大黄素和栀子苷配伍对全身炎症反应综合征大鼠肠黏膜屏障损伤及炎症反应的影响

目的观察大黄素和子苷配伍对全身炎症反应综合征(SIRS)大鼠肠黏膜屏障功能损伤的保护和炎症反应的抑制作用。方法选择6~8周龄雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组、模型组、大黄素组、子苷组、大黄素与子苷配伍组(配伍组)乌司他丁组。通过腹腔注射酵母多糖的方法构建大鼠SIRS模型,大黄素组、子苷组、乌司他丁组、配伍组于大鼠注射酵母多糖后即刻和12h后各给药1次。制模后24h,测定各组大鼠血清D-乳酸(D-LA)、二胺氧化酶(DAO)、内毒素(ET)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6、IL-10)含量;取小肠组织观察病理学改变;采用免疫组化法测定小肠组织核转录因子-kBp65(NF-kBp65)及Toll样受体4(TLR-4)的蛋白阳性表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠血清D-LA、DAO、ET、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10均明显升高[D-LA(μmol/L):99.11±11.93比36.94±1.92,DAO(U/L):5018.80±759.00比2253.23±372.40,ET(μg/L):0.36±0.04比0.15±0.02,TNF-α(ng/L):66.61±20.88比9.47±0.78,IL-1β(ng/L):63.73±7.64比25.86±5.90,IL-6(ng/L):392.00±56.47比111.17±36.22,IL-10(ng/L):41.90±8.12比19.75±1.54,均P<0.05],组织病理学观察可见小肠黏膜水肿明显,黏膜上皮细胞排列紊乱并伴有细胞脱落,肠黏膜内炎症细胞浸润增多,杯状细胞减少,固有层松散、充血;小肠组织中TLR-4及NF-kB蛋白阳性表达明显增强[TLR-4蛋白阳性表达(A值):0.59±0.08比0.27±0.04,NF-kB蛋白阳性表达(A值):0.65土0.07比0.30土0.06,均P<0.05]。与模型组比较,大黄素组、子苷组、乌司他丁组、配伍组血清D-LA、DAO和ET水平均明显降低[D-LA(μmol/L):67.49±8.32、69.08±6.76、69.17±5.63、58.16±7.12比99.11±11.93,DAO(U/L):3659.38±563.90、3713.29±354.70、3575.30±444.40、3087.01±227.50比5018.80±759.00,ET(μg/L):0.27±0.04、0.24±0.03、0.23±0.03、0.20±0.02比0.36±0.04,均P<0.05],促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量亦均明显著降低[TNF-α(ng/L):44.34±10.63、39.23±11.74、35.80±11.49、28.74±9.56比66.61±20.88,IL-1β(ng/L):50.30±8.22、46.74±5.10、48.25±5.16、40.84±5.02比63.73±7.64,IL-6(ng/L):299.27±50.65、263.98±37.62、281.84±63.24、216.72±38.90比392.00土56.47,均P<0.05]。大黄素、子苷、大黄素与子苷配伍、乌司他丁均可升高血清抗炎因子IL-10水平(ng/L:92.63±32.83、87.34±30.79、71.66±16.82、133.70±39.40比41.90±8.12,均P<0.05)。大黄素组、子苷组、配伍组、乌司他丁组肠组织病理改变减轻,小肠组织中NF-kBp65和TLR-4蛋白阳性表达均显著降低[TLR-4蛋白阳性表达(A值):0.49±0.03、0.47±0.08、0.36±0.08、0.42±0.06比0.59±0.08,NF-kBp65蛋白阳性表达(A值):0.50±0.06、0.49±0.07、0.42±0.06、0.46±0.09比0.65±0.07,均P<0.05]。与大黄素组、子苷组比较,配伍组血清D-LA、DAO、ET、TNF-α、IL-1β、IL-6均显著降低,IL-10水平显著升高,肠组织病理改变减轻,小肠组织NF-kBp65和TLR-4蛋白阳性表达水平均明显降低(均P<0.05)。结论大黄素和子苷有助于缓解酵母多糖引发的SIRS,其作用与保护小肠黏膜屏障、抑制炎症反应有关,二者配伍有增效作用。

