金苓痛风舒微丸抗炎镇痛作用的实验研究

目的探讨金苓痛风舒微丸的抗炎、镇痛作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验观察其抗炎作用;采用冰醋酸致痛小鼠扭体实验、小鼠尾根部加压致痛实验观察其镇痛作用。结果金苓痛风舒微丸可明显抑制二甲苯所致的小鼠耳廓的炎症肿胀(P<0.05);有效抑制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀程度(P<0.05);对醋酸致小鼠扭体反应有明显对抗作用(P<0.05);显著升高小鼠痛阈值。结论金苓痛风舒微丸具有显著的抗炎、镇痛作用。

补肾疗更浸膏延缓老年小鼠卵巢功能衰退的实验研究

目的 研究补肾疗更浸膏延缓老年小鼠卵巢功能衰退作用及其作用机制。方法 选取12∽13月龄自然衰老小鼠60只,随机分为6组,每组10只,即老年空白组,戊酸雌二醇片组（0.00026 g·kg-1）,坤泰胶囊组（1.56g·kg-1）,补肾疗更浸膏低、中、高剂量组（6.5,13.0,26.0 g·kg-1）,另取3月龄小鼠作为青年对照组。末次给药24 h后,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清雌二醇（E2）、促黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）、孕酮（P）含量;取小鼠子宫、卵巢,称质量并计算脏器指数;10%甲醇固定,观察子宫、卵巢病理学改变;采用DNA末端原位标记法（TUNEL）测定小鼠卵巢颗粒细胞凋亡数。结果 补肾疗更浸膏可升高老年小鼠血清E2、P含量（P〈0.05,P〈0.01）,降低FSH、LH含量（P〈0.01）,提高老年子宫、卵巢系数（P〈0.05,P〈0.01）,增加子宫内膜厚度（P〈0.05,P〈0.01）,并可明显增加老年小鼠卵巢各级卵泡数（P〈0.05,P〈0.01）,降低卵巢颗粒细胞凋亡数（P〈0.01）,同时可不同程度改善老年小鼠病变子宫内膜组织结构。结论 补肾疗更浸膏能有效延缓老年雌性小鼠卵巢功能衰退进程,改善其生殖系统功能,其作用机制与调节血液性激素水平,改善病变子宫、卵巢超微结构,抑制卵巢颗粒细胞凋亡有关。

金苓痛风舒微丸抗炎作用及其机制研究

目的研究金苓痛风舒微丸的抗炎作用及其作用机制。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀及角叉菜胶致大鼠足肿胀实验探索金苓痛风舒微丸的抗炎作用。采用腺嘌呤、乙胺丁醇灌胃及关节腔注射尿酸钠复合造模的方法复制大鼠痛风性关节炎模型。将大鼠随机分为正常组,模型组,别嘌醇组(0.036 g·kg-1),痛风定组(0.432g·kg-1),金苓痛风舒微丸高、中、低剂量组(37.8,18.9,9.45 g·kg-1),共7组,每组10只。采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中前炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)及白介素-8(IL-8)的表达。并观察关节滑膜组织病理形态学的改变。结果金苓痛风舒微丸可有效抑制小鼠耳廓炎症肿胀(P<0.05)及大鼠足肿胀(P<0.05,P<0.01)。显著抑制痛风性关节炎大鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-8的表达(P<0.05,P<0.01),减轻大鼠关节滑膜的炎性细胞浸润、充血、肿胀和坏死(P<0.05,P<0.01)。结论金苓痛风舒微丸对急性炎症具有显著的抗炎作用,其对痛风性关节炎的抗炎机制可能是通过抑制前炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-8的表达,进而调控滑膜组织中炎症反应链,从而发挥抗炎作用。

