补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠卵泡凋亡调控基因(Bcl-2/Bax)蛋白的影响

目的:研究补肾活血方对卵巢早衰(POF)小鼠卵泡凋亡调控相关基因的表达,为临床中医药预防和治疗卵巢早衰提供思路。方法:以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠建立免疫性POF模型。以补肾活血方低、中、高剂量进行治疗,设倍美力为对照,免疫组化SABC法检测卵泡凋亡调控基因(Bcl-2/Bax)蛋白表达变化。结果:Bcl-2蛋白质表达空白对照组、补肾活血方各剂量组、倍美力组明显高于模型组(P<0.05),Bax蛋白质表达空白对照组、补肾活血方各剂量组、倍美力组均明显低于模型组(P<0.05)。结论:补肾活血方可能通过影响凋亡调控基因(Bcl-2/Bax)蛋白表达变化,调节免疫反应,抑制抗体聚集,阻抑卵泡异常凋亡,从而改善卵巢功能。

知柏地黄汤对解脲支原体感染大鼠生精细胞凋亡及Caspase-3、Caspase-9表达的影响

目的观察知柏地黄汤对解脲支原体(UU)感染大鼠生精细胞凋亡及对细胞凋亡线粒体调控效应因子Caspase-3、Caspase-9表达的影响。方法从60只雄性SD大鼠中随机抽取45只,经膀胱注射造成UU感染动物模型,剩余15只作为假手术组。UU感染模型动物再随机分成模型组、美满霉素治疗组和知柏地黄汤治疗组,于接种后10d开始经灌胃给药,模型组和假手术组予生理盐水灌胃,美满霉素治疗组和知柏地黄汤治疗组分别予相应药物灌胃,连续灌胃21天后处死动物,检测各组生精细胞凋亡率、Caspase-3与Caspase-9表达水平和生精细胞超微结构改变。结果与模型组比较,假手术组、美满霉素治疗组和知柏地黄汤治疗组在UU培养阳性率、生精细胞凋亡率、Caspase-3、Caspase-9表达水平差异均有统计学意义(P<0.05),但美满霉素治疗组与知柏地黄汤治疗组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 UU感染可致大鼠生精细胞凋亡增加,知柏地黄汤能有效抑制UU的生长、繁殖,具有抗UU作用,知柏地黄汤治疗UU感染、提高精液质量的机制之一是通过调节细胞凋亡效应因子Caspase-3、Caspase-9表达,从而抗细胞凋亡。

道地药材湘西龙山百合对慢性应激抑郁模型小鼠脑内5-HT表达影响的研究

目的观察百合煎剂对抑郁模型小鼠行为学和脑组织5-HT神经递质的影响,探讨其抗抑郁作用机理。方法将雄性小鼠[体质量平均(20g±2g)]72只随机分为空白对照组、模型组、阳性对照(文拉法辛)组、百合煎剂高、中、低剂量组,每组12只。采用孤养结和慢性不可预见性温和刺激制备抑郁小鼠模型。通过体质量增长变化、敞箱实验,评定百合煎剂对慢性应激抑郁模型小鼠的行为学改变,并用免疫组化测定小鼠脑内5-HT神经递质的含量。结果模型大鼠出现了明显的行为学异常,脑内5-HT的含量与正常组有显著差异,百合煎剂高剂量组可显著提高抑郁大鼠的敞箱实验评定、脑内5-HT的含量,其疗效与西药文拉法辛相当。结论孤养结合慢性不可预见性的温和刺激可制备比较理想的抑郁症模型,百合煎剂的抗抑郁作用可能与增加脑内5-HT含量有关。

左归降糖舒心方对转基因2型糖尿病MKR鼠心肌损伤的保护作用

目的研究左归降糖舒心方对转基因2型糖尿病MKR鼠心肌损伤的保护作用。方法以MKR鼠为研究对象,ig左归降糖舒心方对其进行30 d治疗,设野生C57BL/6鼠同期对照。用透射电镜观察小鼠心肌形态学改变;比色法测定心肌中丙二醛(MDA)的量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性;全自动生化分析仪检测心功能指标肌酸激酶同工酶(CKMB)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果经左归降糖舒心方治疗后,MKR鼠心肌组织形态学病变减轻,心肌细胞线粒体嵴部分消失,肌纤维排列较整齐;心肌组织MDA量下降(P<0.05、0.01),SOD活性升高(P<0.01),且呈剂量依赖性;血清CKMB和LDH活性下降(P<0.05、0.01),且呈剂量依赖性。结论左归降糖舒心方可通过抗脂质过氧化,对MKR转基因2型糖尿病MKR鼠心肌产生保护作用。

