和46.7%;LC 5和LC 25阿维菌素处理的成虫水平爬行距离分别明显降低24.2%和38.0%。LC 10和LC 25阿维菌素处理的成虫垂直爬行距离也分别明显降低25.2%和84.4%。结果还表明,丁硫克百威和阿维菌素对柑橘大实蝇成虫的水平爬行能力、垂直爬行能力和起飞能力的亚致死效应与其浓度相关。丁硫克百威的亚致死浓度处理对柑橘大实蝇成虫水平爬行能力的影响存在性别差异,而阿维菌素的亚致死浓度处理对该成虫起飞能力和水平爬行能力的影响亦存在性别差异。此外,丁硫克百威和阿维菌素对柑橘大实蝇成虫水平爬行能力和垂直爬行能力的亚致死效应与药剂处理后时间长短相关。

真菌内生蜡样芽孢杆菌7-1Y的分离鉴定及其功能探索

【目的】真菌内生细菌是一类特殊细菌,在寄主真菌体内及生态系统中发挥重要作用。前期从盘龙参菌根中筛选出一株含有内生细菌的真菌YZU172013(Phoma sp.),本研究进一步分离和鉴定YZU172013的内生细菌,并探索其生物学功能。【方法】首先通过16S rDNA序列扩增和SYTO-9染色检测YZU172013内生细菌的存在,接着用菌丝组织研磨法分离内生细菌,并通过形态及分子特征对其进行鉴定;然后运用特异引物验证细菌的内生性,并初步探究内生细菌的产胞外酶和耐药性等生物学功能;最后通过喂饲及注射初步探索了内生细菌的杀虫活性。【结果】真菌YZU172013能检测到细菌16S rDNA序列且菌丝内存在较多的细菌颗粒类似物。从YZU172013菌丝内分离出一株内生蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus 7-1Y),其营养体细胞仅为(1~1.5)μm×(0.3~0.5)μm,比普通蜡样芽孢杆菌小很多;通过蜡样芽孢杆菌特有的高丝氨酸环内酯酶(AHLase)序列扩增证明了其内生性。7-1Y具有水解淀粉、纤维素、解磷等功能。喂饲72 h后,家蚕代谢紊乱;注射24 h后家蚕的死亡率为100%。【结论】首次分离了一株真菌内生蜡样芽孢杆菌,该菌株7-1Y可产生多种胞外酶,且该细菌代谢物对昆虫血细胞具有较强毒性,具有很好的生防应用潜质。研究结果为真菌内生细菌的探究提供重要材料,为生防资源挖掘提供新思路。