Daxx通过上调caveolin-1的表达介导Ox-LDL诱导巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡(英文)

为探讨Daxx对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡的介导作用及其可能的分子机制,用高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量,油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况,流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法研究Ox-LDL对细胞凋亡的影响,Realtime RT-PCR检测细胞内Daxx mRNA的表达水平,Western blot检测caveolin-1蛋白的表达,用特异性siRNA沉默Daxx在RAW264.7细胞中的表达.Ox-LDL上调Daxx mRNA和caveolin-1的表达、增加细胞内胆固醇含量、促使RAW264.7细胞凋亡,用特异性siRNA干扰Daxx在RAW264.7细胞中的表达能降低caveolin-1的表达、减少细胞内胆固醇含量、以及抑制细胞凋亡.上述结果表明,Daxx对Ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡具有介导作用,这一作用可能与Daxx上调caveolin-1的表达有关。

高静水压培养对内皮酯酶表达的影响

探讨高静水压培养对内皮脂酶表达的影响及其机制.分大气压(0mmHg)和高于1个标准大气压的递增压力(120、150、180mmHg)培养人脐静脉内皮细胞,用蛋白酶体抑制剂MG132进行干预.RT-PCR检测内皮脂酶mRNA的表达,间接免疫荧光技术和流式细胞术检测内皮脂酶蛋白的表达.结果显示,高静水压培养明显促进内皮脂酶mRNA和蛋白质的表达,180mmHg培养24h内皮脂酶mRNA的表达较对照组上调2.2倍(P<0.001),内皮脂酶蛋白表达较对照组上调2.54倍(P<0.001).蛋白酶体抑制剂MG132干预明显抑制180mmHg培养诱导的内皮脂酶mRNA的表达,MG132干预组内皮脂酶mRNA表达约为180mmHg培养组的50%(P<0.05).结果说明,高静水压上调内皮脂酶mRNA和蛋白质的表达,其机制可能与核因子-κB活化有关.