血清硫酸吲哚酚联合中期因子对医院获得性急性肾损伤患者预后的预测价值研究

目的探讨医院获得性急性肾损伤(hospital-acquired acute kidney injury,HA-AKI)患者血清硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate,IS)与中期因子(midkine,MK)联合检测对临床预后的预测价值。方法回顾性分析2018年3月~2021年3月在湖北省第三人民医院接受治疗的HA-AKI患者的临床资料,120例患者根据AKI病情严重程度分为Ⅰ期组(n=38)、Ⅱ期组(n=42)和Ⅲ期组(n=40),另选取同期体检的健康人群50例作为健康对照组,比较各组研究对象血清IS和MK水平。按照HA-AKI患者住院期间是否死亡分为生存组(n=88)和死亡组(n=32),比较两组患者血清IS和MK水平。采用多因素Logistic回归分析影响HA-AKI患者住院期间死亡的危险因素,另采用受试者工作特征曲线(ROC)分析IS和MK单独以及联合预测HA-AKI患者预后的价值。结果HA-AKIⅢ期患者血清IS(3.10±0.50μg/ml)和MK(2.33±0.38μg/L)水平明显高于Ⅱ期患者(1.85±0.25μg/ml,2.02±0.26μg/L),Ⅱ期HA-AKI患者血清IS和MK水平明显高于Ⅰ期(0.78±0.26μg/ml,1.50±0.20μg/L),Ⅰ期患者血清IS和MK水平明显高于健康对照组(0.09±0.03μg/ml,1.25±0.14μg/L),组间差异均有统计学意义(F=172.100,37.805,均P<0.05)。死亡组HA-AKI患者血清IS(3.02±0.40μg/ml),MK(2.26±0.31μg/L)水平均明显高于生存组(1.54±0.23μg/ml,1.85±0.22μg/L),差异有统计学意义(t=19.775,6.878,均P<0.05)。多因素Logistic回归模型分析显示,高IS水平、高MK水平、高龄、入住重症监护室(ICU)、机械通气以及服用肾毒性药物均是影响HA-AKI患者死亡的危险因素(均P<0.05)。MK,IS单独及联合预测HA-AKI患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.707,0.738和0.837(均P<0.05)。结论血清IS和MK在HA-AKI患者中呈高表达,在预测HA-AKI患者预后中具有一定的价值,且两者联合应用的预测价值最高。除高IS以及MK水平外,高龄、入住ICU、机械通气以及服用肾毒性药物均是影响HA-AKI患者死亡的危险因素。

1,25-二羟维生素D_(3)通过糖酵解途径促进人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的:探讨1,25-二羟维生素D_(3)(VD_(3))对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:取体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞,随机分为6组:对照组、2-脱氧葡萄糖(2-DG,葡萄糖抑制剂)组、1μmol/L VD_(3)组、10μmol/L VD_(3)组、2-DG+1μmol/L VD_(3)组和2-DG+10μmol/L VD_(3)组。药物干预6组细胞48 h后,以葡萄糖摄取测定试剂盒检测细胞的葡萄糖摄取量、ATP试剂盒检测细胞中ATP含量和乳酸试剂盒检测细胞的乳酸水平,WB法检测MCF-7细胞中细胞色素C(Cyt c)和凋亡相关蛋白(Bcl-2、BAX、PARP1、caspase9和caspase3)的表达水平。结果:与对照组比较,VD_(3)干预后,MCF-7细胞的凋亡率明显增加(P<0.05或P<0.01),同时细胞的葡萄糖摄取量、ATP含量及乳酸水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),Cyt c、BAX、PARP1、caspase9及caspase3蛋白表达量明显升高(均P<0.05),Bcl-2蛋白表达量降低(P<0.05或P<0.01);VD_(3)联合2-DG干预后,各组细胞检测指标的变化更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论:VD_(3)可通过抑制人乳腺癌MCF-7细胞的糖酵解过程并以线粒体的Cyt c途径促进细胞凋亡。

