教育部高等学校中医学教学指导委员会“中医诊断学师资培训班” 国家中医药管理局继续教育培训班“中医诊断学研究生教学研讨班”通知(第二轮)

根据教育部高等学校中医教学指导委员会师资培训的安排和国家中医药继教委发〔2007〕1号关于公布2007年度国家中医药管理局中医药继续教育项目的通知精神,中医诊断学师资培训班和中医诊断学研究生教学研讨班(项目编号:270101002)联合开班,由教育部高等学校中医教学指导委员会和全国高等中医教育研究会中医诊断学教学研究会主办,湖南中医药大学中医诊断学国家重点学科承办,具体事项通知如下:

国家教育部中医教学指导委员会培训中心“中医诊断学师资培训班” 国家中医药管理局继续教育培训班“中医诊断学研究生教学研讨班”通知(第一轮)

根据教育部中医教学指导委员会师资培训的安排和国家中医药继教育发[2007]1号关于公布2007年度国家中医药管理局中医药继续教育项目的通知精神,中医诊断学师资培训班和中医诊断学研究生教学研讨班（项目编号：270101002）联合开班，由全国高等中医教育研究会中医诊断学教学研究会主办，湖南中医药大学中医诊断学国家重点学科承办，具体事项通知如下：

关于中医诊断学“标准化病人教学”的若干思考

本文从中医诊断学实践教学的角度,系统阐述了标准化病人的含义、分类,标准化病人剧本编写的主要内容及注意事项,标准化病人的选拔标准和培训过程,中医诊法和疾病辨证标准化病人教学过程及其注意事项,标准化病人在中医诊断教学中的意义及其局限性。

中医药英文期刊重在处理好国际规范与本土特色——以《数字中医药》(英文)创刊实践为例

中医药英文期刊的创办应力求遵循国际惯例,同时立足本土,守正创新,突出特色定位。文章以《数字中医药》(英文)为例,指出在期刊运营模式、开放政策、学术规范、医学期刊伦理、国际推广等方面应遵循国际出版规范与惯例,提出创办中医药英文期刊重在处理好国际规范与本土特色,突破传统医学的限制,遵循科技期刊国际发展规律,为中医药英文期刊加快国际化进程提供参考。

冠心病血瘀证体质的遗传流行病学研究

目的:探讨冠心病血瘀证体质的遗传特征。方法:运用"病例对照"的遗传流行病学家系调查方法,对冠心病血瘀证家系(为观察组)1565人和冠心病非血瘀证家系(为对照组)1553人进行体质调查和分离比、遗传度、遗传模式计算及相关性分析。结果:①冠心病血瘀证先证者及一二级亲属中体质类型均以阳虚质、痰湿质、阴虚质、气虚质所占比例为多;②冠心病血瘀证一二级亲属九种体质类型的遗传度均低于50%。③冠心病血瘀证的发病与主体质存在着相关性(rs=0.879,P<0.05)。结论:冠心病血瘀证患者的主体质均以阳虚质、痰湿质、阴虚质为主;体质因素可以作为影响冠心病血瘀证的一个相关因子,但对于冠心病血瘀证的遗传并不起决定作用。

冠心病血瘀证遗传相关的差异基因筛选及其功能路径分析

目的探讨冠心病(coronary heart disease,CHD)血瘀证遗传相关的差异基因功能及目标通路。方法以家系CHD血瘀证者(A组)及家系CHD非血瘀证者(B组)、家系非CHD血瘀证者(C组)、家系健康人(D组)、非家系CHD血瘀证者(E组)、非家系健康人(F组)为研究对象,应用基因芯片技术比较A组与B、C、D、E组,以及D组与F组的差异基因表达谱;通过基因本体论(geneontology,GO)分析阐释差异基因的分子功能;通过BioCarta及KEGG网站寻找差异基因所在通路,应用超几何分布统计学方法分析筛选出有意义的目标通路,并用实时荧光定量RT-PCR对差异基因进行验证。结果 (1)通过对基因芯片数据的筛选(差异倍数≥3),发现家系CHD血瘀证差异基因表达主要涉及趋化因子、白介素细胞因子、补体系统、基质金属蛋白酶系、成纤维细胞生长因子、内皮细胞黏附因子等。(2)通过相关差异基因(P<0.05)GO分析,找到与CHD血瘀证相关的差异基因的分子功能。(3)经过BioCarta及KEGG通路分析,发现家系CHD血瘀证与遗传相关的差异基因中差异有统计学意义(P<0.05)的目标通路主要涉及到炎症、斑块形成、内皮损伤等方面。经实时荧光定量RT-PCR反应验证了基因芯片准确可靠。结论 CHD血瘀证遗传相关的差异基因与炎症、斑块形成及血管内皮损伤密切相关。