龙丹腰痹宁抗炎镇痛作用及机制研究

目的研究龙丹腰痹宁的抗炎镇痛作用及作用机制。方法二甲苯致小鼠耳肿胀及角叉菜胶致大鼠足趾肿胀实验评价龙丹腰痹宁的抗炎作用;扭体法评价龙丹腰痹宁的镇痛作用;ELISA法检测小鼠血清TNF-α含量以探讨其作用机制。结果灌胃给予龙丹腰痹宁药液0.817、1.640和3.270 g/kg能明显减轻二甲苯所致小鼠耳廓及角叉菜胶所致大鼠足趾肿胀的程度,提高小鼠的痛阈值并降低血清中TNF-α的水平。结论龙丹腰痹宁具有较明显的抗炎镇痛作用,其作用机制与下调TNF-α有关。

龙丹腰痹宁毒理学安全性研究

目的通过急性毒性试验与长期毒性试验验证龙丹腰痹宁的毒理学安全性,为临床用药提供安全参考剂量。方法①急性毒性实验:昆明种小鼠40只,随机分成给药组和对照组,采用最大给药量法测定小鼠口服龙丹腰痹宁最大耐受量;②长期毒性实验:根据药效学有效剂量确定长毒实验的低、中、高剂量组,观察连续灌胃给药12周及停药4周后大鼠的生长发育情况,摄食量并检测血常规、血生化指标和主要脏器脏体系数及常规病理检查。结果小鼠口服龙丹腰痹宁的最大耐受量按生药量计算为427.6 g/kg,相当于成人临床每日口服剂量的523.4倍。连续用药90 d后大鼠一般体征、血液学各项指标均无明显异常。恢复期一个月后各项指标均无明显异常。结论龙丹腰痹宁安全范围较大,在规定剂量下用药是安全可靠的。

妇科千金片对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢NF-κB、IL-6 mRNA表达的影响

妇科千金片是国家中药保护品种,广泛妇科炎症及其它各类慢性炎症,临床疗效确切,但其作用的物质基础及机制尚不十分明确。我们的前期研究发现妇科千金片能促进急性盆腔炎大鼠血清IgA、IgG、IgM的表达,明显降低外周血白细胞总数,使中性粒细胞比例下降而淋巴细胞比例升高[1],这些研究提示妇科千金片的抗炎作用与免疫调节密切相关。近年来。

妇科千金片对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢TNF-α、IL-2 mRNA转录水平的影响

目的观察妇科千金片(千斤拔、单面针、金樱根、穿心莲、功劳木、党参、鸡血藤、当归)对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢细胞因子TNF-α、IL-2 mRNA表达的影响,初步探讨该药抗炎免疫作用的分子机制。方法采用混合菌(大肠杆菌、解脲支原体和金黄色葡萄球菌)接种法建立急性盆腔炎大鼠模型。妇科千金片给药后取大鼠子宫、卵巢,提取总RNA,进行RT-PCR反应,通过光密度扫描进行半定量分析。结果与假手术组相比,模型组TNF-α、IL-2 mRNA表达均上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比,妇科千金片治疗组TNF-α、IL-2 mRNA表达均下降(P<0.05)。结论 妇科千金片的抗炎免疫作用可能是通过降低TNF-α、IL-2 mRNA表达,减轻由细胞炎症因子介导的炎症反应来实现的。

