基于微小RNA-30b-5p/B细胞淋巴瘤2样11轴分析滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺功能的影响及机制

目的基于微小RNA-30b-5p/B细胞淋巴瘤2样11轴(miR-30b-5p/BCL2L11轴)分析滋金补水膏对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺功能的影响及机制。方法选用84只SPF雄性Wistar大鼠,按照随机数字表法分为7组,即对照组、模型组、滋金补水膏低剂量组、滋金补水膏中剂量组、滋金补水膏高剂量组、antagomir NC组、miR-30b-5p antagomir组,每组12只组。除对照组外,其余6组采用气道滴注脂多糖(LPS)联合烟雾暴露构建COPD大鼠模型,建模成功后,各组灌胃、尾静脉注射相应药物,每日1次,连续12周。小动物肺功能检测仪检测各组大鼠肺功能;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测各组大鼠肺组织miR-30b-5p mRNA表达;苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肺组织病理损伤情况,并测量肺组织小气道管壁厚度;原位缺口末端标记法(TUNEL)染色观察各组大鼠肺上皮细胞凋亡情况;酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠血清白细胞介素(IL)-8、IL-1β水平;Western blot法检测各组大鼠B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及BCL2L11蛋白表达。双荧光素酶报告实验验证miR-30b-5p和BCL2L11之间的靶向关系。结果与对照组比较,模型组大鼠静息呼吸频率、RI、肺组织小气道管壁厚度、肺上皮细胞凋亡指数、血清IL-8和IL-1β水平及肺组织Bax、BCL2L11蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤严重,PIF、C_(dyn)值、肺组织miR-30b-5 p mRNA表达水平和Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05);与模型组比较,滋金补水膏低、中、高剂量组大鼠静息呼吸频率、RI、肺组织小气道管壁厚度、肺上皮细胞凋亡指数、血清IL-8和IL-1β水平及肺组织Bax、BCL2L11蛋白表达水平显著降低(P<0.05),肺组织病理损伤减轻,PIF、C_(dyn)值、肺组织miR-30b-5p mRNA表达水平和Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),且除滋金补水膏中剂量组静息呼吸频率与滋金补水膏低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)外,其余指标滋金补水膏低、中、高剂量组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);与滋金补水膏高剂量组、antagomir NC组比较,miR-30b-5p antagomir组大鼠静息呼吸频率、RI、肺组织小气道管壁厚度、肺上皮细胞凋亡指数、血清IL-8和IL-1β水平及肺组织Bax、BCL2L11蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肺组织病理损伤加重,PIF、C_(dyn)值、肺组织miR-30b-5p mRNA表达水平和Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05),miR-30b-5p antagomir减弱了高剂量的滋金补水膏对COPD大鼠的改善作用。miR-30b-5p靶向负调控BCL2L11表达。结论滋金补水膏可抑制COPD大鼠肺上皮细胞凋亡和炎症反应,改善肺功能,缓解相关症状,其机制可能与促进miR-30b-5p表达、降低BCL2L11表达相关。