2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的中医药研究现状

随着肥胖和2型糖尿病发病率的增加,糖尿病并发非酒精性脂肪肝（以下简称脂肪肝）也明显增加,肝内的脂肪沉积会影响肝脏的正常功能,加重糖代谢紊乱,形成恶性循环.本文通过查阅近五年以来文献资料,就糖尿病脂肪肝在中医病因病机、治疗以及问题和展望等三个方面的现状进行综述.

从临床角度论中医的优劣及临床学科的发展

中医学是在中国古代人文哲学与自然科学双重背景下形成的我国特有的医学科学．是与西医学完全不同的另一种原创性复杂性医学科学。中医学既是我国古代的一大发明创造，又是当代对世界的重大贡献。虽然人们常说中医学有许多优势与特色（特色不等于优势），如辨证论治、宏观整体论、系统论、阴阳和合的恒动观、形神统一观、复方治疗、天然药物与非药物疗法等等。

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子及其受体Flk1的影响

目的探讨补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Fetal liver kinase1,Flk1)的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组、补阳还五汤组,大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血模型,采用免疫组织化学法和酶联免疫法检测各组动物脑内VEGF、Flk1的表达和蛋白水平,同时评价动物神经功能。结果在正常大鼠脑内有少量VEGF和Flk1阳性细胞,脑缺血后VEGF和Flk1阳性细胞增加;与模型组比较,尼莫地平、补阳还五汤均能改善模型大鼠的神经功能缺失症状,增强VEGF和Flk1的表达,提高VEGF蛋白水平(P<0.05);于7、14d补阳还五汤作用强于尼莫地平(P<0.05)。结论补阳还五汤增强大鼠局灶性脑缺血后VEGF及Flk1的表达和提高VEGF蛋白水平,是其抗脑缺血的可能作用机制之一。

首次换液时间对贴壁法培养骨髓间充质干细胞纯度及增殖的影响

目的:观察不同时间首次换液对贴壁法培养骨髓间充质干细胞形态和表面标志物表达的影响。方法:实验于2005-09/2006-12在湖南中医药大学内科实验室完成。实验材料:三四周龄昆明种小鼠由湖南中医药大学实验动物室提供(许可证号:医动字第20-002号)。实验方法:无菌条件下分离小鼠股骨,以低糖DMEM培养液冲出骨髓,1000r/min离心10min,去除脂肪和上清液,DMEM重悬,洗涤细胞,同样条件下离心,弃上清液,将获得的骨髓间充质干细胞用含体积分数为0.15胎牛血清、105U/L青霉素G、100mg/L链霉素的低糖DMEM完全培养基重悬沉淀,以1×108L-1接种于24孔板,置于37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养。第1组于24h全量换液,第2组于3d全量换液,第3组于5d全量换液。比较骨髓间充质干细胞在原代培养24h、3d、5d首次换液后细胞形态、生长曲线和表面标志物表达。结果:①骨髓间充质干细胞形态:原代培养24h换液,可见少量贴壁细胞,形态不规则。原代培养3d首次换液,可见较多贴壁细胞,并形成细胞团,细胞为椭圆形、短梭形。原代培养5d换液,可见明显集落形成,贴壁细胞量多,细胞呈梭形。②骨髓间充质干细胞生长曲线:原代培养24h首次换液,骨髓间充质干细胞生长较缓慢,对数生长期晚;原代培养3d首次换液,骨髓间充质干细胞增殖速度快,对数生长期早;原代培养5d首次换液,骨髓间充质干细胞前6d生长速度较快,6d后生长渐缓慢。③骨髓间充质干细胞表面抗原:三组间比较CD44、CD45阳性表达率差异均具有显著性意义[24h首次换液:(88.13±1.60)%,(26.25±2.60)%;3d首次换液:(85.21±1.80)%,(29.37±1.30)%;5d首次换液:(79.85±1.50)%,(36.54±1.20)%,P<0.01]。结论:不同时间首次换液对贴壁法骨髓间充质干细胞的生长有影响,单从细胞纯度来考虑,24h首次换液较为理想,从细胞生长情况和纯度综合考虑,3d首次换液较为理想。

神经干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响

目的探讨神经干细胞移植对局灶性脑缺血大鼠神经功能的影响。方法分离培养新生大鼠海马神经干细胞,BrdU进行标记。采用大脑中动脉阻塞法复制脑缺血模型,动物于造模3d后侧脑室注射标记细胞,分别于1、7、14和28d处死动物,观察动物神经功能和移植细胞存活情况。结果神经干细胞能移行至缺血部位并存活,移植后缺血大鼠神经功能明显得到恢复,在14、28d与模型组差异有显著性。结论神经干细胞移植能促进局灶性脑缺血大鼠神经功能的恢复,是中风治疗的有效方法。

