siRNA干扰MafA对小鼠胰岛β细胞的生长以及胰岛素相关基因的表达分析

目的:探讨肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A(MafA)对小鼠胰岛β细胞Min6的增殖以及胰岛素相关基因mRNA及蛋白表达的影响。方法:实验分为MafA siRNA转染的MafA干扰A组、MafA干扰B组、MafA干扰C组及未转染的对照D组、对照E组、对照F组。MafA干扰A组和对照D组培养的葡萄糖浓度为5.6 mmol/L,MafA干扰B组和对照E组为10 mmol/L,MafA干扰C组和对照F组为25 mmol/L。采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测mRNA及蛋白表达,MTT法检测胰岛细胞增殖,ELISA测定胰岛素浓度。结果:在MaFA mRNA及蛋白的表达水平,MafA干扰B组和对照E组、MafA干扰C组、对照F组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。MafA干扰C组Min6细胞增殖水平低于对照F组(P<0.05)。MafA干扰C组Insulin-1、Insulin-2 mRNA相对表达水平均低于对照F组(P<0.05)。MafA干扰C组胰岛素浓度低于对照F组(P<0.05)。结论:MafA基因与小鼠胰岛β细胞增殖和胰岛素分泌相关,其作用可能与血糖浓度有关。

慢病毒介导沉默SOCS3基因对糖尿病大鼠相关胰岛素通路蛋白表达的影响

目的:构建糖尿病大鼠模型,探讨慢病毒介导沉默细胞因子信号转导抑制因子3(suppressors of cytokine signaling 3,SOCS3)基因对大鼠相关胰岛素通路蛋白表达的影响。方法:选取SD大鼠40只,构建2型糖尿病大鼠模型成功后,随机分为空白对照组、空白载体组和观察组,各10只。空白对照组不进行其他处理,空白载体组通过大鼠尾部静脉注射空慢病毒载体,观察组通过大鼠尾部静脉注射SOCS3 RNAi慢病毒载体。注射载体4周后,测定3组大鼠血糖、血脂、胰岛素水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测SOCS3、IRS1、IRS2、STAT5b、JAK2和STAT3 mRNA表达,Western blotting法检测SOCS3、IRS1、pIRS1、IRS2、pIRS2、STAT5b、pSTAT5b、JAK2、pJAK2、STAT3、pSTAT3蛋白表达。结果:注射载体4周后,观察组大鼠空腹血糖、胰岛素、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平均明显低于空白对照组和空白载体组(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇水平均明显高于空白对照组和空白载体组(P<0.01);观察组SOCS3 mRNA和STAT5b mRNA表达均低于空白对照组和空白载体组(P<0.01),IRS1 mRNA、IRS2 mRNA和JAK2 mRNA表达均高于空白对照组和空白载体组(P<0.05~P<0.01),3组STAT3 mRNA差异无统计学意义(P>0.05);观察组SOCS3、STAT5b、pSTAT5b表达均明显低于空白对照组和空白载体组(P<0.01),IRS1、pIRS1、IRS2、pIRS2、JAK2、pJAK2、pSTAT3蛋白表达均明显高于空白对照组和空白载体组(P<0.01),3组STAT3蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默SOCS3基因可降低糖尿病大鼠血糖水平,SOCS3基因可能通过相关信号通路介导胰岛素抵抗。

肠道病毒71型手足口病患儿血清轻链检测的临床应用

目的:通过检测肠道病毒71型手足口病(HFMD)患儿血清中轻链κ、轻链λ和κ/λ比值的变化,探讨血清轻链检测在手足口病诊断中的意义。方法:对178例EV71感染的手足口病患儿和40例健康体检儿童的血清标本进行轻链κ、轻链λ及κ/λ比值检测,并对其结果进行统计学分析。结果:HFMD组血清轻链κ水平显著低于健康组(P<0.05),差异有统计学意义;HFMD组血清轻链λ水平及κ/λ比值与健康组比较有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。HFMD组血清轻链κ、λ及κ/λ比值异常率均显著高于健康组(P<0.05),差异有统计学意义。结论:EV71感染的手足口病患儿的轻链结果有显著变化,提示EV71感染的手足口病患儿存在体液免疫的紊乱。