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重组流感血凝素三聚体蛋白疫苗的制备及免疫原性评价
被引量:
1
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作者
张国梅
刘京
+10 位作者
马宁
周蓉
乐洋
张哲罡
年悬悬
李雪丹
张家友
张阳洋
李盛
黄虎
杨晓明
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期137-143,共7页
目的制备重组流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)三聚体蛋白疫苗并进行相关表征分析,研究重组HA三聚体在小鼠模型中的免疫原性。方法构建稳定表达HA三聚体蛋白的CHO细胞株,通过Western blot、单向免疫扩散试验、蛋白质粒径检测和N-糖基...
目的制备重组流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)三聚体蛋白疫苗并进行相关表征分析,研究重组HA三聚体在小鼠模型中的免疫原性。方法构建稳定表达HA三聚体蛋白的CHO细胞株,通过Western blot、单向免疫扩散试验、蛋白质粒径检测和N-糖基化位点分析对重组蛋白进行定性及定量分析。根据剂量、佐剂等处理条件的不同将BALB/c小鼠分为11个组,并进行一致的免疫程序。初次免疫后56 d检测血清中和抗体效价,以评价免疫原性。结果构建的CHO细胞株能够分泌表达HA三聚体。HA三聚体具备生物学活性能够在单向琼脂免疫扩散试验中形成沉淀环,蛋白质粒径大小约为18.79 nm,具有10个N-糖基化位点,包括高甘露糖型、复合糖型和杂合糖型;HA三聚体重组蛋白疫苗在2次免疫小鼠后,3.75μg剂量配伍RFH01佐剂与对照组单价疫苗原液15μg引起的中和抗体效价差异无统计学意义(P=0.4312,U=36),配伍佐剂组免疫后血清抗体效价均高于未加佐剂组,其中15μg HA三聚体+RFH01组效价最高,为1280。结论成功制备了流感病毒重组HA三聚体蛋白,其与RFH01佐剂配伍能够诱导BALB/c小鼠产生针对流感病毒的体液免疫应答,为流感病毒重组亚单位疫苗的研发提供了参考。
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关键词
流感病毒
基因工程疫苗
重组亚单位疫苗
血凝素
三聚体蛋白
原文传递
题名
重组流感血凝素三聚体蛋白疫苗的制备及免疫原性评价
被引量:
1
1
作者
张国梅
刘京
马宁
周蓉
乐洋
张哲罡
年悬悬
李雪丹
张家友
张阳洋
李盛
黄虎
杨晓明
机构
武汉生物制品研究所
有限
责任
公司
病毒性疫苗研究二室
湖北葛店人福药用辅料有限公司技术研发中心
国家联合疫苗工程
技术
研究
中心
科研开发部
出处
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第2期137-143,共7页
基金
湖北省重点研发计划(2020DCC002)。
文摘
目的制备重组流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)三聚体蛋白疫苗并进行相关表征分析,研究重组HA三聚体在小鼠模型中的免疫原性。方法构建稳定表达HA三聚体蛋白的CHO细胞株,通过Western blot、单向免疫扩散试验、蛋白质粒径检测和N-糖基化位点分析对重组蛋白进行定性及定量分析。根据剂量、佐剂等处理条件的不同将BALB/c小鼠分为11个组,并进行一致的免疫程序。初次免疫后56 d检测血清中和抗体效价,以评价免疫原性。结果构建的CHO细胞株能够分泌表达HA三聚体。HA三聚体具备生物学活性能够在单向琼脂免疫扩散试验中形成沉淀环,蛋白质粒径大小约为18.79 nm,具有10个N-糖基化位点,包括高甘露糖型、复合糖型和杂合糖型;HA三聚体重组蛋白疫苗在2次免疫小鼠后,3.75μg剂量配伍RFH01佐剂与对照组单价疫苗原液15μg引起的中和抗体效价差异无统计学意义(P=0.4312,U=36),配伍佐剂组免疫后血清抗体效价均高于未加佐剂组,其中15μg HA三聚体+RFH01组效价最高,为1280。结论成功制备了流感病毒重组HA三聚体蛋白,其与RFH01佐剂配伍能够诱导BALB/c小鼠产生针对流感病毒的体液免疫应答,为流感病毒重组亚单位疫苗的研发提供了参考。
关键词
流感病毒
基因工程疫苗
重组亚单位疫苗
血凝素
三聚体蛋白
Keywords
Influenza virus
Genetically engineered vaccine
Recombinant subunit vaccine
Hemagglutinin
Trimeric protein
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组流感血凝素三聚体蛋白疫苗的制备及免疫原性评价
张国梅
刘京
马宁
周蓉
乐洋
张哲罡
年悬悬
李雪丹
张家友
张阳洋
李盛
黄虎
杨晓明
《中华微生物学和免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
1
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参考文献
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