蟛蜞菊内酯通过抑制JAK2/STAT3信号通路诱导人肺腺癌A549细胞凋亡

目的探讨蟛蜞菊内酯对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及作用机制。方法不同浓度蟛蜞菊内酯(0、5、10、20、40μmol/L)作用于A549细胞12、24、48 h,MTT检测细胞的增殖情况。将细胞分为对照组,甲氨蝶呤组(2μg/mL甲氨蝶呤),蟛蜞菊内酯组(20μmol/L蟛蜞菊内酯)。流式细胞术检测细胞凋亡和周期,Western blot检测剪切的半胱氨酸/天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Janus激酶2(JAK2)、p-JAK2、信号转导与转录激活因子3(STAT3)和p-STAT3蛋白表达水平。结果蟛蜞菊内酯呈时间和剂量依赖性抑制A549细胞的增殖,其中20μmol/L蟛蜞菊内酯处理24 h即可显著抑制A549细胞增殖。与对照组比较,蟛蜞菊内酯组和甲氨蝶呤组细胞凋亡率和G_2期细胞比例显著升高(均P<0.01),促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Bax显著上调(均P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2显著下调(均P<0.01),p-JAK2和p-STAT3水平显著降低(均P<0.01)。结论蟛蜞菊内酯可诱导肺腺癌A549细胞凋亡,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。

N-乙酰转移酶2基因多态性与骨肉瘤易感性的关系

目的:研究N-乙酰转移酶2(NAT2)基因多态性与骨肉瘤易感性的关系。方法:取骨肉瘤患者血清标本,采用PCR-RFLP检测NAT2基因的多态性,只观察M1、M2、M3 3个突变基因,观察NAT2基因型和等位基因的分布、慢乙酰化和快速乙酰化基因型在群体之间的分布,分析NAT2基因多态性和骨肉瘤临床特征之间的关系。结果:2010年1月至2015年9月期间共纳入126例骨肉瘤患者作为实验组,同时期的健康体检者119例作为对照组。在对照组中,NAT2基因型出现的频率(纯合野生型WT/WT,杂合突变体WT/MX,纯合突变体Mx/MX)分别为30.95%、50.79%、18.25%;在实验组分别为47.06%、46.22%、6.72%。两组的频率差异有统计学意义(P<0.05)。NAT2快速乙酰化基因型者患骨肉瘤的风险是慢乙酰化基因型者的1.782倍(P<0.05)。与快速乙酰化基因型骨肉瘤患者相比,慢速乙酰化基因型患者的肿瘤体积较小(P=0.008),肿瘤分化程度较低(P=0.011),更不易发生远处转移(P=0.001)。结论 :NAT2基因多态性的快速乙酰化基因型可能是骨肉瘤的一个危险因素。

姜黄素通过调控miR-141-3p表达对肾癌Caki-1细胞增殖和凋亡的作用

目的研究姜黄素通过调控miR-141-3p表达对肾癌Caki-1细胞增殖和凋亡的影响。方法将人肾癌Caki-1细胞分为对照组、miR-141-3p mimics组(转染miR-141-3p mimics)、mimics-NC组(转染mimics阴性对照序列)、20μmol/L姜黄素组(20μmol/L姜黄素处理)、20μmol/L姜黄素+miR-141-3p mimics组(转染miR-141-3p mimics,并用20μmol/L姜黄素处理)。RT-qPCR法检测各组胃癌细胞miR-141-3p mRNA表达,CCK-8试剂盒检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞上皮细胞-间质细胞转化(EMT)标志蛋白E钙粘蛋白(E-cadherin)、N型钙粘蛋白(N-cadherin)和间质标志物波形蛋白(Vimentin)表达。结果与对照组比较,miR-141-3p mimics组和20μmol/L姜黄素组细胞增殖率降低(P<0.01),细胞凋亡率、miR-141-3p mRNA表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.01);与20μmol/L姜黄素组比较,20μmol/L姜黄素+miR-141-3p mimics组细胞增殖率降低(P<0.01),细胞凋亡率、miR-141-3p mRNA表达、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.01)。结论姜黄素可上调miR-141-3p mRNA表达,并与高表达miR-141-3p协同作用抑制肾癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与EMT标志蛋白表达相关。