肝细胞癌中microRNA-888基因家族的表达特征及临床意义

目的初步探讨microRNA-888(miRNA-888)基因家族成员在肝细胞癌中的表达特征及其意义。方法选取湖南中医药大学第一附属医院在2012年1月-2017年12月病理确诊为肝细胞癌的患者72例,另收集72例健康自愿者的肝组织作为正常对照组。运用实时定量PCR和原位杂交分析肝癌组织中miRNA-888家族中miRNA-888、miRNA-891a、miRNA-891b、miRNA-892a和miRNA-892b的表达情况,初步探讨miRNA-888、miRNA-891b和miRNA-892a的表达与肝癌临床病理特征的关系。计量资料2组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ2检验。结果 miRNA-888、miRNA-891b、miRNA-892a在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织(2. 53±0. 75 vs 0. 46±0. 08,t=14. 02,P <0. 001; 2. 26±0. 38 vs 1. 19±0. 21,t=7. 75,P <0. 001; 5. 44±1. 01 vs 1. 06±0. 30,t=35. 27,P <0. 001);原位杂交分析进一步验证了miRNA-888、miRNA-891b和miRNA-892a 3种miRNAs主要表达定位于肝癌组织中的细胞核,与正常肝组织表达水平比较差异均有统计学意义(3. 91±0. 92 vs 1. 21±0. 42,t=22. 65,P <0. 001; 2. 92±0. 76 vs 0. 83±0. 21,t=22. 92,P <0. 001; 3. 81±0. 99 vs 1. 30±0. 32,t=20. 47,P <0. 001)。miRNA-888和miRNA-891b高表达在组织学分级和临床分期的比较中差异有统计学意义(χ2值分别为6. 25、4. 44、4. 76、6. 05,P值均<0. 05),而miRNA-892a高表达在Ⅲ、Ⅳ期肿瘤中表达更明显(χ2=8. 50,P <0. 001)。结论 miRNA-888、miRNA-891b及miRNA-892a在肝癌组织中表达明显增加; miRNA-888,miRNA-891b和miRNA-892a表达升高与肝癌恶性程度更高密切相关。

谷氨酰胺在大鼠门静脉高压性胃病中的作用机制

目的初步探讨谷氨酰胺在大鼠门静脉高压性胃病中的作用及相关机制。方法 60只SD大鼠随机均分为4组,A组(假手术)、B组(假手术组+谷氨酰胺)、C组(门静脉部分结扎)、D组(门静脉部分结扎+谷氨酰胺),每组15只。采用门静脉主干部分结扎法复制大鼠门静脉高压性胃病模型,2周后测量大鼠门静脉压力(PVP)、胃损伤指数(GI)、胃黏膜病理评分(PI)及肝脏形态变化,检测血浆中ALT、AST、Alb、一氧化氮(NO)、TNFα、超氧化物歧化酶(SOD)的表达情况。计量资料2组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 4组间PVP比较差异有统计学差异[(1.17±0.15)k Pa vs(1.21±0.19)k Pa vs(2.65±0.16)k Pa vs(2.18±0.22)k Pa,F=4.60,P<0.05],C组、D组分别与A组、B组比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05);C、D组GI和PI相比差异均有统计学意义[15.52±2.05 vs 8.26±1.23,7.56±1.53 vs 3.15±1.42,t值分别为5.84、7.45,P值均<0.05)];4组间ALT、AST、Alb比较差异均无统计学意义(P值均>0.05);4组间TNFα、NO、SOD比较差异均有统计意义[(0.56±0.11)ng/ml vs(0.41±0.21)ng/ml vs(1.35±0.26)ng/ml vs(0.68±0.21)ng/ml;(1.63±0.15)μmol/gpro vs(1.41±0.12)μmol/gpro vs(5.52±1.06)μmol/gpro vs(2.26±0.83)μmol/gpro;(148.21±6.21)U/mg vs(154.21±5.31)U/mg vs(74.56±4.21)U/mg vs(135.25±4.82)U/mg,F值分别为5.24、8.40、14.78,P值均<0.05],C组分别与A组、B组TNFα、NO、SOD比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05),C、D组TNFα、NO、SOD比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 PHG的致病因素是多样的,谷氨酰胺可减轻大鼠PHG胃黏膜水肿及出血,可降低NO、TNFα、SOD含量,具有较好的抗氧化作用,有助于PHG的治疗。

女性阴道自采样本检测PAX1/JAM3双基因甲基化标志物作为子宫颈癌筛查的可行性评估

目的探讨女性自采样本进行配对盒基因1(PAX1)/结合连接黏附分子3(JAM3)双基因甲基化检测在子宫颈癌筛查与绝经前后女性分层管理的应用价值。方法单中心横断面研究。2023年1—11月在阴道镜门诊同时收集女性自采样本及医生采样样本,分别进行PAX1/JAM3双基因甲基化(PAX1^(m)/JAM3^(m))检测,以组织病理学为标准。总计招募301例接受阴道镜检查女性,并对272例有组织病理与检测信息的女性进行统计分析。通过Spearman相关性分析和χ^(2)检验比较两种采样方法PAX1^(m)/JAM3^(m)检测结果的一致性。通过计算受试者操作特征曲线(ROC)和曲线下面积(AUC)比较女性自采样本甲基化检测与现行临床检测及其组合方法在临床研究中用于子宫颈癌筛查的效益。结果在所有招募的受试者中,正常子宫颈组织或慢性子宫颈炎102例(37.5%)、子宫颈上皮内瘤变1级(CIN1)72例(26.4%)、CIN243例(15.8%)、CIN329例(10.7%)、子宫颈癌26例(9.6%)。按最低检出量公式计算区分成为81例一致性研究组和191例临床研究组。Spearman相关性分析表明,自采样本和医生采样样本进行PAX1和JAM3双基因甲基化检测结果的卡氏评分呈正相关(r=0.858、0.828,P均<0.001);自采样本在临床研究中结果显示PAX1^(m)/JAM3^(m)检测诊断CIN2或更严重病变(CIN2+)的敏感度和特异度分别为77.6%(95%CI 65.3%~86.4%)和87.2%(95%CI 80.5%~91.9%),PAX1^(m)/JAM3^(m)联合人乳头瘤病毒16/18型(HPV16/18)检测的敏感度与高危人乳头瘤病毒(hrHPV)检测相同为89.7%(95%CI 79.2%~95.2%);在CIN3+时为96.0%(95%CI 80.4%~99.3%),优于hrHPV的92.0%(95%CI 75.0%~97.8%)、细胞学的82.6%(95%CI 62.9%~93.0%)及sPAX1^(m)/JAM3^(m)联合细胞学检测低度及以上鳞状上皮内病变(LBCLSIL+)[87.0%(95%CI 67.9%~95.5%)]。结论女性自采样本进行PAX1与JAM3双基因甲基化检测作为子宫颈癌筛查具有操作与临床可行性。

