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精氨酸激酶C端结构域的克隆及其表达纯化 被引量:3
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作者 雷婧 万华涛 +2 位作者 汪劲松 王卫东 潘继承 《化学与生物工程》 CAS 2010年第6期41-44,共4页
精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)由一个小的球形N端结构域和一个大的C端结构域构成。将来源于基围虾的AK C端结构域基因成功克隆到了原核表达载体pET-28a上,然后再转入Rosetta进行表达。探讨了AK C端结构域的最佳表达条件,当OD600达到... 精氨酸激酶(Arginine kinase,AK)由一个小的球形N端结构域和一个大的C端结构域构成。将来源于基围虾的AK C端结构域基因成功克隆到了原核表达载体pET-28a上,然后再转入Rosetta进行表达。探讨了AK C端结构域的最佳表达条件,当OD600达到0.5~0.7时,用终浓度为0.2 mmol.L-1的异丙基硫代--βD-半乳糖苷(IPTG)在20℃下诱导培养5~6 h,AK C端结构域在上清中大量表达。采用His-Tag金属螯合亲和层析纯化、不连续梯度咪唑洗脱,得到了电泳纯的AK C端结构域。 展开更多
关键词 精氨酸激酶 C端结构域 克隆 表达 纯化
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