西格列汀通过调控自噬和凋亡减轻棕榈酸诱导的心肌细胞损伤

目的:观察西格列汀是否通过调节心肌细胞自噬来减轻棕榈酸诱导的H9c2心肌细胞凋亡。方法:棕榈酸和西格列汀处理H9c2细胞24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞存活率;共聚焦和Western blotting检测自噬标志蛋白LC3的表达情况;TUNEL试剂盒检测细胞凋亡情况;Western blotting分析凋亡相关蛋白C-Casp3、C-PARP和Cyt C以及相关调控因子AMPK和mTOR等的表达。结果:棕榈酸抑制H9c2细胞活性,减少LC3的蛋白表达,增加TUNEL阳性的凋亡细胞比率,增加凋亡相关蛋白的表达,抑制AMPK的磷酸化;而西格列汀可抑制PA对H9c2的这些作用,促进LC3蛋白表达,减少凋亡蛋白表达和凋亡细胞比率,增加AMPK的磷酸化。结论:本研究显示西格列汀可能通过促进自噬和减轻细胞凋亡来对抗棕榈酸诱导的细胞损伤,且这种作用可能是通过AMPK信号通路介导的。

GIPR在棕色脂肪细胞分化中的表达及功能分析

采用葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽（ GIP）干预诱导分化成熟的棕色脂肪细胞,以Western印迹分析GIP受体（GIPR）、解耦联蛋白1（UCP-1）、cAMP反应元件结合蛋白（CREB）等的蛋白表达,ELISA检测细胞内cAMP浓度变化。结果显示,分离培养的大鼠脂肪细胞光镜下呈典型棕色脂肪细胞形态,油红O染色可见细胞内大量脂滴聚集；免疫组化检测可见细胞内UCP-1表达；在棕色脂肪细胞分化后期GIPR mRNA表达量呈上升趋势,免疫组化检测可见棕色脂肪细胞内GIPR蛋白表达。1和100 nmol/L的GIP显著升高棕色脂肪细胞GIPR、UCP-1和CREB的蛋白表达,10 nmol/L时明显降低；各种浓度GIP干预24 h后棕色脂肪细胞内cAMP浓度均显著升高（P〈0.05）。结果提示GIPR可能参与棕色脂肪细胞的分化。