胰源性门静脉高压胃静脉破裂出血危险因素分析及列线图预测模型构建

背景与目的:由于近年来胰腺相关疾病的发病率和诊断率逐渐增加,胰源性门静脉高压(PPH)及其并发症的发病率及诊断率也随之增加。PPH可出现腹痛、脾功能亢进、消化道出血等临床表现,胃静脉破裂出血是PPH最严重的并发症,可导致失血性休克,甚至死亡。而目前尚无公认的标准来预测PPH并发胃静脉破裂出血的风险。因此,本研究探讨PPH胃静脉破裂出血的相关危险因素并建立风险预测模型,为临床该病的防治提供参考。方法:以湖南中医药大学第一附属医院和湖南省人民医院自2012年1月—2022年1月收治的176例PPH患者为研究对象,根据是否并发胃静脉破裂出血分为出血组(24例)和未出血组(152例)。收集两组患者的一般资料:性别、年龄、病因、高血压、糖尿病,实验室结果:脾功能亢进、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、活化部分凝血酶原时间(APTT)与影像学指标:胃左静脉(LGV)内径、胃网膜静脉(GEV)内径、GEV内径/LGV内径比值。采用单因素与多因素Logistic回归分析筛选出PPH并发胃静脉破裂出血的影响因素,建立列线图风险预测模型,并通过受试者工作特征(ROC)曲线、校准曲线和决策曲线评估模型的预测效能、一致性和临床价值。结果:单因素分析显示,糖尿病、脾功能亢进、PT、FIB、LGV内径、GEV内径/LGV内径比值与PPH并发胃静脉破裂出血有关(均P<0.05);多因素Logistic回归显示,糖尿病(OR=0.144,95%CI=0.031~0.675,P=0.014)、LGV内径(OR=3.129,95%CI=1.608~6.090,P=0.001)是PPH并发胃静脉破裂出血的独立危险因素;而FIB(OR=0.580,95%CI=0.348~0.966,P=0.037)、GEV内径/LGV内径比值(OR=0.024,95%CI=0.001~0.696,P=0.030)是PPH并发胃静脉破裂出血的独立保护性因素。纳入以上因素与有临床意义的GEV内径构建PPH胃静脉破裂出血的列线图模型,该模型的ROC曲线下面积为0.954,校准曲线与标准曲线具有很高的拟合度,决策曲线分析显示,当风险阈值在2%~85%之间时,能得到很好的净获益值。结论:糖尿病、LGV内径,FIB、GEV内径/LGV内径比值与PPH并发胃静脉破裂出血密切相关,所建立的列线图风险预测模型可有效识别PPH并发胃静脉破裂出血的高风险患者,可为临床决策提供参考。

柴胡疏肝散加减联合金钱胆通颗粒对腹腔镜胆囊切除术后患者胃肠功能恢复的影响

目的 探讨柴胡疏肝散加减联合金钱胆通颗粒对腹腔镜胆囊切除术后患者胃肠功能恢复的影响。方法 选取2022年1—12月于湖南中医药大学第一附属医院就诊并行腹腔镜胆囊切除手术治疗的患者62例作为研究对象,采用随机分组法将其分为对照组(n=31)及观察组(n=31)。术后对照组给予常规疗法,观察组采用常规治疗+金钱胆通颗粒+柴胡疏肝散加减治疗。比较两组患者术后胃肠功能恢复情况以及治疗效果。结果 观察组治疗有效率93.55%高于对照组的80.65%(P<0.05);观察组术后肠鸣音恢复时间及第一次肛门排气、排便时间短于对照组(P<0.05)。结论 柴胡疏肝散加减联合金钱胆通颗粒可以有效促进腹腔镜胆囊切除术后患者的胃肠功能恢复,提高治疗效果。