舒胃汤对功能性消化不良大鼠小肠推进功能及CNP/cGMP信号通路的影响

目的探讨舒胃汤对功能性消化不良(FD)模型大鼠小肠推进功能及C-钠尿肽(CNP)/环磷酸鸟苷(cGMP)信号通路的影响及机制。方法取80只Wistar大鼠,按体质量随机分为空白组、模型组、舒胃汤组(30.68 g·kg^(-1))、莫沙必利组(1.37 mg·kg^(-1))。采用改良复合病因方法(慢性束缚应激+过度疲劳+饮食失节+夹尾激怒)复制FD模型,造模结束后,连续灌胃给药14 d。采用碳末法检测小肠推进率;多道生理记录系统检测CNP(1×10-8mol·L-1)对大鼠离体胃窦肌条的收缩抑制率;ELISA法检测胃窦组织中cGMP含量;Western Blot法检测胃窦组织B型钠尿肽受体(NPR-B)蛋白含量;RT-PCR法检测胃窦平滑肌NPR-B mRNA表达。结果与空白组比较,模型组的小肠推进率明显降低(P <0.01),离体胃窦肌条的收缩抑制率明显升高(P <0.01),cGMP蛋白含量、NPR-B蛋白及mRNA表达明显升高(P <0.01)。与模型组比较,舒胃汤组的小肠推进率明显升高(P <0.05),离体胃窦肌条的收缩抑制率明显降低(P <0.01),cGMP蛋白含量、NPR-B蛋白及mRNA表达明显降低(P <0.05)。结论舒胃汤可有效改善FD模型大鼠胃肠功能低下状态,其机制可能与下调CNP/cGMP信号通路中CNP受体蛋白NPR-B表达及关键蛋白cGMP含量有关。

妇科千金片对慢性盆腔炎模型大鼠卵巢组织caspase-3和caspase-8表达的影响

目的建立SD大鼠慢性盆腔炎模型,观察妇科千金片对大鼠慢性盆腔炎模型中卵巢组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-8(caspase-8)表达的影响,探讨妇科千金片治疗慢性盆腔炎的作用机制。方法采用混合菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及解脲脲原体)接种法,建立慢性盆腔炎模型,随机分成妇科千金片低、中、高(0.52,1.04和2.08g·kg-1)剂量组,中药妇炎康对照组(妇炎康0.41g·kg-1),假手术组、模型组和空白组7组。药物治疗后,取卵巢组织,运用免疫细胞化学法观察caspase-3和caspase-8表达情况。结果治疗21d后,与模型组比,妇科千金片低剂量组caspase-3蛋白光密度值升高,具有显著性差异(P<0.05),妇科千金片中、高剂量caspase-3蛋白光密度值明显升高,具有非常显著性差异(P<0.01);与模型组比,妇科千金片低、中、高剂量caspase-8蛋白光密度值明显升高,具有非常显著性差异(P<0.01)。结论妇科千金片可能通过升高caspase-3、caspase-8蛋白的表达,引发caspase级联反应,促使炎性细胞凋亡,从而减轻卵巢组织炎性损害。

金苓痛风舒微丸对高尿酸血症小鼠血尿酸、肌酐、尿素氮及黄嘌呤氧化酶活性的影响

目的研究金苓痛风舒微丸对高尿酸血症小鼠的血尿酸(blood uric acid,BUA)、肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活性的影响,探讨其治疗痛风的机制。方法采用化学诱导剂氧嗪酸钾盐腹腔注射建立高尿酸血症小鼠模型,药物组分别灌服不同剂量金苓痛风舒微丸,1日1次,连续7d。末次给药1h后,取血,分离血清,采用ELISA法测定小鼠血清BUA、Cr和BUN;取肝脏组织检测XOD的活性。结果金苓痛风舒微丸高、中剂量能显著地降低高尿酸血症小鼠BUA、Cr和BUN的水平(P<0.01),高剂量显著抑制肝脏XOD的活性(P<0.01),中剂量也可明显降低XOD活性(P<0.05)。结论金苓痛风舒微丸的作用机制可能是通过增强肾血流量以及抑制尿酸的分解协同完成的。