左归降糖舒心方对高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响

目的探讨左归降糖舒心方对高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠糖脂代谢及炎症反应的影响。方法用左归降糖舒心方干预治疗高脂饮食转基因2型糖尿病MKR小鼠,采用电化学法测定空腹血糖浓度,采用全自动生化分析仪检测血脂和炎症因子超敏C反应蛋白(hs-CRP),采用ELISA法检测血清胰岛素与肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果高脂饲料喂养的MKR小鼠空腹血糖高于MKR组,但无统计学意义(P>0.05);血清胰岛素、血脂(TC、LDL-C、HDL-C)、血清hs-CRP和TNF-α水平高于MKR组(P<0.01),而三酰甘油(TG)下降,低于MKR组(P<0.01)。经左归降糖舒心方或文迪雅干预治疗后,除左归降糖舒心方低剂量组血糖和hs-CRP下降不显著(P>0.05),其他各组MKR小鼠血糖、血清胰岛素、TG、血清hs-CRP和TNF-α水平显著下降(P<0.05、0.01),TC和LDL-C下降无统计学意义(P>0.05);左归降糖舒心方高剂量组HDL-C显著上升(P<0.01),而文迪雅组升高不显著(P>0.05)。左归降糖舒心方作用呈剂量依赖性。结论左归降糖舒心方能调节高脂饮食MKR小鼠糖脂代谢、减少炎症因子的产生、保护血管、降低糖尿病并发血管病变的风险。

知柏地黄汤对解脲支原体感染大鼠生精细胞TRPV1、TRPV5表达的影响

目的观察知柏地黄汤对解脲支原体（Ureaplasma urealyticum,UU）感染大鼠精液及生精细胞瞬时受体电位香草酸亚型（transient receptor potential family vanilloid subtype,TRPV）1、TRPV5表达的影响,探讨UU感染导致不育症的病理机制及知柏地黄汤的干预作用。方法 4～5月龄SD大鼠60只,随机抽取45只,经膀胱接种UU悬液,建立UU睾丸感染动物模型。剩余15只同步注射生理盐水作为正常对照组,UU感染模型大鼠再随机分成模型对照组、阿奇霉素组、知柏地黄汤组,每组15只。知柏地黄汤组给予知柏地黄汤1g/（kg·d）灌胃,阿奇霉素组给阿奇霉素混悬液0.105 g/（kg·d）灌胃,正常对照组、模型对照组给予等剂量生理盐水灌胃。各组给药均每日1次,连续给药21天。处死大鼠后取睾丸、附睾组织,比较各组UU阳性率;采用机械分离法分离精子细胞,应用彩色精子动态检测系统进行精子活力运动参数测定;采用实时定量PCR法测定生精细胞TRPV1、TRPV5 m RNA表达;采用VVestern blot法检测生精细胞TRPV1、TRPV5蛋白表达。结果模型对照组UU阳性率[86.7（13门5）]明显高于正常对照组（0.0%）（P〈0.05）,而知柏地黄汤组[33.3%（5/15）]及阿奇霉素组[26.7%（4/15）]均较模型对照组降低（P〈0.05）。与正常对照组比较,模型对照组大鼠a及b级精子减少,直线速度、平均速度降低,生精细胞TRPV1、TPRV5 mRNA和蛋白表达下降,差异有统计学意义（P〈0.01）。与模型对照组比较,知柏地黄汤组和阿奇霉素组a及b级精子增多,直线速度、曲线速度及平均速度提高,TRPV1、TRPV5 mRNA和蛋白表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。与阿奇霉素组比较,知柏地黄汤组a及b级精子增多,曲线速度、平均速度提高,TRPV1、TRPV5mRNA和蛋白表达水平升高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。结论知柏地黄汤具有抗UU感染、提高大鼠精液质量作用,可能与其上调大鼠生精细胞TRPV1、TRPV5 mRNA及蛋白表达相关。