ADA活性紫外吸收测定法的改良及复感儿淋巴细胞该酶活性的检测

检测了42例健康儿童和17例反复上呼吸道感染患儿（复感儿）的血淋巴细胞腺苷脱氨酶（ADA）活性，结果表明：复感儿的血淋巴细胞中ADA活性较健康儿童低下，且大多同样伴有不同程度的免疫功能低下；从复感儿组中筛选了两侧ADA活性和免疫功能明显低下的患儿，拟采用这两例患儿的血淋巴细胞进行ADA－SCID基因治疗的实验研究。

氯化锂离心纯化质粒DNA方法的建立及其效果评价

本文建立了一种采用氯化锂离心纯化质粒ＤＮＡ的方法。该法不需要特殊的仪器设备和昂贵的试剂材料，操作简便易行。用此法对ｐＵＣ和ｐＧＥＭ等多种系统的质粒进行了提取纯化。结果表明：纯化的质粒ＤＮＡ无ＲＮＡ、蛋白质和染色质ＤＮＡ污染，其得率与氯化铯超离心法相近；酶切效果良好；可直接用于哺乳动物细胞的基因转移并获得有效表达。

质粒DNA制备方法的改进

目的 :改进碱裂解制备质粒DNA的方法。方法 :在小规模制备中 ,采用 7 5mol/LNH4 Ac中和碱溶液及室温下异丙醇沉淀 ;在中规模制备中 ,采用三步沉淀将质粒分离纯化 ;在大规模制备中 ,用两步清洗弃去由于量大而不宜除掉的杂物 (碎屑物、杂蛋白等 )。结果 :建立了一套快速、高效、无毒、经济的方法。

以Bar为选择标记的遗传转化体系的建立

Bar基因是转基因商品化作物中应用最多的目标基因,也是水稻遗传转化中应用较多的选择标记基因,因此,建立以Bar基因为选择标记的通用和高效的遗传转化体系非常必要。本研究中,以籼型水稻明恢63为受体,Bar基因作选择标记,采用农杆菌介导的遗传转化法,将Bar基因转入其中,获得了一批转化子,初步建立了稳定、高效的水稻遗传转化体系。随后,以此体系为基础,将装有不同基因的两个载体pBar-1C*和pBar-1Ab进行了转化,分别从5400块和4800块愈伤组织中获得156个和115个抗性愈伤,其抗性愈伤率分别为2.8%和2.4%,分化率分别为80.7%和87.8%,由此说明,此转化体系相对稳定,且分化率高、抗性愈伤率也较高,可用于同类选择标记的遗传转化,加快水稻转基因育种步伐。

卡托普利对家兔肾上主动脉横夹所致脊髓损伤的保护作用

脊髓损伤是主动脉手术的主要并发症之一 ,旨在研究卡托普利对家兔肾上主动脉横夹所致脊髓损伤的保护作用。方法 :家兔 2 4只 ,随机分为正常对照组 (A)、缺血组 (B)和卡托普利组 (C)。肾上横夹腹主动脉 30min后松开 ,C组于横夹前 10min静注卡托普利 0 .5mg·kg-1继以 0 .15mg·kg-1·h-1持续输注至松开前 10min。余 2组静注等容量生理盐水 ,B组其它操作同C组 ,A组不夹闭。测定给药前 (C-10 )、松夹前 (C3 0 )和松夹后 3h(R3h)的血浆丙二醛 (MDA)浓度和超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,术后观察脊髓形态变化 ,并测定脊髓组织MDA含量。结果 :卡托普利可明显改善脊髓形态学改变 ;卡托普利可明显降低血中及组织中MDA含量 ,但不保护SOD活性 ;脊髓组织MDA含量与形态学改变有明显正相关。结论 :卡托普利对家兔肾上主动脉横夹所致脊髓损伤有良好保护作用 ,其机制与抗氧化作用有关。

心房利尿钠肽C-664G基因多态性与冠心病危险因素的分析

目的:探讨心房利尿钠肽(ANP)C-664G基因多态性与冠心病(CHD)危险因素的相关关系。方法:采用聚合酶链反应和限制型片断长度多态性(PCR-RFLP)的方法,分析158例CHD患者和165例非冠心病对照人群的C-664G(RsaI)基因多态性分布。结果:总研究人群中ANPC-664G的G和C两种等位基因分布频率为2.0%和98.0%。ANPC-664G基因型分布在两组人群中未发现显著性差异(P>0.05)。Logistic分析结果提示,男性、吸烟、高血压病史、糖尿病史、高血压家族史、血浆高胆固醇为冠心病的独立危险因素,但ANPC-664G型未能进入回归方程。且这种基因多态性分布与研究人群中的性别、体重指数、血脂、高血压病家族史、高血压病史、糖尿病家族史、糖尿病史、脑卒中家族史,脑卒中病史以及冠心病家族史之间并无显著关联(P>0.05)。结论:研究结果提示,ANPC-664G基因型与冠心病史并无显著相关性,可能不是冠心病的基因易感因素。

脑梗死患者血浆内皮素水平及钠钾泵钙泵活性改变

目的 :探讨脑梗死患者血浆内皮素水平变化及红细胞膜钠钾泵、钙泵活性改变及临床意义。方法 :应用非平衡法测定了 4 1例脑梗死患者及 2 6例对照组的血浆内皮素水平和红细胞膜 Na+-K+ATPase、Ca2 +-Mg2 +ATPase活性测定。结果 :脑梗死组血浆内皮素水平明显高于对照组 ,红细胞膜 Na+-K+ATPase和 Ca2 +-Mg2 +ATPase活性明显低于对照组 ,而且血浆内皮素的水平增高与 Na+-K+ATPase和 Ca2 +-Mg2 +ATPase活性呈负相关 ,与 SBP、DBP呈正相关。结论 :内皮素通过收缩血管 ,升高血压 ,影响红细胞膜离子泵活性导致脑血流下降 。