肿瘤坏死因子-α对人喉鳞癌细胞放疗增敏作用的实验研究

目的探讨人肿瘤坏死因子α(TNF-α)对放射抗拒性人喉鳞癌细胞增殖、凋亡的影响及对其放射抗拒性的逆转作用。方法(1)利用MTT法检测TNF-α对人喉鳞癌放射抗拒性细胞系Hep-2R增殖的影响;(2)TUNEL法和流式细胞仪检测TNF-α对Hep-2R细胞凋亡的影响;(3)RT-PCR法测定TNF-α处理、TNF-α联合放疗处理Hep-2R后,细胞凋亡相关基因BaxαmRNA的表达水平;(4)克隆形成实验检测TNF-α对Hep-2R细胞放射敏感性的逆转作用;(5)移植瘤实验检测TNF-α对Hep-2R细胞放射敏感性的逆转。结果(1)TNF-α对人喉鳞癌放射抗拒性细胞系Hep-2R的生长增殖具有明显的抑制作用,且具有浓度依赖性,其中400u/mL为理想药物浓度。(2)TUNEL结果显示:TNF-α处理后,Hep-2R细胞凋亡率明显增加;流式细胞分析显示:对照组、TNF-α处理组和TNF-α联合放疗处理组Hep-2R细胞的凋亡率分别为10%,30%和55%,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)RT-PCR检测结果表明,TNF-α处理组和TNF-α联合放疗处理组Hep-2R细胞的Baxα基因表达均较对照组细胞明显上调。(4)克隆形成实验结果显示:对照组、TNF-α处理组、放疗组和TNF-α联合放疗处理组细胞的克隆形成率分别为100%,(80±3)%,(58±2)%和(39±2)%,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)裸鼠移植瘤实验结果显示:TNF-α处理组,放疗组和TNF-α联合放疗处理组细胞抑瘤率分别为(15.2±1.9)%,(35.4±2.1)%和(55.1±2.9)%,三者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论TNF-α可能通过抑制人喉癌细胞增殖,促进细胞凋亡,从而起到有效的放疗增敏作用。

MCM2在乳腺癌的表达及其意义

目的:探讨微型染色体维持蛋白(minichromosome maintenance proteins,MCMs)家族中的MCM2蛋白在乳腺癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组化染色方法,检测10例正常乳腺上皮、15例乳腺良性肿瘤及60例乳腺癌组织中MCM2蛋白的表达,并以标记指数(labelling index,LI)量化其表达。结果:MCM2在乳腺癌中的表达主要在细胞核,间质细胞亦有少量阳性着色。MCM2的LI在乳腺癌患者不同年龄之间无显著性差异(P>0.05),但在不同TNM分期和不同病理组织学分级(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)及淋巴结转移之间均有显著性差异,且呈逐渐升高趋势。各组中MCM2标记指数均高于ki-67。MCM2和Ki-67在乳腺癌中的表达呈平行关系(P<0.001)。结论:MCM2是反映细胞增殖的良好指标,作用优于ki-67,其表达指数与乳腺癌的组织分型、细胞增殖及恶性程度有关。MCM2的表达可以提示乳腺癌的恶性程度高低和良性肿瘤的恶变可能性,有助于临床判断患者的预后以及选择治疗方法。