脑得健方对大鼠局灶性脑缺血后神经功能及梗死面积的影响

目的探讨脑得健方对大鼠局灶性脑缺血后神经功能及脑梗死面积比的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、脑得健方高、中、低剂量组,每组20只,大脑中动脉线栓法复制局灶性脑缺血模型,于手术后3 d和7 d评价其神经功能,每组随机取5只做TTC并计算梗死面积比,5只计算大脑干湿重比。结果脑缺血后模型大鼠有神经功能障碍、出现大面积梗死和组织水肿,治疗7 d后,脑得健方各剂量和补阳还五汤均能改善模型大鼠的神经功能缺失症状,减小梗死面积,减轻脑组织水肿,分别与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论脑得健方和补阳还五汤均能改善模型大鼠的神经功能缺失症状,减少梗死面积,减轻脑组织的水肿,药物以中剂量最佳。

肝脾相关的现代生物学基础探讨

藏象学说是中医学的理论基石,脏腑相关理论是藏象学说的重要内容,肝脾相关是中医学五脏相关理论的重要组成。回顾整理中医肝脾相关的理论内涵,结合现代对肝、脾藏象本质研究成果,将现代医学脑-肠互动理论引入肝脾相关的研究,提出了肝脾相关理论与脑肠轴学说的关联假说。

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑内神经细胞黏附分子表达的影响

目的:探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑内神经细胞黏附分子(NCAM)表达的影响。方法:采用大脑中动脉阻塞法复制脑缺血模型,动物随机分为正常组、假手术组、模型组和补阳还五汤组,各组分别给予不同处理,分别于12h,1,3,7,14d处死动物,采用免疫组织化学法观察NCAM的表达。结果:在正常脑内有少量NCAM阳性细胞,缺血后表达增加,于术后第3天达高峰,补阳还五汤组能显著提高NCAM的表达,在第7、14天模型组与补阳还五汤组差异有显著性(P<0.01)。结论:补阳还五汤增强脑缺血后NCAM的表达是其促进神经再生和功能恢复的可能机制之一。

加味丹参饮对血瘀证兔心肌缺血再灌注损伤的影响

目的探讨加味丹参饮对血瘀证兔心肌缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机制。方法家兔60只,随机分为空白组、血瘀证组、IRI组、预处理组、丹参组、加味丹参饮组,每组10只。建立血瘀证兔IRI模型,采用加味丹参饮对该模型进行干预,采用全自动生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同功酶(CK-MB)的水平变化,末端探针标记法观察心肌细胞凋亡,透射电镜观察心肌细胞超微结构。结果 IRI组LDH和CK-MB水平明显升高,心肌细胞凋亡显著增加,与空白组比较差异具有统计学意义(P<0.01);加味丹参饮组可以降低LDH和CK-MB水平,抑制心肌细胞凋亡,与IRI组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。电镜观察显示,加味丹参饮可以有效改善心肌IRI时心肌细胞的超微结构。结论加味丹参饮能有效减少心肌IRI时心肌酶外漏,抑制心肌细胞凋亡,有效保护心肌细胞超微结构,这是其保护心肌IRI作用机制之一。

超微白参对脾虚小鼠小肠上皮细胞蛋白质组的比较研究

目的:探讨白参超微饮片与其传统饮片的量效关系,了解白参对脾虚小鼠小肠上皮细胞蛋白质组调节的作用靶点。方法:选用昆明种小鼠120只,雄雌各半,利血平法复制动物模型,随机分为正常、脾虚模型、白参传统汤剂组、超微白参等剂量组、1/2剂量组、1/4剂量组,造模成功后分别灌服相应供试液,用双向凝胶电泳技术分离蛋白质,改进的考染法染色,以PDQuest软件分析图谱,用MALDI-TOF-MS进行质谱分析。结果:在回调点数、回调率、回调到正常点数、回调正常率几方面,超微白参1/2剂量组、超微白参等剂量组与白参传统汤剂组相近,超微白参1/4剂量组则低于白参传统汤剂组,但其差异尚未显示出统计学意义。结论:超微白参1/2剂量具有与白参传统汤剂相同的健脾疗效;白参健脾是通过多途径的、多靶点来实现的,主要针对小肠上皮细胞第3、4、10、20、23、27、28、31号蛋白点的调节达到健脾作用。

