文摘目的检测吉西他滨(gemeitabine,GEM)诱导胰腺癌细胞株PANC-1中甲基化诱导静止基因(TMSl/ASC)的表达,并探讨半胱氨酸天冬氨酸酶-1(cysteine aspartase,caspase-1)、核转录因子(nuclear factor—κB,NF—κB)的活性与TMSl/ASC之间的关系。方法用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTr)比色法检测GEM在不同浓度(1、2、4、8、16μg/m1)及不同时间(24、48h)下对胰腺癌细胞PANC-1存活率的影响;RT—PCR技术检测PANC—1细胞在GEM(4.27μg/m1)刺激组(实验组)和空白组(对照组)培养24h和48h后TMS1/ASCmRNA的表达情况。用抗KB抑制蛋白(inhibitory protein of NF—κB,IKBR)多克隆抗体、抗caspase-1多克隆抗体和内参β—actin单克隆抗体通过Western blot技术检测并比较IKBa和caspase-1在实验组和对照组中的蛋白表达水平,从而分析NF.KB和caspase-1的活化状态。结果GEM对PANC-1细胞生长的抑制有浓度和时间依赖性,其半数抑制率(IC50)为24h4.27μg/ml;24h时实验组和对照组TMSl/ASC的表达量分别为(0.3±0.004)和(0.1±0.001),48h实验组和对照组分别为(0.63±0.007)和(0.21±0.006),2组相比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。Westernblot结果显示:随着培养时间延长,caspase-1在对照组中未发生活化,GEM可促进其活化;GEM实验组与对照组相比It(Bet的表达量无明显变化,GEM不能促使NF—KB活化。结论GEM能抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖并促进凋亡,随着作用时间的延长其药物敏感性减低。GEM作用-定时间可诱导TMS1/ASC表达增加,caspase-1可能参与GEM诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡的信号转导途径,NF-κB不参与GEM诱导胰腺癌细胞株PANC—1凋亡的信号转导途径。