妇科千金片对大鼠慢性盆腔炎模型输卵管组织Caspase-3和Caspase-8表达的影响

目的:通过观察妇科千金片对SD大鼠慢性盆腔炎模型中输卵管组织Caspase-3蛋白和Caspase-8蛋白表达影响,深入探讨妇科千金片治疗慢性盆腔炎的作用机制。方法:采用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及解脲脲原体混合菌接种法,建立慢性盆腔炎模型,随机分成七组:空白组,模型组,假手术组,中药妇炎康(0.41g·kg-1)对照组,和妇科千金片低剂量组(0.52g·kg-1)、中剂量组(1.04g·kg-1)、高剂量组(2.08g·kg-1)。经药物治疗后,解剖大鼠取输卵管组织,运用免疫细胞化学法观察Caspase-3蛋白和Caspase-8蛋白表达情况。结果:治疗21d后,与模型组比,妇科千金片低剂量组Caspase-3蛋白光密度值升高,具有明显差异(P<0.05),妇科千金片中、高剂量Caspase-3蛋白光密度值明显升高,具有显著性差异(P<0.01);与模型组比,妇科千金片低、中、高剂量Caspase-8蛋白光密度值明显升高,具有显著性差异(P<0.01)。结论:妇科千金片可能通过升高Caspase-3蛋白和Caspase-8蛋白的表达,引发Caspase级联反应,促使炎性细胞凋亡,从而减轻输卵管组织炎性损害。

补肾疗更浸膏对去势更年期模型大鼠神经内分泌功能失调的作用

目的研究补肾疗更浸膏对去势更年期模型大鼠神经内分泌功能失调的治疗作用及其作用机制。方法通过手术摘除雌性SD大鼠双侧卵巢复制更年期综合征模型。模型成功后,将其随机分为空白组,假手术组,模型组,戊酸雌二醇片组,坤泰胶囊组,补肾疗更浸膏低、中、高剂量组。末次给药24 h后,腹主动脉取血ELISA法测定血清雌二醇(E2)、促性腺激素释放激素(GnR H)、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、睾酮(T)水平;取下丘脑测定多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)水平;取双侧子宫称湿重计算脏器指数;于10%甲醛溶液中固定,观察其病理学改变。结果补肾疗更浸膏可有效升高模型大鼠血清E2(P<0.05,P<0.01)水平,降低GnR H(P<0.05,P<0.01)、LH(P<0.05,P<0.01)、FSH(P<0.05)、T(P<0.05,P<0.01)水平,有效降低下丘脑单胺类神经递质DA(P<0.05,P<0.01)、NE(P<0.05,P<0.01)、5-HT(P<0.05,P<0.01)、5-HIAA(P<0.05,P<0.01)水平,并可升高模型大鼠子宫系数(P<0.05),增加子宫内膜厚度(P<0.05)。结论补肾疗更浸膏可通过调节血液性激素与下丘脑单胺类神经递质水平,增强子宫功能,改善去势模型大鼠下丘脑-垂体-内分泌轴与植物神经功能的紊乱状态,从而有效稳定机体内环境,改善更年期神经内分泌系统功能,缓解更年期症状。

补肾化瘀方对多囊卵巢大鼠血脂水平的影响

目的观察补肾化瘀方对多囊卵巢(PCO)大鼠血脂代谢的影响。方法采用来曲唑灌胃制作PCO大鼠模型,造模成功后,分别给予不同剂量补肾化瘀方和炔雌醇环丙孕酮片灌胃,观察大鼠胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)的变化。结果 PCO大鼠TC、HDL、LDL含量明显高于正常组,与正常组相比,差异有统计学意义(P<0.05);补肾化瘀方中、低剂量组和炔雌醇环丙孕酮片能不同程度地改善PCO大鼠血脂成分的病理改变。结论补肾化瘀方能改善PCO大鼠血脂代谢异常。

