旋毛虫肌幼虫分泌性蛋白P49基因的克隆与表达

通过设计、合成引物,以旋毛虫RNA为模板,用RT-PCR法扩增出旋毛虫P49序列,并进行了序列测定。将P49基因亚克隆至表达载体pET-28b中,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达,作SDS-PAGE及Western blot分析。结果表明,PCR法扩增出P49序列,其大小约为960bp,将构建的重组质粒pGEM-P49进行序列测定表明其与Genbank中的P49序列具有高度的同源性。成功构建了重组表达载体pET-P49;SDS-PAGR及Western blot分析表明,表达产物分子量约为38kDa,约占菌体总蛋白的7％左右,且能被感染旋毛虫猪阳性血清所识别。