DNA芯片技术在宜昌地区乙型肝炎病毒分型和耐药情况监测中的应用

目的利用聚合酶链反应(PCR)体外扩增和DNA反向位点杂交相结合的DNA芯片技术检测宜昌地区乙型肝炎病毒(HBV)分型及耐药情况,为临床医师对指导患者选用何种抗病毒药、继续使用该抗病毒药及换用何种抗病毒药提供依据。方法采集2015年1月至2017年5月宜昌地区共160例乙肝阳性且乙肝DNA检测结果大于103的患者血清标本。对160例患者采取性别、年龄、DNA检测结果分组的方法分析该地区HBV感染分布;采用DNA芯片技术检测基因分型HBV-B、HBV-C、HBV-D,以及rt180、rt204、rt207、rt181、rt236、rt184、rt202、rt250基因位点突变情况。结果 DNA芯片检测出感染HBV-B、HBV-C、HBV-D患者分别为87例(54.37%)、63例(39.38%)、0例,同时感染HBV-B及HBV-C的患者为10例(6.25%)。药敏试验显示该地区HBV对拉米夫定(LAM)、替比夫定(LdT)、阿德福韦酯(ADV)、恩替卡韦(ETV)4种药具有耐药性且耐药情况各有差异,4种同时全部耐药的有0例,全部敏感的有31例,未检测出耐药突变的有54例。DNA芯片检测rt180、rt204、rt207、rt181、rt236、rt184、rt202、rt250基因位点,8组基因位点均有野生型和突变型被检测出,其中野生型最多的为rt236,有150例,突变型最多的为rt180,有23例,野生型与突变型同时被检测出的最多的是rt250,有31例,被检出率最高的为rt180,为98.13%(157/160)。被检测出突变的有106例,突变率最高的为rt180M(为39.62%);rt184F及rt250I未检测到突变;检测出单基因位点突变的有48例,双位点突变的有29例。结论宜昌地区感染HBV-B的患者最多。该地区HBV对LAM、LdT、ADV和ETV总耐药率低于全国平均水平,男性HBV感染者远高于女性,20~<60岁感染率最高且耐药率最高。DNA检测结果在105~107感染率最高,103、105及106耐药率最高且多为同时耐2种或2种以上药物。单个基因位点突变的概率最大,双位点突变的概率其次。

宜昌地区1026对生殖异常夫妇细胞遗传学分析

目的探讨造成流产死胎、胚胎停育、不孕不育、生育畸形及智力低下儿生殖异常的细胞遗传学原因。方法采用外周血淋巴细胞培养,染色体核型分析的方法,对生殖异常的1026对夫妇进行细胞遗传学检测。结果染色体异常占受检人数的8.97%(184/2052)。其中,流产死胎、胚胎停育的夫妇,染色体异常占受检人数的7.71%(79/1024);生育过畸形儿或智力低下儿的夫妇,染色体异常占受检人数的5.30%(16/302);不孕(不育)的夫妇,染色体异常占受检人数的12.26%(89/726)。结论生殖异常与染色体异常密切相关,因此对生殖异常夫妇进行细胞遗传学检查是非常必要的。可以寻找病因。为优生优育提供依据。

结核患者痰结核杆菌检验的方法探讨

目的:探究结核患者痰结核杆菌检验的方法。方法:收治肺结核患者50例,取患者的痰标本,分别实施痰涂片检查以及PCR(痰聚合酶链反应),对两种检查方法检验的结果进行对比、分析。结果:肺结核患者经痰涂片检查的结核杆菌检验阳性率(24.00%)明显低于经PCR检验的结核杆菌检验阳性率(70.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对肺结核患者实施PCR检验的准确率较高,可提高结核杆菌检验的阳性检出率,从而利于肺结核患者的治疗。