降糖益肾方对高脂饲养MKR鼠糖代谢、肾功能的影响

目的观察降糖益肾方干预MKR转基因2型糖尿病小鼠的血糖代谢、尿微量白蛋白(UmAlb)、β2微球蛋白(β2-MG)及血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的变化。方法取MKR小鼠(12周龄)40只经鉴定后,随机分为MKR鼠组、MKR鼠高脂组、降糖益肾方组、糖适平合用贝那普利对照组(简称西药组),每组10只,另设10只同周龄C57小鼠为空白对照组。MKR鼠组、空白组予以基础饲料喂饲,MKR鼠高脂组、降糖益肾方组、西药组予以高脂饲料喂饲。降糖益肾方组以62.4 g/kg浓度,西药组给以糖适平9.09 mg/kg、贝那普利3.04 mg/kg浓度灌胃,连续给药30 d,MKR鼠组、MKR鼠高脂组和空白组以等容量的蒸馏水灌胃。采用电化学法检测血糖,生化法检测血清BUN及Cr,双抗体夹心ELISA法分别检测血胰岛素、尿UmAlb及β2-MG含量。结果 MKR高脂组小鼠具有高空腹血糖,显著增高的胰岛素、血清BUN、Cr及尿UmAlb、β2-MG水平,与MKR鼠组比较,差异具有统计学意义(P<0.01)。给药30 d后,与MKR高脂组比较,降糖益肾方组小鼠的血糖水平、血清BUN、Cr及尿UmAlb、β2-MG的含量均显著下降,高胰岛素血症得到改善,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);且降糖益肾方优于或与西药组作用相当。结论降糖益肾方能显著改善高脂喂饲的MKR鼠空腹血糖,改善高胰岛素血症,降低其血清BUN、Cr及尿UmAlb、β2-MG的含量,改善高脂喂饲的MKR鼠的早期肾损伤,从而延缓高脂喂饲的MKR鼠肾脏病变的进一步发展。

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠血管新生的影响

目的探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠血管新生的影响。方法采用大脑中动脉线栓法建立右侧局灶性脑缺血大鼠模型,将动物随机分为正常组、假手术组、模型组、中药组、重组人血管内皮抑制素(ED)组和中药+ED组,腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷,给予不同处理,分别于1、7、14天和28天处死动物,采用免疫组织化学法观察血管新生情况。结果正常脑内存在一定的5-溴脱氧尿嘧啶核苷、血管性血友病因子阳性细胞,脑缺血后表达迅速增加,7天达高峰,然后逐渐下降;ED组5-溴脱氧尿嘧啶核苷、血管性血友病因子阳性细胞数量明显少于同期各组(P<0.05);补阳还五汤可显著增强5-溴脱氧尿嘧啶核苷、血管性血友病因子的表达,在第7天和14天时明显多于其它各组(P<0.05),7天时补阳还五汤+ED组5-溴脱氧尿嘧啶核苷、血管性血友病因子阳性细胞数多于模型组和ED组(P<0.05),但少于补阳还五汤组(P<0.05)。用药7天和14天,补阳还五汤组降低神经功能积分作用与其它用药组比较差异有统计学意义(P<0.05)。补阳还五汤+ED组降低积分作用强于模型组和ED组(P<0.05),但较补阳还五汤组作用弱(P<0.05)。结论补阳还五汤可促进局灶性脑缺血大鼠缺血区血管新生,并可部分拮抗重组人血管内皮抑制素阻断的血管新生,提示其可能通过其他途径影响血管新生。

全蝎纯化液对实验性动脉血栓形成血栓素B_2和6酮-前列腺素F_(1α)的影响

目的观察全蝎纯化液对新西兰白兔颈总动脉血栓形成血栓素B_2(TXB_2)、6酮-前列腺素F1_α(6-Keto-PGF_(1α))的作用。方法采用随机数字表法将50只健康新西兰白兔分成5组:空白组、模型组、全蝎纯化液大剂量组(20 mg/kg)、全蝎纯化液中剂量组(10 mg/kg)和全蝎纯化液小剂量组(5 mg/kg)。耳缘静脉注射全蝎纯化液(空白、模型组注射同等体积的生理盐水)后,采用H_2O_2损伤新西兰白兔颈总动脉制备血栓模型,造模2 h后,采血,称血栓质量、ELISA法检测血浆TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)的含量。结果 (1)全蝎纯化液大、中、小剂量组血栓质量比均明显低于模型组[(0.39±0.17)mg/mg、(0.52±0.21)mg/mg、(0.71±0.18)mg/mg比(1.68±0.15)mg/mg,均P<0.01]。(2)与模型组比较,全蝎纯化液大、中、小剂量组均能拮抗TXB_2含量升高[(98.7±23.5)ng/L、(127.6±24.6)n/L、(139.2±31.5)ng/L比(213.5±48.3)ng/L],能抑制6-Keto-PGF_(1α)含量降低[(65.4±21.3)ng/L、(49.8±11.5)ng/L、(41.2±9.6)ng/L比(26.3±6.1)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.01)。结论全蝎纯化液能明显降低血浆TXB_2含量、增加血浆6-Keto-PG_(1α)含量,提示全蝎纯化液作用机制可能与维持血浆TXB_2和6-Keto-PGF_(1α)平衡,从而抑制动脉内膜受损后血栓形成有关。