丹龙醒脑方促进大鼠神经干细胞增殖及其机制的研究

目的探讨丹龙醒脑方对大鼠脑缺血再灌注后神经干细胞(NSC)增殖及神经生长因子(NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胶质源性神经营养因子(GDNF)表达的影响。方法 60只SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(3.2mg/kg)、小剂量组(丹龙醒脑方3.7g/kg)、中剂量组(丹龙醒脑方7.48g/kg)、大剂量组(丹龙醒脑方14.8g/kg),每组10只。后5组大鼠大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型。各组大鼠治疗7d后,采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷掺入法检测NSC增殖,用免疫组织化学法检测NGF、bFGF、GDNF表达。结果与假手术组比较,模型组NSC增殖数量显著升高、NGF、bFGF、GDNF表达均显著降低(P<0.05);与模型组比较,小、中、大剂量组NSC增殖数显著升高,中、大剂量组NGF、bFGF、GDNF表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论丹龙醒脑方可能通过促进NGF、bFGF、GDNF表达促进NSC增殖。

不同炮制方法对黄精多糖含量的影响

目的探究湖南本土种植及加工的鸡头黄精、多花黄精采用不同炮制方法对黄精多糖含量的影响。方法超声提取法提取多糖,用Sevage法除去蛋白,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果鸡头黄精经二蒸二晒、四蒸四晒、七蒸七晒、九蒸九晒炮制后,多糖含量分别为7.973%、3.584%、2.845%、2.194%;多花黄精经二蒸二晒、四蒸四晒、五蒸五晒、七蒸七晒炮制后,多糖含量分别为9.602%、3.185%、2.572%、2.043%;精密度良好(RSD=0.274%)、平均回收率99.29%、试验在60 min内稳定性良好(RSD=1.36%)。结论炮制过程蒸晒次数越多,黄精多糖含量越少。

关于中医诊疗规范化的思考

中医学模糊、抽象、不具体的特点阻碍了学科的进一步发展。从重视主诉、名词术语的规范化、临床资料诊断贡献度、创新方证-药症关联模式、弥补经典理论的盲区、发现理论发展偏倚、处理好继承与创新、构建主诉辨证诊疗路径等方面促进中医诊疗的规范化发展,不但可促进以上问题的解决,对于提高中医临床诊疗水平、提升中医服务能力亦具有积极作用。

基于冠心病血瘀证心肌细胞能量代谢网络模型的流平衡分析

目的探讨冠心病(coronary artery heart disease,CHD)急、慢性血瘀证心肌细胞能量代谢的变化特点。方法 (1)运用Flux Explorer软件平台构建起的CHD血瘀证心肌细胞能量代谢网络模型;(2)应用GC-MS技术和血气自动分析仪从健康对照、CHD慢性血瘀证、CHD急性血瘀证三组大鼠模型中取冠状动脉血检测葡萄糖、脂肪酸及血氧含量;(3)检测结果代入网络模型,通过流平衡分析CHD急、慢性血瘀证状态下参数的特点。结果 (1)三组的糖酵解、脂代谢和三羧酸循环均已被激活,但网络运算后各组代谢物的数值则有明显差别,均呈现出健康对照组>CHD慢瘀证组>CHD急瘀证组的趋势。(2)三组心肌细胞能量代谢的血糖、脂肪酸和血氧含量及ATP的产量均呈递减的趋势,这与三组中糖酵解的关键酶(HK、pfk、PK)、三羧酸循环的关键酶(Cs、Icdh、Od)的浓度呈一致性变化。结论 CHD急性血瘀和慢性血瘀不同证候的形成可能与机体内心肌细胞能量代谢的水平密切相关。

养心通脉有效部位方对梗死心肌细胞因子分泌、血管新生及动员MSCs归巢的影响

探讨养心通脉有效部位方(apr-YTF)对梗死心肌细胞因子分泌、血管新生及动员骨髓间充质干细胞(MSCs)归巢的影响。方法:取急性心肌梗死造模成功的SD雄性大鼠32只,随机分为apr-YTF组、香丹注射液组、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)组和模型对照组4组,每组8只;均于造模3h后给予相应药物,连续5d。经masson’s三色染色检测心肌瘢痕组织微小血管密度,免疫组化的方法检测心肌组织中CD34+细胞、Ⅷ因子、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子受体(Flk-1)的含量表达。结果:单个高倍视野下apr-YTF组和rhG-CSF组的心肌毛细血管数较模型组显著增加(P<0.01);与模型组比较,2组的CD34+细胞、Flk-1、bFGF表达显著增加(P<0.01),2组的Ⅷ因子表达亦增加(P<0.05),apr-YTF组的VEGF表达比模型组显著增加(P<0.01),rhG-CSF组的VEGF表达较模型组亦增加(P<0.05)。结论:apr-YTF能促进Ⅷ因子、Flk-1、VEGF、bFGF的分泌,促进血管新生,促进大鼠外周血MSCs归巢于急性梗死的心肌,有利于急性梗死心肌的修复。

