中医学专业《组织胚胎学》教学改革思考

组织胚胎学是重要的西医学基础课程,起着承上启下的作用,组织胚胎学为生理学及病理学等后续基础课程甚至临床课程的学习奠定坚实的基础。中医学专业学生在学习组织胚胎学等西医课程时往往因课时不足、中西医思维碰撞而存在兴趣缺乏、一知半解、记忆困难等问题,而中医现代化的趋势要求中医专业学生掌握中西医结合思维。笔者在湖南中医药大学2017级中医学专业学生中尝试推行了基于蓝墨云班课的组织学课程改革和基于选修课制度的胚胎学课程改革,效果显著,口碑良好。深入分析后也提出了更好的改进措施,以期提高中医学专业组织胚胎学课程的教学效果。

中药护心康对TLR4基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型Wnt5a表达的影响

目的探讨TLR4基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型Wnt5a表达的变化及中药护心康的干预作用。方法SPF级TLR4基因敲除小鼠共68只,随机取10只为对照组,予以普通饲料喂养;其余58只予以高脂饲料建立动脉粥样硬化模型,喂养13周后从造模动物中随机选取5只解剖观察其胸主动脉,光镜下发现粥样斑块为造模成功。造模成功动物随机分为模型组、护心康组、阿托伐他汀组,Wnt抑制剂WIF组,每组12只,分别予以相应处理。正常组不做处理,模型组予以生理盐水灌胃并腹腔注射,其余各组均予相应药物灌胃和腹腔注射处理,灌胃容积均为0. 5 ml、腹腔注射容积均为0. 3 ml,每日1次。治疗8周后处死小鼠,心脏采血,酶比色法检测血脂;取胸主动脉,光镜下观察动脉粥样硬化形成情况;免疫组化法检测斑块中Wnt5a蛋白的表达。结果 (1)血脂检测:造模后动物胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平比正常组明显升高(P <0. 05);阿托伐他汀和护心康可以降低胆固醇和低密度脂蛋白水平(P<0. 05),WIF对二者的降低作用不明显;三种药物对甘油三酯和高密度脂蛋白的影响相对较小。(2)光镜观察:正常组无斑块形成,模型组可见内膜增厚,大量斑块明显形成,血管腔明显减小;各药物干预组斑块病变相对较轻。(3)Wnt5a蛋白表达:模型组中Wnt5a蛋白表达明显高于正常组(P <0. 01);与模型组相比,三种药物均能降低Wnt5a,Wnt抑制剂WIF降低作用较强(P <0. 01),护心康组和阿托伐他汀组也有明显的降低作用(P <0. 05); WIF降低Wnt5a的作用较阿托伐他汀强(P <0. 05)。结论 TLR4基因敲除小鼠动脉粥样硬化时Wnt5a表达明显升高,中药护心康能降低血脂和Wnt5a在动脉粥样硬化中的表达,从而可以减轻动脉粥样硬化的形成。

护心康对TLR4^(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型FZD的影响

目的探讨动脉粥样硬化Toll样受体4基因敲除(TLR4-/-)小鼠模型卷曲蛋白(FZD)变化特征及护心康对动脉粥样硬化的干预作用。方法 SPF级TLR4-/-小鼠70只,随机选择12只纳入正常对照组,予以普通饲料喂养;其余58只予以高脂饲料造模,喂养13周后随机选择5只解剖观察胸主动脉,光镜下发现粥样斑块为造模成功。造模成功动物随机分为模型组、护心康组、阿托伐他汀组,Wnt抑制因子(WIF)组,每组12只,分别予以相应处理。处理8周后处死小鼠,心脏穿刺采血检测血脂水平;取胸主动脉,光镜下观察动脉粥样硬化斑块形成情况;免疫组织化学法检测斑块中FZD蛋白的表达。结果模型组胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平较正常对照组明显升高(P<0.05);阿托伐他汀和护心康可降低胆固醇和低密度脂蛋白水平(P<0.05),WIF对二者的降低作用不明显(P>0.05);3种药物对三酰甘油和高密度脂蛋白的影响相对较小。正常对照组无动脉粥样斑块形成,模型组可见内膜增厚,大量斑块明显形成,血管腔明显减小;各药物干预组斑块病变相对较轻。模型组FZD蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);与模型组相比,3种药物处理组FZD水平均降低(P<0.05),但3种药物处理组FZD水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论动脉粥样硬化TLR4-/-小鼠模型胸动脉FZD表达水平明显升高,护心康能降低模型小鼠血脂和FZD表达水平,从而减缓动脉粥样硬化的形成。

护心康对氧化型低密度脂蛋白刺激单核细胞Wnt1表达的影响

目的研究护心康对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激单核细胞无翅和整合素1(Wnt1)的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的机制。方法采用TOLL样受体4(TLR4)基因敲除小鼠24只,随机分为正常组和护心康组,每组12只。分别以蒸馏水和护心康连续灌胃7 d,末次灌胃1 h后采血并分离血清。培养小鼠外周静脉血单核细胞,随机分为正常组、模型组、对照组、护心康组、阿托伐他汀组、Wnt抑制剂。正常组不造模,其余各组均用ox-LDL刺激单核细胞复制高脂模型。正常组和模型组给予条件培养液,对照组给予正常小鼠血清,护心康组给予护心康含药血清,培养液血清终浓度均为15%; WIF终浓度为10μg/ml,阿托伐他汀终浓度为10μmol/L,干预24 h后用荧光定量PCR和Western blot分别测定Wnt1基因和蛋白的表达,分别进行6次独立实验。结果与正常组相比,模型组和对照组Wnt1 mRNA和蛋白表达升高(P <0. 01);护心康组、阿托伐他汀组、WIF组Wnt1 mRNA和蛋白表达较模型组和对照组低(P <0. 05)。结论高脂刺激可以诱导TLR-4基因敲除小鼠外周血单核细胞Wnt1基因和蛋白表达升高,护心康可以有效降低这种表达。