冠心病患者炎性因子、UA、Hcy及小而密低密度脂蛋白水平检测及意义

目的:探讨冠心病(CHD)患者炎性因子、尿酸(UA)、同型半胱氨酸(Hcy)及小而密低密度脂蛋白(sdLDL-C)水平变化及意义。方法:选取152例CHD患者作为CHD组,包括稳定型心绞痛(SAP组,n=48)、不稳定型心绞痛(UAP组,n=55)和急性心肌梗死(AMI组,n=49),依据Gensinis评分又可分为轻度组(n=88),中度组(n=43)及重度组(n=21),同期另选取健康体检者55例作为对照组。比较不同类型CHD患者及不同冠状动脉病变程度间患者及对照组血清炎性因子[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、UA、Hcy及sdLDL-C水平。结果:CHD组hs-CRP、TNF-α、UA、Hcy及sdLDL-C水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CHD组中,UAP组与AMI组hs-CRP、TNF-α、UA、Hcy及sdLDL-C水平均显著高于SAP组,且AMI组水平显著高于UAP组,差异有统计学意义(P<0.05);与轻度组hs-CRP、TNF-α、UA、Hcy及sdLDL-C水平比较,中度组及重度组水平均显著升高,且重度组水平显著高于中度组,差异比较均有显著性(P<0.05)。结论:冠心病者血清炎性因子、UA、Hcy及sdLDL-C水平均显著升高,其水平检测对冠心病诊断及病情严重程度评估具有重要意义。

不同类型2型糖尿病患者血清学指标研究

目的探讨不同尿清蛋白排泄率(UAER)2型糖尿病(T2DM)患者的血清炎性因子、血管内皮生长因子(VEGF)、血管性血友病因子(vWf)水平及氧化应激状态。方法选取符合研究标准的T2DM患者作为研究对象,依据UAER水平分为正常蛋白尿组(A组)、微量蛋白尿组(B组)、临床蛋白尿组(C组),每组各40例。同时选取同期健康体检者40例作为健康对照组。比较4组研究对象的血清炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)],VEGF、vWf、氧化应激相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]。结果A、B、C组TNF-α、hs-CRP、MCP-1较健康对照组均显著升高,且随UAER水平升高,A、B、C组TNF-α、hs-CRP、MCP-1水平显著升高,且B、C组高于A组,C组高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组比较,A、B、C组VEGF、vWf水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),且随UAER水平升高,A、B、C组VEGF、vWf水平也升高,B、C组高于A组,C组高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组比较,A、B、C组SOD、GSH-Px水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),且B、C组SOD、GSH-Px水平低于A组,C组低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。A、B、C组MDA水平与健康对照组比较,显著升高(P<0.05),且B、C组高于A组,C组高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论T2DM患者存在血清炎性因子、vWf、VEGF水平及氧化应激反应异常,随病情严重程度增加,其异常状态越严重。

基因芯片技术在宜昌地区结核分枝杆菌耐药情况监测中的应用

目的利用基因芯片技术检测宜昌地区结核分枝杆菌感染及耐药情况,为本地区结核病预防和控制提供依据。方法收集2013年7月-2014年7月采自宜昌地区共1 200例抗酸染色阳性患者临床标本,其中痰标本746份,菌液320份,分离菌株134份。对1 200例患者采取性别,年龄分组的方法分析本地区结核分枝杆菌感染分布及流行趋势;采用基因芯片技术检测利福平耐药相关ropB基因511（T→C）、513（C→A）516（G→T,A→T,A→G）、526（C→T,C→G,A→T,A→G）、531（C→T,C→G）、533（T→C）位点及异烟肼耐药相关KatG基因的315（G→C,G→A）位点和Inhat基因的-15（G→T）位点突变情况。以比例法药敏试验为金标准,计算基因芯片法的检出率,敏感度和特异度。结果基因芯片法检测利福平异烟肼敏感968例,单耐利福平31例,单耐异烟肼63例,利福平异烟肼双耐57例,分枝杆菌属感染39例,未检出42例。药敏试验显示本地区结核分枝杆菌对利福平、异烟肼的总耐药率为13.49%;男性占73.90%,女性占26.09%;≤20岁占2.50%（28/1119）,21～岁占15.46%（173/1119）,41～岁占40.21%（450/1119）,〉60岁占41.82%（468/1119）。基因芯片检测利福平耐药相关ropB基因突变率最高的位点为531（突变率32.35%）、其次是511（突变率20.6%）;异烟肼耐药相关KatG基因突变位点为315（突变率54.69%）,ihat突变位点为-15（突变率43.75%）。检出KatG和ihat双突变1例,占突变株的1.56%。与比例法药敏试验相比,基因芯片法检测利福平/异烟肼耐药株的符合率分别是90.90%（1089/1198）和97.41%（1167/1197）,检测利福平耐药株的敏感度为90.62%（29/32）,特异度为98.62%（1060/1166）;检测异烟肼株的敏感度84.0%（63/75）,特异度98.39%（1104/1122）。结论宜昌地区结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的总耐药率低于全国平均水平,男性结核分枝杆菌感染者远高于女性,且随着年龄增大感染率及耐药率增高。本地区结核分枝杆菌耐药株的突变位点与其他地区有较大差异。