加味丹参饮对血瘀证心肌缺血再灌注损伤家兔内皮细胞保护作用研究

目的:研究加味丹参饮对心肌缺血再灌注损伤(IRI)血瘀证兔内皮功能及内皮细胞超微结构影响,以探讨其对心肌IRI保护作用机制。方法:家兔60只,随机分为:空白组、血瘀证组、IRI组、预处理组、丹参组和加味丹参饮组,每组10只。建立血瘀证兔IRI模型,以加味丹参饮对该模型进行干预,采用放免法检测各组血浆ET-1和6-酮-PGF1a水平变化,透射电镜观察内皮细胞超微结构。结果:与空白组比较,IRI组ET-1水平明显升高,6-酮-PGF1a水平降低(P<0.01);与IRI组比较,加味丹参饮组可以降低ET-1水平,提高6-酮-PGF1a水平(P<0.01)。电镜观察显示加味丹参饮可以有效的改善心肌IRI时内皮的超微结构。结论:加味丹参饮能改善缺血再灌注损伤兔内皮功能,有效保护冠状动脉内皮细胞超微结构,从而对缺血再灌注损伤的心肌具保护作用。

从脾论治肝硬化腹水的临证探析

临床从脾论治肝硬化腹水有良好的疗效,本文试阐述从脾论治的理论基础、证治特点和临床运用。

加味丹参饮对心肌缺血再灌注损伤血瘀证兔肿瘤坏死因子α和白细胞介素-2的影响

目的研究加味丹参饮对心肌缺血再灌注损伤(IRI)血瘀证兔肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-2(IL-2)的影响,探讨对心肌IRI的保护作用机制。方法家兔60只,随机分为A组(空白组)、B组(血瘀证组)、C组(IRI组)、D组(预处理组)、E组(丹参组)、F组(加味丹参饮组),每组10只。建立血瘀证兔IRI模型,采用加味丹参饮对该模型进行干预,观察炎症因子TNF-α和IL-2以及乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平变化。结果 IRI组TNF-αI、L-2、LDH和CK-MB水平明显升高,与空白组比较有统计学意义(P<0.05);加味丹参饮可以降低TNF-αI、L-2、LDH和CK-MB水平,与IRI组比较亦有统计学意义(P<0.05)。结论加味丹参饮可以降低炎症因子水平,防止心肌细胞损伤,这是其保护心肌IRI作用机制之一。

局灶性脑缺血大鼠模型的建立

实验室动物研究已取得较大的进步,大鼠是公认的建立脑缺血模型的首选动物之一,其生命力强,造模后不易死亡,大脑结构与人类相似。随着科学技术的进步,造模的方法亦不断改进，现将造模过程中出现的问题及笔者总结的方法与体会报道如下。1术前准备1.1大鼠选择一般选择SD大鼠，其大脑动脉环（Willis环）解剖结构相对稳定，变异较少。体质量一般为250～300g，级别为清洁级以上的精壮大鼠，购买回来后严格按照规则适应性饲养1周。

益气升阳法对骨髓间充质干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠学习记忆的影响

目的:观察益气升阳法对骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗血管性痴呆大鼠学习记忆的影响。方法:除正常组外,建立大鼠VD模型,造模7天后,移植组及中药组注射MSCs悬液于海马;中药组动物予中药灌胃,其余组灌胃生理盐水,连续25天后,进行水迷宫训练5天,第5天用水迷宫检测各组大鼠的学习记忆功能。结果:模型组与正常组相比,逃避潜伏期明显延长,具有显著性差异(P<0.05);中药组与模型组相比,逃避潜伏期明显缩短(P<0.05);中药组与移植组比较,有显著性差异,(P<0.05)。结论:MSCs移植联合中药治疗VD大鼠有良好的改善记忆作用。