PI3K/Akt途径在MMC诱导的肝干细胞凋亡中的作用

目的探讨PI3K/Akt途径在丝裂霉素(mitomycin,MMC)诱导的肝干细胞凋亡中的作用。方法用MMC刺激大鼠肝干细胞,观察MMC刺激不同时间(6、12、24 h)对WB-F334细胞凋亡率的影响,以及不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/mL)的MMC对WB-F334细胞的细胞毒作用,加入磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)抑制剂曲西立滨(triciribine,API-2)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制剂SB203580后观察MMC对WB-F334细胞凋亡率的影响,探讨MMC调节WB-F334细胞凋亡的信号途径。结果 MMC对WB-F334细胞凋亡率的影响随作用时间延长而上升(P<0.05);与对照组比较,不同浓度的MMC对肝干细胞有明显细胞毒作用,且随着MMC浓度的升高而上升;Western blot检测结果显示:MMC刺激WB-F334细胞15 min后MAPK、Akt均发生磷酸化,且随着时间延长而减弱,60 min后磷酸化消失,说明p38 MAPK及PI3K/Akt途径能够被MMC激活;当MMC处理的细胞加入了p38MAPK抑制剂后,抑制剂处理组中细胞的凋亡率与MMC处理组并无显著差异(P>0.05),说明MAPK途径对MMC诱导WB-F334细胞凋亡并没有明显的作用;而当MMC处理的细胞加入了Akt抑制剂后,Akt抑制剂处理组中细胞的凋亡率与MMC处理组相比显著降低(P<0.05),表明PI3K/Akt途径对MMC诱导WB-F334细胞凋亡有明显的作用。结论 MMC能够刺激肝干细胞WB-F334发生凋亡,而其诱导凋亡的作用是通过激活PI3K/Akt信号通路实现的。

HPV16-E6/E7在尖锐湿疣患者癌前病变分级诊断中的作用分析

目的 评价HPV16-E6/E7在尖锐湿疣患者癌前病变分级诊断中的作用.方法 将2013年12月-2014年12月来本院就诊的100例尖锐湿疣患者作为研究对象,采集所有患者的宫颈口样本,利用进行26种HPV基因亚型检测以及HPV16-E6/E7的基因检测.根据HPV 16-E6/E7在不同病变分级中检出率的不同,分析其中临床诊断中的提示作用.结果 HPV总检出率为24.0％（24/100）,其中高危型（HPV 16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45）、低危型（HPV6、HPV 11、HPV40、HPV42、HPV44）和混合型（HPV 16和HPV11、HPV33和HPV40）检出率分别为17.0％ （17/100）,5.0％ （5/100）和2.0％（2/100）.炎症组、CIN组、癌症组HPV 16-E6检出率分别为5％、20％、30％,三者检出的差异显著（P＜0.05）;HPV16-E7检出率分别为50％、65％、79％,三者检出的差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 HPV 16-E6/E7基因与宫颈疾病及其癌变的关系密切.

腺病毒E1对人黑色素瘤靶向性治疗探讨

目的 探讨腺病毒E1对人黑色素瘤靶向性治疗效果.方法 PCR克隆获取腺病毒E1区,增强子DNA片段及鼠酪氨酸酶启动子,采用基因重组法进行构建靶向人黑色素瘤的选择复制性腺病毒的穿梭载体;同源重组法获取人黑色素瘤的选择复制性腺病毒E1,腺病毒E1小剂量攻击人黑色素瘤细胞系SK-Mel-I,同时攻击人肝细胞癌细胞系HepG2,对细胞形态发生的改变、细胞存活数进行记录,利用RT-PCR检测E1A表达,证实腺病毒E1特异性复制.结果 PCR检测结果显示,SK-Mel-I对腺病毒E1裂解杀伤敏感,但是对于HepG2不敏感,提示腺病毒E1在人黑色素瘤细胞中可特异地复制.结论 腺病毒E1对人黑色素瘤具有很好的靶向性.