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精氨酸激酶C端结构域的克隆及其表达纯化
被引量:
3
1
作者
雷婧
万华涛
+2 位作者
汪劲松
王卫东
潘继承
《化学与生物工程》
CAS
2010年第6期41-44,共4页
精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)由一个小的球形N端结构域和一个大的C端结构域构成。将来源于基围虾的AK C端结构域基因成功克隆到了原核表达载体pET-28a上,然后再转入Rosetta进行表达。探讨了AK C端结构域的最佳表达条件,当OD600达到...
精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)由一个小的球形N端结构域和一个大的C端结构域构成。将来源于基围虾的AK C端结构域基因成功克隆到了原核表达载体pET-28a上,然后再转入Rosetta进行表达。探讨了AK C端结构域的最佳表达条件,当OD600达到0.5~0.7时,用终浓度为0.2 mmol.L-1的异丙基硫代--βD-半乳糖苷(IPTG)在20℃下诱导培养5~6 h,AK C端结构域在上清中大量表达。采用His-Tag金属螯合亲和层析纯化、不连续梯度咪唑洗脱,得到了电泳纯的AK C端结构域。
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关键词
精氨酸激酶
C端结构域
克隆
表达
纯化
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职称材料
题名
精氨酸激酶C端结构域的克隆及其表达纯化
被引量:
3
1
作者
雷婧
万华涛
汪劲松
王卫东
潘继承
机构
湖北
师范学院生命科学学院蛋白质结构与功能实验室
湖北省黄石广播电视大学阳新分校
出处
《化学与生物工程》
CAS
2010年第6期41-44,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30570412)
湖北省自然科学基金资助项目(2005ABA192)
文摘
精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)由一个小的球形N端结构域和一个大的C端结构域构成。将来源于基围虾的AK C端结构域基因成功克隆到了原核表达载体pET-28a上,然后再转入Rosetta进行表达。探讨了AK C端结构域的最佳表达条件,当OD600达到0.5~0.7时,用终浓度为0.2 mmol.L-1的异丙基硫代--βD-半乳糖苷(IPTG)在20℃下诱导培养5~6 h,AK C端结构域在上清中大量表达。采用His-Tag金属螯合亲和层析纯化、不连续梯度咪唑洗脱,得到了电泳纯的AK C端结构域。
关键词
精氨酸激酶
C端结构域
克隆
表达
纯化
Keywords
arginine kinase
C-terminal domain
clone
expression
purification
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
精氨酸激酶C端结构域的克隆及其表达纯化
雷婧
万华涛
汪劲松
王卫东
潘继承
《化学与生物工程》
CAS
2010
3
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