2型糖尿病眼底体征与中医证素的相关性研究

目的分析2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)患者的眼底体征与中医证素之间的相关性。方法通过横断面调查、现场问卷的方式,收集T2DM患者的一般资料、中医症状,包括眼底照相图片与光学相干断层成像(optical coherence tomography,OCT)图片,借助WF文锋-Ⅲ中医(辅助)诊疗系统提取证素,利用关联规则分析中医证素与眼底体征的关系。结果弥漫性水肿与“湿”“湿and肝”的关联性最高,囊样水肿与“气虚and肾and肝”关联性最高;硬性渗出与“气虚and肝”的关联性最高,其次是“湿”;出血以及微血管瘤的关联性最高的证素是“气虚and肾and肝”;黄斑前膜与“阳虚”关联程度最高,其次是“阳虚and肝”“阳虚and肾”。结论眼底体征与某些证素之间有关联:水肿与气虚血瘀水停相关,渗出与气虚湿聚痰凝相关,微血管瘤以及出血与气虚血瘀相关,黄斑前膜与肾阳虚衰相关。

基于文献分析视网膜静脉阻塞证型及证素分布规律

目的:基于现代文献探讨视网膜静脉阻塞的中医证候、证素分布规律及证素之间的相关性。方法:检索近15年来关于视网膜静脉阻塞的相关文献,采用SPSS20.0、IBM SPSS Modeler14.1等软件统计分析证素、证候分型的分布情况,并探索视网膜静脉阻塞的潜在证素组合的基本规律。结果:①共纳入78篇文献。其中中医证候43个,涉及病例2832例,证素17类,证素组合形式5类,获得高频证素群9组。②视网膜静脉阻塞的常见证型为气滞血瘀、气虚血瘀、瘀血阻滞,常见病位证素为肝、脾,病性证素为血瘀、气滞、气虚、阴虚、阳亢居多,证素组合以两证素组合为常见,以肝—气滞—血瘀、肝—气滞、肝—阳亢、脾—气虚—血瘀和脾—气虚为关联较强的证素。结论:视网膜静脉阻塞的证型和证素分布具有一定规律,可为RVO患者进行证素辨证提供参考依据。

黄芪甲苷通过PI3K/Akt/mTOR通路诱导鼻咽癌细胞自噬和凋亡

目的:探讨黄芪甲苷对鼻咽癌细胞自噬与凋亡的影响及潜在分子机制。方法:在体外实验中,通过单丹磺酰戊二胺(MDC)染色和透射电镜观察黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对鼻咽癌细胞自噬的影响。在体内实验中,建立裸鼠移植瘤模型后采用免疫荧光法(IF)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组别中自噬和凋亡情况的变化及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路关键蛋白的表达变化。结果:与空白组比较,不同浓度AS-Ⅳ(5、10、20μmol·L^(-1))作用于5-8F细胞后,各AS-Ⅳ组的自噬荧光强度均明显增强,其中,干预24 h,各AS-Ⅳ组的自噬荧光表达最强,10μmol·L^(-1)AS-Ⅳ组的荧光表达最明显;与空白组比较,透射电镜下自噬激活剂雷帕霉素(RAPA)诱导5-8F细胞内出现较多自噬体;3-甲基腺嘌呤(3-MA)作为自噬抑制剂,透射电镜下并未观察到5-8F细胞内有自噬体的形成;AS-Ⅳ10μmol·L^(-1)组细胞内结构和细胞膜完整、清楚,可见自噬体形成;与空白组比较,AS-Ⅳ各组的肿瘤体积明显受到抑制(P<0.05,P<0.01),微管相关蛋白l轻链3Ⅱ/微管相关蛋白l轻链3Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)和活化的胱天蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)荧光信号明显增强(P<0.05,P<0.01),自噬相关蛋白酵母ATG6同源物(Beclin-1)、LC3Ⅱ/Ⅰ和凋亡相关蛋白cleaved Caspase-3、活化的多腺苷二磷酸多聚酶(cleaved PARP)的表达量均明显升高(P<0.05,P<0.01),而自噬相关蛋白泛素结合蛋白(p62)的表达明显下调(P<0.05,P<0.01);磷酸化(p)-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪甲苷可诱导鼻咽癌细胞发生自噬和凋亡,其机制可能是通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路。

益气解毒颗粒协同顺铂对鼻咽癌移植瘤干预及调节Foxp3/ROR-γt平衡的作用

目的探讨益气解毒颗粒对鼻咽癌移植瘤微环境中调节性T细胞(Treg)主导的免疫耐受的影响,及其与顺铂联合应用的体内抗肿瘤效应。方法采用肿瘤细胞CNE2制备鼻咽癌移植瘤裸鼠模型,观察益气解毒颗粒单用或与顺铂联合使用在体内的抑瘤效应,检测转录因子叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和维甲酸依赖性孤核受体γ(ROR-γt)蛋白表达水平和荷瘤裸鼠血清中IFN-γ、TGF-β、IL-17等的水平。结果益气解毒颗粒组和联合治疗组的荷瘤裸鼠血清中TGF-β和IL-17水平明显低于模型组,IFN-γ水平明显高于模型组和顺铂组,凋亡率明显高于模型组,Foxp3蛋白表达明显升高,ROR-γt蛋白表达明显下降,其中联合治疗组明显优于各药单用组(P<0.01)。结论益气解毒颗粒能有效调节小鼠Treg/Th17的平衡,恢复Treg的功能,增强小鼠化疗期间T细胞的免疫功能,产生抑癌效应,联合顺铂可减轻化疗毒性。

血根碱联用5-氟尿嘧啶对鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨血根碱与5-氟尿嘧啶联合使用对鼻咽癌裸鼠移植瘤细胞自噬与凋亡的影响及机制。方法建立移植瘤模型;Western blot法、TUNEL法、免疫双荧光法检测各组别中自噬和凋亡相关蛋白以及PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白的表达变化。结果相较于模型组,血根碱组、5-氟尿嘧啶组以及联用药物组移植瘤质量明显下降(P<0.05),且联用药物组较之单药组效果更优(P<0.05);Western blot结果显示,与模型组比较,自噬蛋白Beclin1、LC3表达均上调,P62蛋白表达下调,凋亡蛋白cleaved caspase3、cleaved PARP的表达均上调,且联用药物组自噬和凋亡蛋白上调较单药组上调更明显(P<0.05)。联用药物组的p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达明显低于模型组和各单药组(P<0.05);TUNEL检测发现,各药物组的凋亡细胞较模型组明显增多,联合用药组增多最为明显(P<0.05);免疫双荧光结果显示,LC3、caspase3在各药物组中表达有不同程度的升高,其中在联合用药组中表达升高得最为明显(P<0.05)。结论血根碱联用5-氟尿嘧啶可协同抑制体内鼻咽癌移植瘤的生长,并诱导移植瘤发生自噬和凋亡,与PI3K/AKT/mTOR信号通路有着密切联系。