卫分证、气分证、营分证Th1/Th2漂移变化规律研究

目的探讨卫分证、气分证、营分证Th1/Th2漂移变化规律,为卫气营血辨证提供客观的实验指标。方法将50例患者按中医辨证分为卫分证组20例,气分证组15例,营分证组15例。另选择体检健康者l6例为健康对照组。用ELISA法检测不同阶段患者血清Th1和Th2细胞因子白细胞介素(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF-β)、γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-5、IL-6水平的变化。结果与正常组比较,卫分证组、气分证组、营分证组IL-2、IFN-γ水平明显升高(P<0.05,P<0.01),气分证组、营分证组TNF-β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10水平显著上升(P<0.01);与卫分证组比较,气分证组IL-2、TNF-β、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10水平显著上升(P<0.05,P<0.01),营分证组TNF-β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10水平显著上升(P<0.01);与气分证组比较,营分证组IL-2、TNF-β、IFN-γ均有下降趋势,IFN-γ下降差异有统计学意义(P<0.01),而IL-4、IL-6、IL-10继续上升(P<0.05,P<0.01)。结论从卫分证到气分证再到营分证病理发展与Th1/Th2漂移密切相关,IL-2、TNF-β、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10的动态变化可作为卫气营血辨证的客观指标之一。

急性化脓性扁桃体炎证候层次与Th1/Th2漂移相关性研究

目的研究急性化脓性扁桃体炎患者不同证候层次外周血Th1/Th2漂移变化。方法通过流式细胞检测技术,对急性化脓性扁桃体炎患者卫分证、气分证、营分证和正常人外周血Th1/Th2细胞进行检测,采用ELISA法测定血清细胞因子IL-4和IFN-γ水平,并比较IFN-γ/IL-4比值。结果与正常对照组比较,急性化脓性扁桃体炎卫分证组Th1、IFN-γ、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05~0.01）;营分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4继续明显升高,Th1/Th2比值却明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05~0.01）。与卫分证组比较,气分证组Th1、Th2、IFN-γ、IL-4显著升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05~0.01）;营分证组Th2、IL-4继续明显升高,Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值明显降低,差异有统计学意义（P〈0.01）。与气分证组比较,营分证组Th1、IFN-γ水平、Th1/Th2、IFN-γ/IL-4比值显著降低,Th2、IL-4显著升高,差异有统计学意义（P〈0.05~0.01）。结论急性化脓性扁桃体炎卫分证、气分证、营分证证候层次变化与Th1/Th2漂移存在相关性。

养心通脉有效部位方动员心肌梗塞大鼠MSCs归巢及对心功能和病理的影响

目的探讨养心通脉有效部位方(active principle region of Yangxing Tongmai Formula,apr-YTF)促进急性心肌梗塞大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)定向归巢及其对心功能和病理的影响。方法将造模成功的大鼠32只,随机分为apr-YTF组、香丹注射液组、重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)组、模型对照组,每组8只,均于造模3h后给予相应药物,连续5d;均于造模后第2天开始腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),连续4d。用PcLab生物医学信号采集处理系统检测记录心功能,masson's三色染色检测梗塞心肌病理,Image-Pro Plus6.0病理图象分析系统测量梗塞区瘢痕面积百分比,免疫组化的方法检测梗塞心肌边缘区的CD34+染色阳性细胞数、Brdu与肌钙蛋白I(cTn I)双染阳性细胞数。结果 rhG-CSF组和apr-YTF组的心功能4个指标较模型组均有显著改善(P<0.05或P<0.01);两组的心肌梗塞边缘区瘢痕组织内可见新生的心肌细胞和血管,恢复的趋势较为明显;两组的心室肌瘢痕面积百分比较模型组和香丹组显著减小(P<0.01);两组大鼠梗塞心肌边缘区CD34+染色阳性的细胞数、Brdu与cTn I双染阳性的细胞数较模型组显著增加(P<0.01),apr-YTF组较rhG-CSF组显著增加(P<0.01)。结论 pr-YTF能促进MSCs归巢并因此而促进心肌细胞和心功能恢复。