非小细胞肺癌患者外周血和肺癌组织中ZIC1启动子甲基化检测的临床意义

目的探讨ZIC1基因在NSCLC患者外周血和肺肿瘤组织中的甲基化状态,及其对NSCLC的预后评估意义。方法选取95例NSCLC患者外周血、癌和癌旁组织,另选取95例健康体检者外周血为对照组。用MSP法比较外周血和癌组织的ZIC1甲基化检出率;分析ZIC1在外周血和癌组织的甲基化和NSCLC临床病理因素的相关性。结果NSCLC患者的外周血和肺肿瘤组织中ZIC1甲基化检出率显著高于健康人群的外周血和NSCLC患者的癌旁组织(P<0.05),其中ZIC1甲基化在肿瘤组织诊断中的敏感度和特异性较高。NSCLC患者外周血和肿瘤组织ZIC1基因甲基化检出率与肿瘤直径、转移、分期及胸腔积液有显著相关性(P<0.05)。结论ZIC1基因甲基化与NSCLC患者肿瘤发生、发展、转移、分期等有关,可能作为NSCLC诊断及预后指标。

人上皮性卵巢癌组织中PFTK1的表达及其对细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响

目的:研究PFTAIRE蛋白激酶1(PFTAIRE protein kinase 1,PFTK1)在人上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)组织中的表达,以及PFTK1基因的沉默对人卵巢癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响。方法:随机选取我院2015年6月至2016年11月收治的25例EOC患者为研究对象,采用Western blot检测癌组织以及癌旁组织中PFTK1蛋白的表达情况。选取PFTK1高表达的人卵巢癌细胞株SKOV3为研究对象,转染PFTK1-siRNA后,采用流式细胞仪检测PFTK1基因的沉默对SKOV3细胞周期的影响,采用细胞迁移和侵袭实验(Transwell)检测SKOV3细胞迁移、侵袭能力的变化,采用平板克隆形成实验检测SKOV3细胞增殖能力的变化。结果:Western blot检测结果显示,EOC患者癌组织中的PFTK1蛋白表达量显著高于癌旁组织(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示,PFTK1-siRNA组细胞出现明显的生长抑制,细胞多停滞在G_(0)/G_(1)期,与对照组相比差异显著(P<0.01);细胞迁移和侵袭实验(Transwell)结果显示,PFTK1-siRNA组细胞的迁移和侵袭能力与对照组比较显著下降,且差异均显著(P<0.01);平板克隆形成实验结果显示,PFTK1-siRNA组细胞增殖能力显著降低,与对照组相比差异显著(P<0.01)。结论:PFTK1在人EOC癌组织中呈现高表达状态;PFTK1基因沉默后,EOC细胞株SKOV3的细胞迁移、侵袭及增殖能力均受到不同程度的抑制,这将为基因治疗人卵巢癌提供一定的理论依据。

结肠EB病毒阳性的炎性滤泡树突细胞肉瘤1例

患者男,52岁。因结肠镜检查提示息肉行内镜息肉切除术。镜下观察:肿瘤细胞在炎性病变背景中散在分布,形成束状、层叠状。肿瘤细胞梭形或卵圆形,有丰富的胞质,轻度嗜酸,细胞境界清楚,细胞核长形,染色质絮状或颗粒状,小而清晰的核仁,核膜薄,细胞学特征温和。免疫组织化学染色瘤细胞CD21、CD23、CD35和D2-40均阳性,原位杂交:EB病毒编码的RNA肿瘤细胞阳性。病理诊断为结肠EB阳性的炎性滤泡树突细胞肉瘤。

体外研究青霉素对小鼠外周血小板活性与功能的影响

目的研究青霉素对血小板活性、寿命及黏附相关功能的影响。方法分离C57BL/6J小鼠外周血小板,使用10、50、100、500、1000、5000 U/mL青霉素处理24 h,MTT法检测血小板活性,计算半数抑制浓度(IC50);ELISA法检测IC50的青霉素对血小板中蛋白激酶A(Protein kinase A,PKA)、β血小板球蛋白(β-thromboglobulin,β-TG)、超氧化物歧化酶2(Superoxide dismutase 2,SOD2)、血小板第4因子(Platelet factor 4,PF4)和血小板内皮细胞黏附分子-1(Platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1)含量的影响。结果随着青霉素浓度的增大,血小板数目逐渐减少,血小板存活率逐渐降低,IC50值为985.68 U/mL。与对照组比较,青霉素组的PKA、β-TG、SOD2、PF4和PECAM-1的含量显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论青霉素可能通过降低PKA、SOD2、β-TG、PF4和PECAM-1含量,进而显著降低血小板存活率,抑制血小板活性及其聚集功能。