Th9细胞对非小细胞肺癌患者CD8^+T细胞抗肿瘤活性的调控作用

目的:观察并分析Th9细胞及其分泌的白细胞介素-9(IL-9)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者CD8^+T细胞抗肿瘤活性的影响。方法:选择32例NSCLC患者(肺癌组)和11例健康对照者(对照组)。分离肺癌组血浆、外周血单个核细胞(PBMCs)、肿瘤部位和非肿瘤部位的支气管肺泡灌洗液(BALF)及对照组血浆和PBMCs,检测Th9细胞比例、IL-9水平和转录因子PU.1 mRNA相对表达量。纯化肺癌组Th9细胞、CD8^+T细胞和原代NSCLC细胞,使用重组IL-9刺激CD8^+T细胞,观察细胞增殖和分泌穿孔素、颗粒酶B水平。建立Th9细胞、CD8^+T细胞与原代NSCLC细胞的共培养细胞,观察IL-9对CD8^+T细胞的细胞杀伤功能和非细胞杀伤功能的影响。组间比较采用t检验、配对t检验或Wilcoxon配对检验。结果:肺癌组外周血Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于对照组(均P<0.0001),肺癌组肿瘤部位分离的BALF中Th9细胞比例、IL-9水平和PU.1 mRNA相对表达量低于非肿瘤部位(均P<0.0001)。IL-9刺激可增加肺癌组CD8^+T细胞增殖和穿孔素、颗粒酶B分泌,IL-9刺激还可提升肺癌组CD8^+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,主要表现为细胞死亡比率增加、干扰素-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌升高。Th9细胞也可提升肺癌组CD8^+T细胞对原代NSCLC细胞的细胞杀伤和非细胞杀伤功能,抗IL-9中和抗体可抑制Th9细胞对CD8^+T细胞功能的调控作用。结论:Th9细胞可能通过分泌IL-9在体外增强NSCLC患者CD8^+T细胞的抗肿瘤功能。