阿司匹林诱发GSDME依赖性细胞焦亡对结肠癌细胞增殖的影响

目的探讨阿司匹林诱发焦孔素E(GSDME)依赖性细胞焦亡对结肠癌细胞增殖的影响及其相关机制。方法体外培养人结肠癌细胞Caco-2;运用MTT法检测不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0 mmol/L)阿司匹林干预对结肠癌细胞增殖活性的影响;显微镜下观察阿司匹林干预对结肠癌细胞形态学的影响;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验观察阿司匹林干预对结肠癌细胞膜完整性的影响;Western blot实验检测阿司匹林对结肠癌细胞中焦亡相关通路基因NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、焦孔素E-N(GSDME-N)的蛋白表达;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定Caco-2细胞上清中白介素-1β(IL-1β)和白介素-18(IL-18)的水平;沉默GSDME后在显微镜下观察细胞形态学变化情况;LDH释放实验观察细胞细胞膜完整性情况;ELISA法测定GSDME沉默后细胞上清中IL-1β和IL-18的水平。结果MTT结果显示,阿司匹林能够降低结肠癌细胞Caco-2的增殖活性,且呈浓度依赖性(P<0.01);形态学观察结果与LDH实验显示阿司匹林能够促进细胞焦亡的发生(P<0.01);Western blot结果显示阿司匹林能够升高焦亡相关通路基因NLRP3、Caspase-1、GSDME-N的蛋白表达(P<0.05);ELISA检测显示阿司匹林能够提高细胞上清中IL-1β和IL-18的含量(P<0.01);结肠癌细胞Caco-2细胞在沉默GSDME后,细胞焦亡受到抑制(P<0.05),IL-1β和IL-18表达下降(P<0.01)。结论阿司匹林能够诱发GSDME依赖性细胞焦亡,抑制结肠癌细胞Caco-2的增殖,从而发挥抑癌作用。