妇科千金片对慢性盆腔炎大鼠血清炎性细胞因子表达的影响

目的:研究妇科千金片对慢性盆腔炎大鼠血清炎性细胞因子表达的影响。方法:采用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及解脲脲原体混合菌接种法建立慢性盆腔炎模型。模型成功后,随机分成妇科千金片低、中、高(0.52,1.04,2.08 g.kg-1)剂量组,中药妇炎康对照组(妇炎康0.41 g.kg-1),假手术组,模型组和空白组7组。治疗21 d后,取外周血及子宫组织,采用ELASA法检测血清白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素10(IL-10)表达情况,并取子宫组织观察病理学改变。结果:肉眼观察:与模型组比较,妇科千金片低、中、高剂量组子宫肿胀、充血现象明显减轻,结构较清晰。光镜下观察:妇科千金片低、中、高剂量能抑制大鼠子宫内膜炎症细胞增生,促进其病变上皮细胞增生修复,减轻浆膜充血水肿。与正常组比较,模型组血清IL-1β,TNF-α明显升高(P<0.01),血清IL-10明显降低(P<0.01)。与模型组比较,妇科千金片高、中剂量血清IL-1β,TNF-α均明显降低(P<0.01,P<0.05),血清IL-10明显升高(P<0.01);低剂量血清IL-1β和IL-10分别降低或升高(P<0.05)。结论:妇科千金片可促进受损组织与细胞的形态结构及其生理功能的恢复。其作用机制可能与减少促炎症因子IL-1β,TNF-α的释放,促进抗炎症因子IL-10表达,调节Th1/Th2平衡有关。

妇科千金片对急性盆腔炎模型大鼠外周血细胞及盆腔组织病理改变的影响

目的:观察妇科千金片对急性盆腔炎大鼠外周血血细胞及子宫、卵巢、输卵管组织病理改变的影响,探讨该药治疗盆腔炎的作用机制。方法:采用混合菌(大肠杆菌、解脲支原体和金黄色葡萄球菌)接种法建立急性盆腔炎大鼠模型,造模成功后随机分别为空白组、假手术组、模型组、妇科千金片低、中、高剂量组(0.21,0.63,1.89 g.kg-1)、中药对照组(妇炎康1.23 g.kg-1)及西药对照组(罗红霉素82.74 mg.kg-1)。药物治疗21 d后取外周血及盆腔组织,生化分析仪分析血液中常规成分变化并观察大鼠盆腔组织的病理改变。结果:①与空白组和假手术组相比,模型组白细胞总数、中性粒细胞比例升高而淋巴细胞比例下降,且盆腔组织出现明显炎症改变。②与模型组相比,各治疗组白细胞总数、中性粒细胞比例下降而淋巴细胞比例升高,且盆腔组织病变明显改善。③与西药对照组及中药对照组相比,妇科千金片各治疗组白细胞数无统计学差异,但对盆腔病变改善情况优于中药对照组。④血红蛋白含量、血小板、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞各组间比较无差异。结论:妇科千金片对大鼠免疫细胞有显著影响并对盆腔组织有一定保护作用,其抗炎作用的机制可能是通过提高机体免疫力从而抑杀进入体内病原菌而实现。

补肾疗更浸膏对去势更年期模型大鼠下丘脑β-内啡肽与自由基代谢的影响

目的:研究补肾疗更浸膏对去势更年期模型大鼠下丘脑β-内啡肽含量与自由基代谢功能的影响,并探讨作用机制。方法:手术摘除雌性SD大鼠双侧卵巢复制更年期综合征模型,阴道细胞涂片检查模型成功后,将其随机分为正常组,假手术组,模型组,戊酸雌二醇片组(0.18 mg·kg-1),坤泰胶囊组(1.08 g·kg-1),补肾疗更浸膏低、中、高剂量组(4.5,9,18 g·kg-1),每组10只。除正常组、假手术组与模型组小鼠ig给予等量蒸馏水外,各组小鼠按照剂量要求ig给药,每天1次,连续4周。末次给药24 h后,腹主动脉取血,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性与丙二醛(MDA)含量,取下丘脑测定β-内啡肽(β-EP)含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清SOD,GSH-Px活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01),下丘脑β-EP含量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,补肾疗更浸膏高、中剂量组大鼠血清SOD,GSH-Px活性明显升高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01,P<0.05),下丘脑β-EP含量明显升高(P<0.05);补肾疗更浸膏低剂量组大鼠血清GSH-Px活性明显升高(P<0.05)。结论:补肾疗更浸膏可通过调节去势大鼠下丘脑β-EP水平调控下丘脑-垂体-卵巢轴功能;并通过调节血液中SOD,GSH-Px活性及MDA含量增强去势大鼠抗氧化能力,起到延缓更年期氧化衰老进程的作用。