养心通脉有效部位方对MSCs移植大鼠急性梗死心肌影响的研究

目的探讨养心通脉有效部位方(apr-YTF)对急性梗死心肌实施骨髓间充质干细胞(MSCs)移植促修复的影响。方法将造模成功的AMI大鼠分为模型对照组、空白对照组、阳性对照组[重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)]和实验观察组(apr-YTF),分别给予MSCs以及相应药物心肌注射,PcLab生物医学信号采集处理系统测定在体心功能,免疫组织化学检测缝隙连接蛋白43(Cx43),RT-PCR检测心脏早期发育基因NKx2.5。结果实验观察组动物的心功能恢复最好;心肌细胞Cx43阳性着色颗粒呈分散样改变,主要分布于端端连接的闰盘区域和侧侧连接的胞膜上,实验观察组的IOD值最高;各组NKx2.5均有一定水平的表达,实验观察组表达最强,而模型对照组则只有极弱的表达。结论 apr-YTF能促进MSCs移植修复急性梗死心肌,改善心功能。

试论上下为纲——八纲之补阙

基于《黄帝内经》以及后世医家关于生理上和病理上气机升降、病位上下、上下病证之诊断、上下分治、中药升降浮沉的论述,认为上下与阴阳、表里、寒热、虚实并列互补,提出增加上下为纲的辨证新思维,补八纲之阙。

骨髓间充质干细胞移植大鼠缺血心肌后GATA-4mRNA的表达

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)移植于大鼠缺血心肌后,心脏早发育基因GATA-4 mRNA的表达。方法设模型组、假手术组和空白对照组,其中模型组采用"冠脉结扎法"建立大鼠急性心肌梗死(AMI)模型。收集从SD雄性大鼠胫骨和股骨骨髓中分离、培养、鉴定后的MSCs,密度调至3×106/100μL悬液,移植于缺血心肌边缘组织的3个位点直接注入共100μL的MSCs细胞悬液,假手术组和空白对照组均在与模型组相同注射部位的3个位点直接注入共100μL的MSCs细胞悬液,28 d后处死大鼠进行相关实验样本处理。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测心肌组织中GATA-4 mRNA的表达。结果 MSCs移植模型组和假手术组的大鼠心肌中存在GATA-4 mRNA的表达;而空白组的心肌中未检出GATA-4 mRNA的表达,对其IOD值半定量分析,模型组高于假手术组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05或<0.01)。结论 MSCs在进入缺血心肌环境后,细胞内的心肌特异转录过程被再次激活,确立了MSCs向心肌细胞分化的方向。

健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织t-PA、PAI-1、Col Ⅳ的影响

目的观察健脾补土法组方对脑缺血/再灌注损伤大鼠t-PA、PAI-1、ColⅣ的影响,探讨其保护神经细胞可能作用机制。方法将72只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、健脾补土方小剂量组、健脾补土方中剂量组、健脾补土方大剂量组,每组12只。采用线栓法制备MCAO模型,治疗7 d后处死,并在大鼠处死前进行神经功能缺损评分,应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定中组织型纤溶酶原激活物(tPA)及组织型纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的变化,运用免疫组化法测定胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ)的含量变化。结果与模型组相比,健脾补土小、中、大剂量组神经功能缺损症状评分减少(P<0.05);健脾补土方小、中、大剂量组t-PA表达明显降低(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中、大剂量组PAI-1表达明显升高(P<0.05或P<0.01);健脾补土方小、中剂量组Col IV表达明显升高(P<0.05)。结论健脾补土法组方能改善脑缺血/再灌注损伤大鼠神经缺损,可能与其下调t-PA及上调PAI-1的表达,从而减少细胞外基质(ECM)的降解,上调ColⅣ的表达有关。

心血瘀阻证心肌微环境基质金属蛋白酶-2,9表达的实验研究

目的:观察基质金属蛋白酶-2、9在心血瘀阻证心肌微环境的变化。方法:建立大鼠急性心梗心血瘀阻证模型,分为假手术组、健康对照组、心虚瘀阻证组,然后用ELISA方法观测其基质金属蛋白酶2、9的表达。结果:基质金属蛋白酶2血瘀阻证表达高于健康对照和假手术组(P<0.05),基质金属蛋白酶9三组间均有差异,其中心血瘀阻证组最高,其次为假手术组、健康对照组(P<0.05)。结论:基质金属蛋白酶-2、9参与心血瘀阻证心肌微环境的变化,是中医证候本质的物质学基础。

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠TLR4表达的影响

目的探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑组织TLR4表达的影响。方法 72只大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,每组按给药后7、14、21 d 3个时间点再各分3组,用免疫组化、Western blot、RT-PCR法检测各组不同时间点TLR4的蛋白和基因表达。结果模型组和补阳还五汤组各时间点TLR4蛋白和mRNA表达均高于假手术组(P<0.05),补阳还五汤组在第7、14天TLR4蛋白表达明显低于模型组,但TLR4mRNA水平在第7天、14天却明显高于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论补阳还五汤通过调节缺血后脑组织TLR4的表达可能是其治疗脑缺血的作用机制之一。