谭新华基于“补、固、和”法运用龟鹿二仙胶治疗男科疾病经验

总结谭新华教授运用龟鹿二仙胶治疗男科疾病经验。谭教授在临证中强调以补为主、以固为本、以和为贵的主体思想,运用龟鹿二仙胶为基础方补肾健脾、调理阴阳,并根据不同类型男科疾病,病症结合,灵活加减。

基于AMPK/PPARα信号通路研究知柏地黄汤对解脲脲原体感染大鼠生精细胞能量代谢的影响

目的:基于AMPK/PPARα信号通路探讨知柏地黄汤含药血清干预UU感染的大鼠生精细胞能量代谢的影响及其作用机制。方法:采用在体UU感染建模,随后原代提取大鼠生精细胞,采用生精细胞与支持细胞共培养的方式,进行生精细胞体外培养,以知柏地黄汤含药血清(高、中、低剂量组)为试验施加因素,同时设正常组、西药组和模型组。各组给予相应的含药血清或空白血清干预,在连续倒置显微镜下观察细胞培养过程中的生长状态和形态变化,采用比色法检测细胞上清液中LDH含量及细胞相对葡萄糖摄取量,采用流式细胞术检测生精细胞凋亡、电镜观察生精细胞超微结构、Western印迹检测生精细胞中AMPK和PPARα的蛋白表达。结果:正常组、模型组、西药组、知柏地黄汤(高、中、低剂量组)生精细胞LDH的含量分别为(60.72±1.83)、(201.12±2.88)、(90.66±1.61)、(94.74±1.20)、(101.24±2.03)、(111.04±3.35)mU/ml;UU感染后生精细胞上清液中LDH含量明显,增多较之正常生精细胞差异显著(P<0.01),不同浓度的知柏地黄汤含药血清可不同程度降低生精细胞LDH的分泌。正常组、模型组、西药组、知柏地黄汤(高、中、低剂量组)生精细胞凋亡率分别为(10.09±0.52)%、(49.24±0.86)%、(11.21±1.02)%、(30.64±0.99)%、(35.54±1.17)%、(42.95±1.31)%;UU感染可诱导生精细胞的凋亡,凋亡率较之正常生精细胞明显升高(P<0.01),不同浓度的知柏地黄汤含药血清可不同程度抑制UU感染的生精细胞凋亡。正常组、模型组、西药组、知柏地黄汤(高、中、低剂量组)生精细胞葡萄糖摄取率依次为(99.86±1.26)%、(49.42±1.70)%、(86.90±2.03)%、(84.14±1.21)%、(80.30±1.37)%、(75.18±1.76)%;UU感染后生精细胞葡萄糖摄取率减少,较之正常生精细胞差异显著(P<0.01),不同浓度的知柏地黄汤含药血清可不同程度修复生精细胞葡萄糖摄取。正常组、模型组、西药组、知柏地黄汤(高、中、低剂量组)生精细胞ATP的含量依次为(58.94±1.95)、(19.76±1.46)、(48.34±1.34)、(42.82±1.30)、(38.70±2.03)、(34.78±0.82)μmol/L;UU感染后生精细胞内ATP含量明显减少,较之正常生精细胞差异显著(P<0.01),不同浓度的知柏地黄汤含药血清可不同程度上调生精细胞ATP的含量。UU感染的模型组生精细胞线粒体大小不一,结构不完整,排列紊乱,部分发生肿胀变形,线粒体嵴溶解断裂甚者断裂,不同浓度的知柏地黄汤含药血清可不同程度抑制UU感染的生精细胞线粒体损伤。正常组、模型组、西药组、知柏地黄汤(高、中、低剂量组)生精细胞线粒体膜电位依次为(2.43±0.25)%、(8.53±0.71)%、(3.92±0.36)%、(4.43±0.27)%、(4.65±0.22)%、(4.88±0.10)%;UU感染后生精细胞线粒体功能受损,线粒体膜电位升高,较之正常生精细胞差异显著(P<0.01),不同浓度的知柏地黄汤含药血清可不同程度促使线粒体膜电位去极化,趋于稳定,线粒体膜电位不同程度下降。UU感染后生精细胞AMPK和PPARα蛋白磷酸化水平升高,较之正常生精细胞差异显著(P<0.01),不同浓度的知柏地黄汤含药血清可不同程度下调AMPK和PPARα蛋白磷酸化水平,存在一定程度的量效关系。结论:知柏地黄汤可能通过平衡AMPK和PPARα信号通路的磷酸化水平,提高葡萄糖摂取率,上调ATP含量,改善线粒体结构的破坏,最终抑制UU感染引起的生精细胞的凋亡和LDH的分泌,进一步从细胞和分子水平为知柏地黄汤治疗UU感染性不育(弱精子症)的作用机制提供实验依据。

基于肠道菌群稳态探析龟鹿二仙胶治疗少弱精子症思路

肠道菌群的稳态、与人体阴阳平衡、脾肾功能密切相关,且与正常精子的发生有着密切关联。本文从肠道菌群稳态角度对龟鹿二仙胶治疗少弱精子症进行方药探析,认为龟鹿二仙胶通过调节人体肠道菌群稳态平衡阴阳,从而达到改善少弱精子症作用,为进一步研究龟鹿二仙胶对肠道菌群的影响以及与精液质量的关系提供理论依据。

