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人B7-1/Sart3融合基因的克隆和表达
被引量:
2
1
作者
黄方敏
郑启新
+1 位作者
吕斌
鲍同柱
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期165-168,共4页
目的 构建人共刺激分子CD80 (B7 1)、T细胞识别的鳞状细胞癌抗原 3(Sart3)融合基因真核表达载体 ,并分别在原核和人成纤维细胞中表达。方法 采用RT PCR技术 ,从人胎盘组织抽提的总RNA中克隆Sart3基因的部分cDNA序列 (第 1~ 12 81bp) ...
目的 构建人共刺激分子CD80 (B7 1)、T细胞识别的鳞状细胞癌抗原 3(Sart3)融合基因真核表达载体 ,并分别在原核和人成纤维细胞中表达。方法 采用RT PCR技术 ,从人胎盘组织抽提的总RNA中克隆Sart3基因的部分cDNA序列 (第 1~ 12 81bp) ,此段序列包括已报道的能诱导HLA限制性细胞毒性T淋巴细胞的抗原表位。然后将不含终止密码子的B7 1cDNA和Sart3cDNA共克隆入真核表达载体 pEGFP N1,测定核苷酸序列确定重组成功后 ,分别转染大肠杆菌和人成纤维细胞 ,利用流式细胞仪和Westernblot检测B7和Sart3的表达。结果 构建人B7、Sart3融合基因真核表达载体B7Sart3/pEGFPN。测序结果与GenBank的B7、Sart3相应序列 (NM_0 0 5 191、NM_0 14 70 6 )一致 ,阅读框无改变。流式细胞仪测定发现在转染的人成纤维细胞表面有明显的荧光增强 ,免疫印迹发现融合蛋白可以与抗B7抗体反应 ,融合蛋白分子量与B7 Sart3 EGFP的预测分子量相当。结论 成功构建真核表达载体B7Sart3/pEGFPN ,并在人成纤维细胞中表达。为下一步研究将SART3蛋白作为肿瘤疫苗应用于骨肉瘤的生物治疗打下基础。
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关键词
Sart3基因
B7基因
克隆
基因表达
RT-PCR技术
共刺激分子
肿瘤疫苗
下载PDF
职称材料
腓肠肌肌皮瓣转移术在膝关节和小腿软组织缺损治疗上的临床运用
2
作者
赵红卫
《实用医学进修杂志》
1997年第3期167-169,共3页
关键词
膝关节
小腿
软组织缺损
外科手术
治疗
原文传递
手指血管瘤6例报告
3
作者
赵红卫
周纳新
等
《实用医学进修杂志》
2000年第4期244-245,共2页
关键词
手指血管瘤
治疗
诊断
原文传递
题名
人B7-1/Sart3融合基因的克隆和表达
被引量:
2
1
作者
黄方敏
郑启新
吕斌
鲍同柱
机构
华中科技大学同济医学院附属协和
医院
骨科
华中科技大学公共卫生学院环境医学研究所
湖北省宜昌市中心医院骨科
出处
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第2期165-168,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目 (No.30 2 0 0 0 6 1)
文摘
目的 构建人共刺激分子CD80 (B7 1)、T细胞识别的鳞状细胞癌抗原 3(Sart3)融合基因真核表达载体 ,并分别在原核和人成纤维细胞中表达。方法 采用RT PCR技术 ,从人胎盘组织抽提的总RNA中克隆Sart3基因的部分cDNA序列 (第 1~ 12 81bp) ,此段序列包括已报道的能诱导HLA限制性细胞毒性T淋巴细胞的抗原表位。然后将不含终止密码子的B7 1cDNA和Sart3cDNA共克隆入真核表达载体 pEGFP N1,测定核苷酸序列确定重组成功后 ,分别转染大肠杆菌和人成纤维细胞 ,利用流式细胞仪和Westernblot检测B7和Sart3的表达。结果 构建人B7、Sart3融合基因真核表达载体B7Sart3/pEGFPN。测序结果与GenBank的B7、Sart3相应序列 (NM_0 0 5 191、NM_0 14 70 6 )一致 ,阅读框无改变。流式细胞仪测定发现在转染的人成纤维细胞表面有明显的荧光增强 ,免疫印迹发现融合蛋白可以与抗B7抗体反应 ,融合蛋白分子量与B7 Sart3 EGFP的预测分子量相当。结论 成功构建真核表达载体B7Sart3/pEGFPN ,并在人成纤维细胞中表达。为下一步研究将SART3蛋白作为肿瘤疫苗应用于骨肉瘤的生物治疗打下基础。
关键词
Sart3基因
B7基因
克隆
基因表达
RT-PCR技术
共刺激分子
肿瘤疫苗
Keywords
Sart3 gene
B7 gene
gene cloning
gene expression
分类号
R730.3 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
腓肠肌肌皮瓣转移术在膝关节和小腿软组织缺损治疗上的临床运用
2
作者
赵红卫
机构
湖北省宜昌市中心医院骨科
出处
《实用医学进修杂志》
1997年第3期167-169,共3页
关键词
膝关节
小腿
软组织缺损
外科手术
治疗
分类号
R658.305 [医药卫生—外科学]
原文传递
题名
手指血管瘤6例报告
3
作者
赵红卫
周纳新
等
机构
湖北省宜昌市中心医院骨科
出处
《实用医学进修杂志》
2000年第4期244-245,共2页
关键词
手指血管瘤
治疗
诊断
分类号
R732.2 [医药卫生—肿瘤]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人B7-1/Sart3融合基因的克隆和表达
黄方敏
郑启新
吕斌
鲍同柱
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2004
2
下载PDF
职称材料
2
腓肠肌肌皮瓣转移术在膝关节和小腿软组织缺损治疗上的临床运用
赵红卫
《实用医学进修杂志》
1997
0
原文传递
3
手指血管瘤6例报告
赵红卫
周纳新
等
《实用医学进修杂志》
2000
0
原文传递
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