龟鹿二仙胶对阳虚型肾病大鼠肾脏的保护作用

目的研究龟鹿二仙胶对腺嘌呤致肾阳虚大鼠肾脏病变的保护作用。方法将48只SD雄性大鼠随机分成4组,空白组12只,其余组先合为1组进行造模,采用200 mg/(kg·d)腺嘌呤连续灌胃4周建立肾阳虚肾病大鼠模型。4周后造模组按体重高低再次进行分组,分为模型组、龟鹿二仙胶组、金匮肾气片组,每组12只;分别给予等体积生理盐水,龟鹿二仙胶1.0g/kg,金匮肾气片0.2g/kg灌胃,连续给药4周。期间每周称量各组大鼠体重,观察毛色变化。4周后进行取材,称量肾脏湿重,苏木素-伊红(HE)染色观察各组肾脏组织形态学变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清中黄体生成素(LH)、促卵泡生长激素(FSH)、睾酮(T)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)水平;ELISA测定肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)水平;免疫组化法检测肾脏组织中TGF-β1蛋白表达。结果与空白组相比,模型组大鼠肾脏湿重明显增加,血清中Cr、BUN、UA明显增加,肾脏组织中CAT显著降低,MDA显著升高,TGF-β1蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,龟鹿二仙胶组肾脏湿重、血清Cr、BUN和UA水平、肾脏中MDA水平、TGF-β1蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01),肾脏病变程度减轻。结论龟鹿二仙胶对肾阳虚大鼠肾功能及肾脏病变具有一定保护作用,其机制可能与改善性腺轴功能,抗氧化应激,降低TGF-β1蛋白表达有关。

基于中医哲学思维探析龟鹿二仙胶组方及临床运用

龟鹿二仙胶出自《医便》,由龟甲胶、鹿角胶、人参、枸杞子组成,组方精巧,阴阳气血同调,临床运用广泛。龟鹿二仙胶是在中医哲学思维的指导下组方,充分体现了中医哲学思维中的象数思维、整体思维、中和思维、变易思维,在临床运用中也充分体现了哲学辩证思维。

基于线粒体途径研究知柏地黄汤对解脲脲原体感染大鼠生精细胞活力的影响

目的:基于线粒体途径探讨知柏地黄汤含药血清干预解脲脲原体(UU)感染大鼠生精细胞活力的影响及其作用机制。方法:采用在体UU感染建模,随后原代提取大鼠生精细胞,以知柏地黄汤含药血清(低、中、高剂量组)为实验施加因素,同时设空白组、强力霉素组和模型组。给予相应药物干预后进行指标检测。结果:知柏地黄汤含药血清能改善UU感染的生精细胞活性,提高存活率(P<0.01,P<0.05);知柏地黄汤含药血清能有效提高UU感染的生精细胞线粒体ANT4转运活性(P<0.01,P<0.05);知柏地黄汤含药血清能有效上调UU感染的生精细胞中VDAC2、Cyp-D蛋白和mRNA表达水平(P<0.01,P<0.05),下调VDAC1蛋白和mRNA表达水平(P<0.01,P<0.05)。结论:知柏地黄汤可能通过抑制UU感染引起的VDAC1的过度激活,上调VDAC2、Cyp-D mRNA和蛋白表达,上调ANT4的转运活性,进而明显改善线粒体结构的破坏,最终改善生精细胞的活力。

鹿角胶对中年雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴和性功能的影响

目的:研究鹿角胶对中年雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴和性功能影响。方法:将8月龄中年雄性SD大鼠随机分为正常对照(C)和鹿角胶低(DL)、中(DM)、高(DH)剂量组。DL、DM和DH组鹿角胶用量分别为0.6、1.2、2.4g/kg,用鹿角胶溶液进行灌胃,每日1次。干预6周后,取材进行性激素、勃起功能、一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(cGMP)指标检测。结果:DL组血清促性腺激素释放激素浓度显著高于C组(P<0.05);DM、DH组血清黄体生成素浓度均显著低于C组(P<0.05);DL、DM组血清雌二醇浓度均显著高于C组(P<0.05)。DH组勃起潜伏期时间较C组显著降低(P<0.05);勃起次数显著增加(P<0.05)。DH组血清和阴茎海绵体组织NO浓度显著高于C组(P<0.05)。结论:鹿角胶可能有调节HPG轴以及改善性功能的作用。

龟甲胶对胃溃疡模型小鼠治疗作用及机制研究

目的:探讨龟甲胶对胃溃疡模型小鼠的治疗作用及其机制。方法:以食用醋酸灌胃构建小鼠胃溃疡模型,实验设正常对照组、模型对照组、三九胃泰组、龟甲胶组,经灌胃给药或0.9%氯化钠溶液1周后,常规法检测体质量、脾/胸腺指数、乳糖酶活性、胃残留率、胃溃疡指数及胃溃疡抑制率,滴定法检测胃液酸度,HE染色法检测胃、小肠、结肠的病理变化,ELISA法检测血清白介素(IL)-1β、IL-6、IL-8和胃泌素的含量水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组体质量、脾指数、胸腺指数显著下降(P<0.01),胃液酸度、胃溃疡指数、胃残留率、胃和小肠中乳糖酶活力、血清IL-1β、IL-8和胃泌素含量水平显著升高(P<0.05,P<0.01),胃组织黏膜充血水肿、黏膜上皮细胞丢失、炎症细胞浸润,小肠和结肠上皮结构紊乱,大量炎性细胞浸润。与模型对照组比较,龟甲胶组体质量、脾指数、胸腺指数显著升高(P<0.01),胃液酸度、胃溃疡指数、胃残留率、胃和小肠乳糖酶活力、血清IL-1β、IL-8和胃泌素含量水平显著降低(P<0.01,P<0.05),胃组织黏膜充血水肿减轻、炎性细胞浸润减少,小肠和结肠组织上皮结构完整,排列有序。结论:龟甲胶可通过降低胃液酸度,减少IL-1β、IL-8和胃泌素的分泌,降低溃疡指数,从而发挥对胃溃疡的治疗作用。